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黑色素瘤抗原基因3在K562细胞内质网应激反应性凋亡中的表达及意义
本研究旨在探讨黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)在内质网应激反应性凋亡中的表达及意义.应用Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM通过荧光分光光度计测定白血病细胞系K562及其多药耐药细胞株K562/A02经thapsigargin作用前后细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化;Western blot检测GRP78蛋白表达变化;荧光显微镜观察细胞凋亡形态变化;TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-PCR检测MAGE-3基因mRNA水平表达变化.结果显示:①毒胡萝卜素(thapsigargin)诱导K562和K562/A02细胞[Ca2+]i出现不同程度的升高并呈一定的浓度依赖性,同时诱导GRP78蛋白表达增加以及K562和K562/A02细胞典型的凋亡改变,细胞凋亡率亦呈一定的浓度依赖性;在静息状态下K562/A02细胞[Ca2+]i较K562细胞明显增高;②毒胡萝卜素诱导K562和K562/A02细胞凋亡过程中,MAGE-3 mRNA表达明显下调;此外,与K562细胞比较,K562/A02细胞MAGE-3 mRNA表达明显上调.结论:①毒胡萝卜素在一定浓度范围内可诱导K562及其多药耐药细胞株K562/A02发生内质网应激反应性凋亡,并可能与MAGE-3表达下调有关或MAGE-3基因可能参与此凋亡途径的调控;②MAGE-3可能具有抗凋亡活性,K562/A02细胞多药耐药性可能与细胞[Ca2+]i增高和MAGE-3表达上调有关.
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MAGE-1mRNA在非小细胞肺癌外周血中基因的表达
目的 探讨MAGE-1 mRNA 在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达及其临床意义.方法 选择初治的NSLCL患者56例,以肺部良性疾病27例和健康对照4例作为对照组,运用两步法RT-PCR技术,外周血中MAGE-3基因的表达水平.结果 (1)56例NSCLC检测出32例(57.15%)明显高于34例非癌外周血中检出0例(0%,P=0.000).(2)NSCLC患者外周血 MAGE-1 mRNA 阳性率与该患者癌症分化程度的、TNM分期、淋巴结转移与否有统计学差异(P<0.05),与性别、吸烟史、年龄、病理类型和原发肿瘤部位之间没有统计学差异(P>0.05).结论 MAGE-1 mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可以作为鉴别良、恶性肺部疾病的一个指标.
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MAGE-3基因mRNA的表达在胸腔积液鉴别诊断中的价值
目的 研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值.方法 采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况.结果 10例良性胸腔积液组中,均未见有MAGE-3特异性条带;25例恶性胸腔积液组中,有14例可见MAGE-3特异性扩增条带,MAGE-3基因表达阳性率为56.00%,其敏感性、特异性、诊断符合率分别为56.00%、100.00%、68.57%.结论 检测胸腔积液中MAGE-3基因mRNA的表达,可以作为鉴别良、恶性胸腔积液的一个指标.
关键词： 肺癌 MAGE-3基因 胸腔积液 巢式逆转录-聚合酶链反应
