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Smad信号通路在骨髓源性心肌干细胞向心肌分化中的作用
目的 研究Smad信号通路在BMP-2诱导的骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)向心肌分化中的作用,探讨MCSCs向心肌分化的信号转导机制.方法 从SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导向心肌定向分化.Western blotting和免疫细胞化学法检测诱导后细胞内磷酸化的Smadl/5/8的表达及其随诱导时间在细胞内分布的变化.RT-PCR检测诱导前后细胞内GATA-4和心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)mRNA的表达.结果 BMP-2诱导后15 min,细胞内可检测到磷酸化的Smadl/5/8的表达,30 min～1 h表达明显增加,1 h后开始降低,4 h呈低表达.BMP-2诱导后15 min,磷酸化的Smadl/5/8仅见于胞质中,30 min胞质和胞核均见表达,1 h主要在胞核内表达.BMP-2诱导后2周,细胞明显表达GATA-4和cTnT mRNA.诱导后4周细胞呈现成熟心肌细胞样形态.用SB203580抑制Smad信号后,GATA-4和cTnT mRNA的表达显著降低,细胞形态变化不明显.结论 Smad信号通路在BMP-2诱导MCSCs向心肌分化中发挥重要的介导作用.
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脂肪间充质干细胞CD73亚群心肌分化能力评价
目的 探讨CD73+和CD73-脂肪间充质干细胞(ADMSCs)两个亚群向心肌分化能力的差异,筛选出心肌分化优势亚群,为进一步开展细胞治疗心肌疾患提供实验参考.方法 流式细胞仪分选CD73+/CD73-ADMSCs亚群,HE染色观测其形态.体外5-氮杂胞甙(5-aza)诱导CD73 +/CD73-亚群,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT),Real-time PCR检测cTnT、Gata-4变化;4'6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记两个亚群后,移植到大鼠心肌内,免疫荧光法检测移植细胞cTnT表达.结果 CD73+ ADMSCs形态以小细胞为主呈细长形或纺锤状,CD73-细胞以宽大扁平或方形等为主.体外成心肌诱导后,CD73+ ADMSCs心肌特异性cTnT表达率为45.5％、CD73-亚群为5.75％,基因水平上CD73+亚群表达cTnT、Gata-4明显高于阴性亚群(P＜0.01).体内CD73+亚群较阴性亚群高表达cTnT.结论 CD73+ ADMSCs较CD73-ADMSCs具有更高向心肌分化的潜能,CD73+ ADMSCs可能更具有心肌治疗的前景.
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伴心肌特异性肌钙蛋白T升高的皮肌炎
报告1例伴心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)升高的皮肌炎.患者女,38岁.发热、肌肉无力2个月,躯干及四肢红斑1个月.实验室及辅助检查:肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)及cTnT明显升高,反复心电图、心脏彩超检查未见异常,除外心肌损伤.诊断:皮肌炎.予糖皮质激素联合甲氨蝶呤治疗3个月,皮损消退,肌无力、肌痛症状缓解,cTnT随CK、CK-MB下降而下降.对国内外文献复习,皮肌炎患者可以有cTnT升高.因此,对于cTnT升高的结果判断还需要结合临床表现及其他检查综合分析,避免误诊.
关键词： 皮肌炎 心肌特异性肌钙蛋白T 肌酸激酶 肌酸激酶同工酶MB
