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白藜芦醇预处理对大鼠皮质神经元氧糖剥夺/再复氧损伤后神经元突起生长的影响
目的 探讨白藜芦醇预处理对大鼠皮质神经元氧糖剥夺/再复氧损伤后神经元突起生长的影响.方法 体外皮质神经元氧糖剥夺150min,复氧培养24 h.实验分为正常组、对照组和5μmol/L白藜芦醇预处理组.免疫荧光法鉴定神经元,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法测定细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光法和Western blotting检测微管相关蛋白2(MAP-2)和生长相关蛋白43(GAP-43)的表达,并计数神经元突起的长度和数目.结果 培养细胞均高表达神经元特异性标记物MAP-2.白藜芦醇组细胞活力较对照组明显增加(0.551±0.009比0.436±0.013,P＜0.01),而凋亡则明显降低(18.3％±1.3％比35.3％±1.9％,P＜0.01),上调MAP-2(0.790±0.102比0.462±0.063,P＜0.01)和GAP-43(0.768±0.084比0.424±0.065,P＜0.01)蛋白的表达,增加神经元突起的长度(89.510±6.939比61.538±9.14,P＜0.01)和数目(6.347±1.002比3.040±0.608,P＜0.01).结论 白藜芦醇预处理能减轻氧糖剥夺/再复氧对神经元的损伤,促进神经元突起的生长.
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环王巴明抑制sonic hedgehog信号通路对氧糖剥夺/再复氧损伤大鼠皮质神经干细胞增殖的影响
目的 探讨环王巴明预处理抑制sonic hedgehog信号通路对体外氧糖剥夺/再复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤大鼠大脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响.方法 新生SD大鼠大脑皮质神经干细胞采用悬浮培养法分离纯化.第3代神经干细胞贴壁培养后氧糖剥夺150 min,复氧培养24 h.实验分为正常组、模型组及环王巴明预处理组.细胞鉴定采用免疫荧光法,细胞活力采用CCK-8法检测,细胞增殖采用BrdU法及流式细胞周期检测,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达采用Western blot检测.结果 悬浮及贴壁培养细胞均高表达巢蛋白.模型组及环王巴明组细胞活力较正常组显著降低.其中,环王巴明组降低更明显(P＜0.05).模型组细胞增殖明显,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达上调,而环王巴明组细胞增殖较模型组低,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达下调(P＜0.05).结论 环王巴明预处理能抑制体外氧糖剥夺/再复氧损伤后神经干细胞的增殖,提示Shh信号可能参与损伤后神经干细胞增殖的调控.
