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超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4、连接蛋白43和平足蛋白在小鼠胚胎心的表达与心传导系的发生
目的 探讨小鼠胚胎心传导系的发生机制. 方法 用抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)、抗缝隙连接蛋白43( CX43)和抗平足蛋白(podoplanin)抗体,对40只胚龄9～16d小鼠胚胎心进行连续石蜡切片并免疫组织化学或免疫荧光染色. 结果 胚龄9d,较强的HCN4阳性表达集中在MHC阴性的静脉窦壁,随心脏发育,HCN4较强阳性表达逐渐向窦房结转移.胚龄11d开始,CX43阴性表达显示部位特异性.CX43阴性染色经窭房结沿右心房背侧壁和左、右静脉瓣向房室管背侧壁延伸.胚龄13d,左、右静脉瓣与房间隔底部融合后,进一步延续为房室管背侧壁发育中的CX43阴性染色的房室结,继而与室间隔顶部CX43阴性的房室束相连.胚龄9～ 10d,在MHC阳性心肌、心包腔背侧壁脏壁中胚层心肌前体细胞及静脉窦周间充质均显示podoplanin阳性表达.胚龄11 ～13d,podoplanin阳性间充质细胞沿心脏外表面扩展形成podoplanin阳性间皮样心外膜. 结论 心脏发育早期,主起搏点位于静脉窦壁,起搏电位的产生早于收缩功能的发生.CX43阴性心肌是发育中的心传导系心肌,在胚龄11d即可观察到心传导系早期雏形.podoplanin参与促进心肌前体细胞向心肌细胞的分化.
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胸腺瘤组织COX -2和podoplanin表达及其临床意义的研究
目的 探讨环氧化酶-2(cox-2)、平足蛋白(podoplanin)在胸腺瘤组织中表达的生物学、临床意义及其相互关系.方法 采用免疫组织化学SP(streptavidin - perosidase)法,检测51例胸腺瘤患者中COX -2、podoplanin的表达.结果 51例胸腺瘤组织中,随着Masaoka分期进展,COX -2、podoplanin阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义,X2值分别为28.00和23.64,P值分别＜0.05.COX -2和podoplanin的阳性表达率与胸腺瘤的Masaoka分期等参数有关；与胸腺瘤组织学分型有关,X2值分别为11.79和25.27,P值分别为0.007和0.021,P＞0.05.A/AB型胸腺瘤COX -2阳性率与B1 -3型胸腺瘤比较有统计学意义(P＜0.05).COX -2与podoplanin的表达呈正相关,r=0.569,P＜ 0.01.认为COX -2和podoplanin的阳性表达与胸腺瘤是否合并重症肌无力(MG,Myasthenia Gravis)无关,X2值分别为0.370和0.004,P值分别＞0.05.结论 COX -2及podoplanin的表达与胸腺瘤的发生及侵润性相关,可作为其判断临床生物学行为和恶性程度的重要生物学指标,为临床医生提供诊断和辅助治疗依据.
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平足蛋白生物学功能的研究进展与应用前景
平足蛋白（PDPN）是Ⅰ型唾黏蛋白样的跨膜糖蛋白，主要表达在淋巴管内皮上，它在炎症的发生发展、淋巴管的分化与形成、肺泡的成熟和维持、肾脏滤过屏障的完整性及血小板的聚集等方面中都起着一定作用。近年来越来越多的研究证明PDPN在多种肿瘤细胞表面表达上调，且PDPN与血小板表面表达的C型凝集素样受体2（CLEC-2）间的相互作用在肿瘤的生长、迁徙与转移中有着重要作用，因此抗PDPN的功能性抗体为肿瘤患者的治疗提供了新的方向，文章针对PDPN功能的研究进展及应用前景进行综述。
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平足蛋白与乳腺癌相关研究进展
平足蛋白(PDPN)是一种1型跨膜糖蛋白,在多种正常组织中被发现,既往认为PDPN是淋巴内皮细胞和淋巴管生成的特异性标志物.但近年研究结果显示,PDPN在多种恶性肿瘤及肿瘤相关成纤维细胞中表达或高(过)表达,且在肿瘤的发生、发展及肿瘤细胞的侵袭及转移等过程中发挥了重要作用.本文介绍了PDPN分子结构及生物学功能,并综述国内外关于PDPN与乳腺癌关系的研究进展,以进一步分析PDPN在乳腺癌诊断和治疗中的价值.
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平足蛋白的研究进展
的淋巴管内皮.本文对Podoplanin新的研究进展综述如下.
关键词： 平足蛋白 肾小球上皮细胞整合膜蛋白 Podoplanin 综述 肿瘤 -
血小板C型凝集素样受体-2参与肿瘤血行转移的研究进展
肿瘤转移过程极其复杂,研究发现血小板与肿瘤血行转移密切相关,血小板可释放生物活性因子协助肿瘤细胞逃脱免疫监视,促进肿瘤细胞的上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、增殖和侵袭能力,以加快肿瘤血行转移.近年来研究发现,血小板表面的C型凝集素样受体2(C-type lectin-like receptor-2,CLEC-2)与其配体平足蛋白(podoplanin,PDPN)结合后可激活血小板参与肿瘤的生长、迁徙和转移.应用抗CLEC-2抗体或阻断CLEC-2与PDPN的结合可能是抗肿瘤转移的一个新的研究方向,本文就CLEC-2在肿瘤血行转移中的作用及其临床应用前景进行综述.
关键词： 肿瘤 血小板 肿瘤转移 C型凝集素样受体-2 平足蛋白 -
血小板与过表达平足蛋白的乳腺成纤维在乳腺癌原位生长中的作用及其机制
目的 观察过表达平足蛋白(PDPN)的人乳腺成纤维细胞(HMF)在乳腺癌细胞株MDA-MB-231体外成瘤中的作用,探讨降低外周血小板数对过表达PDPN的HMF(HMF-P)促进肿瘤生长作用的影响及其机制.方法 构建PDPN真核表达质粒PDPN-pEGFP-LV5,慢病毒转染HMF构建HMF-P,观察HMF-P对裸鼠成瘤的促进作用.应用血小板去除抗体R300构建血小板减少症小鼠模型,观察血小板数降低后HMF-P促进肿瘤作用的变化,Western blot检测肿瘤生长因子的表达变化.结果 HMF-P+ MDA-MB-231共注射组瘤体体积大,达3.16 cm3,而HMF+ MDA-MB-231和MDA-MB-231组瘤体体积分别为1.93、0.52 cm3.降低血小板数后HMF-P+ MDA-MB-231组瘤体体积降至1.03 cm3,而HMF+ MDA-MB-231组瘤体积变化不明显.Western blot检测显示HMF-P+MDA-MB-231组血小板源性生长因子D(PDGF-D)的表达增加,降低血小板数后其表达明显降低.结论 HMF-P可以促进MDA-MB-231的成瘤作用,其可能的作用机制是PDPN与浸润血小板相互作用促进其活化并释放PDGF-D相关.降低外周血血小板数以减少血小板肿瘤浸润可以抑制HMF-P促进肿瘤生长的作用.
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血小板新型活化受体CLEC-2和平足蛋白在肿瘤转移中的研究进展
平足蛋白(podoplanin,PDPN)是广泛表达在多种肿瘤细胞中的Ⅰ型跨膜糖蛋白.C型凝集素受体2(C-type lectin-like receptor-2,CLEC-2)属于Ⅱ型跨膜糖蛋白,是近年来发现的一种新型血小板表面活化受体,是PDPN的内源性受体,两者结合后可引起血小板活化聚集.聚集的血小板调节肿瘤细胞黏附到血管壁,逃避宿主免疫攻击,并释放一系列促进肿瘤细胞生长和转移的活性物质,从而形成新的转移灶,提示PDPN和CLEC-2可成为治疗肿瘤转移的新靶点.本文主要讨论了这两个靶点促进肿瘤转移的机制,并对其近治疗进展加以总结和期望.
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重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达
目的 构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究.方法 通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中.通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性.结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集.结论 成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集.
