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海马Cajal-Retzius细胞的正常发育及在APPswe转基因小鼠中的改变
目的 观察reelin阳性Cajal-Retzius细胞(CR细胞)在正常小鼠及APPswe转基因小鼠海马发育中的变化,探讨CR细胞在阿尔茨海默病(AD)发生发展过程中所起的作用,为研究AD发病机制和临床治疗提供新的思路和方法 .方法 80只实验小鼠分为APPswe转基因模型组和对照组,每一组内分E16、P0、P7 、P15 、P30、P90、P180和P360 8个年龄段,每一年龄段小鼠各取5只.另取12月龄模型组和对照组小鼠各3只,用硫黄素S染色技术检测APPswe转基因小鼠脑内沉积的老年斑;免疫荧光技术标记正常及模型组小鼠齿状回分子层内reelin阳性CR细胞,同时采用谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、活化型Caspase-3分别与reelin双重标记以研究CR细胞的组织化学特点及凋亡情况;后利用免疫印迹方法 对海马组织内reelin的活化片段进行半定量分析.结果 随着海马发育CR细胞逐渐减少,不同时期的reelin阳性CR细胞可以分别被谷氨酸、GABA、Caspase-3标记;APPswe转基因小鼠海马内CR细胞的数量明显少于正常对照组,免疫印迹法结果 与免疫细胞化学统计结果吻合.结论 出生后CR细胞的丢失是由于凋亡所致,在海马发育的不同时期CR细胞分泌兴奋性或抑制性神经递质,以此来调节突触间的信息传递与突触可塑性.APPswe转基因小鼠海马内CR细胞低于正常对照组,提示CR细胞丢失可能与AD相关的神经元退行性病变有关.
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小鼠Cajal-Retzius细胞发生及其细胞周期相关蛋白的表达
目的 观察小鼠Cajal-Retzius (CR)细胞的发生以及多种细胞周期相关蛋白的表达情况.方法 各日龄共计83只小鼠,应用免疫荧光法、溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)等技术对胚胎和出生后小鼠进行实验.结果 1.CR细胞在E10和E11发生,它们主要分布在新皮质分子层和海马分子层,其密度随日龄的增长而逐渐降低.2.从E15到成年,细胞周期蛋白(cyclin) A2、cyclin E1和CDT1在CR细胞中持续表达,但始终未发现cyclin D1阳性的CR细胞.结论 CR细胞对大脑发育有重要作用.CR细胞密度的减小趋势与新皮质发育的活跃程度相关.CR细胞已经退出了细胞周期而进入了Go期.如果CR细胞再次分裂,它们会因其轴突无法吸收并反向运输神经营养因子而凋亡.
关键词： 大脑皮质 发育 Cajal-Retzius细胞 免疫荧光 小鼠 -
Cajal-Retzius细胞调节锥体细胞顶树突发育及海马片层化的形成
目的 探讨Cajal-Retzius(CR)细胞与海马锥体细胞顶树突发育以及海马片层化形成的关系.方法 利用DiI示踪法标记槽通路和穿通通路,并采用微管蛋白(tubulin)、神经元核抗原(NeuN)和Reelin免疫荧光染色法,对120例小鼠苔藓纤维的发生、锥体细胞顶树突的生长以及海马分子层Reelin阳性的CR细胞分布进行观察.结果 槽通路和穿通通路由内嗅皮质发出,分布于槽区和海马分子层,在槽区和海马本部分子层存在大量Reelin阳性细胞,提示Reelin阳性的神经细胞可能参与神经纤维的寻径.随着小鼠的发育,海马锥体细胞顶树突逐步生长,并向分子层伸入,构成海马内分子层;内分子层逐渐增宽,占据了光辉层和放射层.而外分子层(腔隙分子层)内含丰富的穿通纤维,其位置与 Reelin阳性的CR细胞所在部位极为一致,提示两者有密切关系.结论 Reelin阳性的CR细胞对槽通路、穿通通路的神经纤维寻径起着指导作用.此外,CR细胞的分布和发育特点提示,CR细胞对锥体细胞顶树突发育、海马片层化和区域化的形成起重要作用.
