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睾丸生殖细胞肿瘤瘤旁原位癌病变组织病理及免疫组化研究
目的观察睾丸原位癌病理形态学改变并探讨胎盘碱性磷酸酶(PLAP)的表达及意义.方法对14例睾丸生殖细胞肿瘤瘤旁原位癌病变组织进行HE染色观察,采用免疫组化方法检测其PLAP表达.结果原位癌病变在曲细精管呈弥漫分布,受累曲细精管变细,基底膜增厚,管内生精细胞消失,仅见癌细胞和Sertoli细胞.癌细胞体积大,核硕大,染色质细,常见居中核仁,胞质透亮,瘤细胞靠近基底膜排列,管内Sertoli细胞正常.免疫组化结果显示,14例睾丸原位癌均表达PLAP,其中12例呈强(+),正常生精细胞及阴性对照无PLAP表达.结论睾丸原位癌呈特征性的病理形态学改变,癌细胞高表达PLAP,表明PLAP是一种特异性强、灵敏度高的肿瘤标记物,它在睾丸原位癌早期诊断中具有实用价值.
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子宫颈上皮样滋养细胞肿瘤一例
患者,48岁.因不规则阴道出血、阴道分泌物增多伴恶臭1个月于2006年5月17日入院.患者20年前因孕7个月胎死宫内引产,近20年无妊娠及流产史,8年前行子宫次全切除术.妇科检查:宫颈7点处有一2 cm×3 cm×1 cm大小的糜烂性肿物,触之有少量出血,肿物已侵犯到附近的直肠.血人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平正常.遂行宫颈活检,钳除标本送病理检查,表面暗红色,切面灰红色,质地中等偏软.镜下可见萎缩的鳞状上皮,其下见弥漫分布的瘤细胞,多数瘤细胞胞质丰富、嗜酸性或透明,可见核分裂象,地图状分布的玻璃样物质及坏死碎片位于瘤细胞巢内或围绕于巢周,间质可见薄壁小血管扩张瘀血.见图1~3.免疫组化检查结果:细胞角蛋白(CK)AE1和AE3、胎盘碱性磷酸酶(PLAP)、人胎盘催乳素(hPL)、上皮膜抗原(EMA)、E钙黏蛋白、表皮生长因子受体(EGFR)、抑制素呈弥漫性阳性反应,极少数细胞hCG呈阳性反应,细胞增殖标志物Ki-67指数为35%.病理诊断为宫颈上皮样滋养细胞肿瘤(ETT).确诊后患者由于经济困难未行手术治疗及化疗,仅口服免疫增强剂治疗.随访已1年,除阴道间断出血外一般情况尚好.
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Ki67、胎盘碱性磷酸酶在细胞角蛋白对颅内生殖细胞瘤和垂体瘤鉴别诊断中的价值
目的 探讨Ki67、胎盘碱性磷酸酶(placental alkaline phosphatase,PLAP)、细胞角蛋白(cytokeratin,CK)的表达在颅内生殖细胞瘤(鞍区)与垂体瘤鉴别诊断中的价值.方法 选取我院36例颅内生殖细胞瘤患者和40例垂体瘤患者,免疫组化法测定两种肿瘤组织中Ki67、PLAP和CK蛋白的表达水平,分析两种组织中这3种蛋白表达的差异.结果 Ki67、PLAP在颅内生殖细胞瘤中的阳性表达率分别为95.2%(20/21)和88.6%(31/35),显著高于在垂体瘤的阳性表达率[47.6%(10/21)和16.7%(5/30)](x2=11.667、33.800,P均<0.05).CK在颅内生殖细胞瘤的阳性表达率为27.8%(5/18),显著低于在垂体瘤的阳性表达率82.6%(19/23)(x2=12.508,P<0.001).结论 Ki67、PLAP和CK蛋白可作为辅助颅内生殖细胞瘤(鞍区)和垂体瘤鉴别诊断的生物学指标.
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人正常早孕滋养细胞体外培养株的系统鉴定
目的建立人早孕滋养细胞株(HPT-8)的系统鉴定方法.方法通过光镜、扫描电镜、透射电镜、免疫组化和免疫荧光激光共聚焦的方法对体外培养出的HPT-8进行系统鉴定评价.结果电镜下可见细胞表面微绒毛丰富;胞质丰富;内质网扩张明显,细胞间紧密的桥粒样结构连接;检测细胞胞浆中角蛋白18和波形蛋白均为阳性,细胞胞浆中角蛋白7为阳性,细胞膜上移动相关蛋白为阳性.表皮生长因子受体、滋养细胞趋化因子和胎盘碱性磷酸酶结果均阳性,而人绒毛促性腺激素和胎盘催乳素结果均为阴性.结论通过多种方法对HPT-8进行形态、超微结构、蛋白骨架和功能指标的综合评价,可以较全面的确定体外传至72代的细胞株HPT-8为具有部分内分泌功能的滋养细胞株,为进一步开展实验研究建立细胞模型.
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血清中胎盘来源外泌体的分离与鉴定
目的:妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离纯化正常孕妇血清中胎盘来源外泌体,Western blot检测胎盘来源外泌体标记蛋白分子( CD63、CD81、PLAP),银染法分析各密度层中所有蛋白质条带,透射电镜鉴定胎盘来源外泌体形态,动态光散射测定外泌体粒径及分布。结果通过蔗糖密度梯度离心后得到的各分层液经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见, Western blot结果显示CD63、CD81和PLAP同时表达于21%~34%蔗糖密度层,证明血清胎盘外泌体主要存在于1.09~1.16 g/mL蔗糖密度层。透射电镜鉴定获得的胎盘来源外泌体形态符合一般外泌体特征,且特异表达PLAP。动态光散射测定获得的胎盘外泌体直径分布于28~91 nm,且大小均一。结论成功建立了一种简便、快捷、高效分离血清中胎盘来源外泌体的改良方法,为研究胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘相关并发症中的作用奠定实验基础。