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  • 细粒棘球绦虫核糖体蛋白S9基因克隆鉴定及其在不同发育阶段表达分析

    作者:肖云峰;刘辉;吕国栋;赵军;高惠静;李娟;王建华

    目的 克隆鉴定细粒棘球绦虫原头蚴核糖体蛋白S9基因,分析其在细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达情况.方法 从已构建的cDNA文库挑选基因,克隆EgRPS9基因并对编码产物的理化性质、功能位点、蛋白质的结构和功能域进行预测和分析,通过RealTime-PCR检测RPS9基因在细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达情况. 结果 通过各种生物数据库对EgRPS9基因进行预测并测序,显示该基因具有完整开放阅读框,大小为564 bp,编码188个氨基酸,预测分子质量单位为22.0 ku,等电点为10.32.SMART保守功能区域分析发现该基因第107~149个氨基酸为40 S亚基S9结构域S4超家族.通过多序列比对发现该基因具有较高的保守性,进化树结果表明该基因与曼式血吸虫、日本血吸虫及华氏睾吸虫亲缘关系较近.Real time-PCR检测原头蚴和囊泡RPS9基因相对表达量分别为1.16和1.02,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 成功克隆出细粒棘球绦虫40S亚基RPS9新基因,该基因在细粒棘球绦虫不同发育阶段均有表达.

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