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抗弓形虫表膜抗原P30单克隆抗体的制备与鉴定
为制备抗弓形虫主要表膜抗原P30单克隆抗体并进行鉴定，进而为弓形虫病诊断、抗原的提纯及亚单位疫苗的制备等提供可靠依据。用弓形虫速殖子膜蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，筛选出能够稳定分泌高滴度抗P30单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并测定单克隆抗体免疫球蛋白亚类和抗体效价，用IFAT进行单抗识别的抗原定位，并通过SDS-PAGE 和Western-Blot 分析鉴定。结果获得了两株抗P30抗原的杂交瘤细胞株E3和G2，其分泌的抗体与肺孢子虫、隐孢子虫等抗原均不发生交叉反应。2株单抗均属IgG1亚类，且识别的抗原定位于速殖子表膜。结果表明，制备的抗P30抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和特异性的单克隆抗体。
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弓形虫主要表膜P30抗原的纯化与鉴定
目的 单克隆抗体免疫亲和层析技术提纯弓形虫主要表膜P30抗原SDS-PAGE进行鉴定。 方法 用已建立的能分泌抗弓形虫P30抗原的E3杂交瘤细胞腹腔注入BALB/c小鼠自腹水中收集单克隆抗体（McAb），经饱和硫酸胺沉淀后DEAE-纤维柱层析纯化，偶联至溴化氢活化的琼脂糖4B载体上装柱，将大量的低频超声粉碎速殖子抗原反复过柱洗脱以收集纯化的P30蛋白质并通过SDS-PAGE进行鉴定。 结果 经单克隆抗体免疫亲合层析约获得了8.1 mg较纯的P30蛋白质，在SDS-PAGE上呈现单一条带。 结论 单克隆抗体免疫亲合层析技术为一较好的提纯P30抗原的方法。
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弓形虫P30抗原诱导小鼠抗弓形虫感染免疫保护的研究
目的探讨弓形虫主要表膜p30抗原免疫小鼠后的抗感染保护作用.方法用单克隆抗体分离纯化的p30抗原免疫小鼠,然后用RH株速殖子和Fukaya株包囊攻击感染,观察急性感染后小鼠死亡时间及慢性感染脑包囊形成的影响,并观察感染后不同时间抗体水平、细胞因子和T细胞亚群的变化.结果p30抗原免疫小鼠后对攻击感染表现为,在一定程度上延长感染小鼠的存活时间,减少脑包囊的形成数量.血清中特异性抗体水平及IFN-γ、IL-2水平均高于同期对照组,而且免疫鼠脾CD4+和CD8+T淋巴细胞在感染早期升高较快,第4周达高峰,CD4+/CD8+比值随感染时间的延长而逐渐下降.结论p30抗原免疫小鼠对攻击感染能特异性刺激小鼠产生体液和细胞免疫应答,具有明显的抗感染作用.
