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婴儿利什曼原虫液体培养基的研制
目的 研制可提高荒漠型黑热病婴儿利什曼原虫分离率的培养基. 方法 荒漠型黑热病患者的感染材料,分别接种3N培养基、RPMI-1640完全培养基、配方1、配方2和配方3培养基,观察比较利什曼原虫在5种培养基的培养、分离、传代和保存效果.比较5个温度条件下前鞭毛体在配方3的生长曲线. 结果 婴儿利什曼原虫在5种培养基培养13d的培养效果基本一致,第3d出现前鞭毛体,第7d达到高峰,第13d几乎全部凋亡.用5种培养基每7d传代培养1次,除配方3能延续传代保存前鞭毛体外,其他4种培养基在传代培养过程中前鞭毛体逐渐丢失.用配方3培养前鞭毛体,20～30 ℃在第6 d出现生长峰值;20 ℃在第20 d出现第二个峰值;10℃和14 ℃在12d和第20 d分别出现第一个和第二个峰值,长可维持到第37d. 结论 3N培养基、RPMI-1640完全培养基、配方1、配方2和配方3培养基均适用于婴儿利什曼原虫的前期培养,第3d就可以判断是否有前鞭毛体生长,但只有配方3培养基具有延续传代培养婴儿利什曼原虫的效果.
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液体培养基分离和保存利什曼原虫的效果观察
目的 观察利什曼原虫液体培养基(LLM)分离和保存利什曼原虫的效果. 方法 用LLM培养基对黑热病材料进行利什曼原虫分离培养,同时接种的灰仓鼠,进行利什曼原虫分离率比较. 结果 用LLM培养被检材料出结果时间为4d,对荒漠型和平原型黑热病利什曼原虫分离率分别为35.7％(10/28)和50.0％(15/30),分别比接种灰仓鼠的分离率高10％和30％.培养基-20℃冷冻保存有效期为2年. 结论 应用LLM培养基能显著提高利什曼原虫的分离率.该培养基与传统3N培养基比较,保存时间延长,培养出结果时间缩短,可用于黑热病实验诊断和黑热病抗药性研究.
