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弓形虫抗原的保护性研究
目的 研究弓形虫抗原对免疫宿主的保护性。 方法 用SDS-PAGE大胶板电泳对弓形虫抗原进行分离，选择4组份特异抗原带（P22～26、P30、P35、P67）洗脱获得抗原后，分别与福氏完全佐剂混匀免疫小鼠（每组10只），发现P30诱导的小鼠抗弓形虫IgG抗体出现早，滴度高，其次为P35。以毒力减弱的RH株弓形虫对免疫后的各组小鼠进行攻击。 结果 对照组、P22～26、P30、P35和P67组小鼠的平均存活时间分别为7.1、7.8、8.3、8.0和7.3 d。 结论P30对小鼠具有较强的保护力(P<0.05)，次为P35。二者可能成为弓形虫疫苗的候选抗原。
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弓形虫不同组分抗原免疫保护性的研究
目的探讨弓形虫体不同组分抗原诱导的细胞免疫应答及其对宿主的免疫保护力. 方法应用SDS-PAGE电泳对弓形虫体超声粉碎抗原进行分离、纯化,选择特异性抗原组分进行配伍,然后与福氏佐剂混合免疫小鼠,检测多项免疫指标,并观察弓形虫对各免疫鼠的攻击力. 结果 SDS-PAGE电泳显示,弓形虫体抗原有7条特异抗原带,对其中4条(P67、P35、P30、P22)分离、纯化、配伍后分别免疫小鼠,各实验鼠脾脏的CD8+T淋巴细胞及其脾细胞培养液中IL-2、IFN-γ的滴度均随免疫时间延长而增加,其中以P30/35配伍组增高明显,并且该组合诱导的免疫保护力强,攻击感染后平均存活时间(7.05 d)明显长于其它实验组和对照组(P<0.05). 结论 P35和P30蛋白联合使用能诱导小鼠产生较高的细胞免疫和较强的免疫保护力,二者可能成为弓形虫多价亚单位疫苗的侯选抗原.
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重组日本血吸虫铁蛋白的表达纯化及诱导小鼠保护性免疫研究
目的表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用.方法用基因重组技术,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体pGMC上;在IPTG诱导下,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达;用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白;用SDS-PAGE和Western-blot鉴定表达纯化产物;用纯化的重组铁蛋白免疫小鼠三次,分别在0、2、4周进行.第6周每鼠经腹部感染40±1条日本血吸虫尾蚴.42天后剖杀冲虫,计数虫数及肝卵数.结果纯化的重组铁蛋白分子量为40kD,具有较好的免疫原性,能被日本血吸虫感染兔血清识别.与对照组相比,纯化重组铁蛋白免疫小鼠组的减虫率为24.5%,减卵率为45.8%.结论重组日本血吸虫铁蛋白不仅在大肠杆菌中得到高效表达,而且纯化的铁蛋白分子能诱导抗日本血吸虫病的保护性免疫.
