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Ⅱ类抗原反式激活因子与HLA-DR抗原的关系及其意义
本研究探讨Ⅱ类抗原反式激活因子(CⅡTA)和人类白细胞抗原(HLA-DR)表达时相的关系和差异,及STAT1-α反义寡核苷酸(STAT1-αAS)对CⅡTA和HLA-DR的抑制作用.分离健康志愿者外周血T淋巴细胞,给予不同剂量干扰素-γ(IFN-γ)后,用RT-pCR法检测CⅡTA mRNA,Western blot分析HLA-DR抗原表达,然后给予不同浓度STAT1-αAS和STAT1-α寡核苷酸有义链(STAT1-α S),再次检测CⅡTA mRNA和HLA-DR的表达.结果表明:CⅡTA mRNA在IFN-γ作用后5小时开始表达,14小时达峰值;HLA-DR在28小时后可被检测出,52小时达高峰.5、10和20 μmol/L STAT1-αAS作用于细胞后,CⅡTA mRNA的表达显著低于对照组(P＜0.01),而在S组明显高于AS处理组(P＜0.01),S组与对照组间无显著差异;HLA-DR的表达可被STAT1-α AS抑制,AS组仅为对照组的64.3%(P＜0.01),S组与对照组间仍无差异;STAT1-αAS作用后,HLA-DR变化同CⅡTA.结论:CⅡTA mRNA表达与HLA-DR表达呈正相关且早于后者;STAT1-α AS可特异性抑制CⅡTA和HLA-DR的表达,并能预防T淋巴细胞激活,CⅡTA在移植免疫病因中起重要作用.
关键词： Ⅱ类抗原反式激活因子 HLA-DR STAT1-α 反义寡核苷酸 干扰素-γ -
Ⅱ类抗原反式激活因子和人白细胞抗原-DR检测方法的比较
目的研究Ⅱ类抗原反式激活因子(CⅡTA)与人白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达的相关性,探讨CⅡTA 在移植物抗宿主病(GVHD)中检测的意义.方法从健康人外周血分离获得T细胞,给予干扰素-γ(IFN-γ)1 000 U/ml后,在不同时间用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CⅡTA mRNA表达,用免疫印迹法检测HLA-DR抗原的表达.然后,给予Stat1α反义寡核苷酸(AS)抑制CⅡTA,分别检测CⅡTA mRNA及HLA-DR抗原在各自表达量高时间点的变化.结果 CⅡTA mRNA在IFN-γ作用后5 h开始表达,至14 h表达量高,此后逐渐下降;HLA-DR抗原在28 h可检测出,52 h表达量高,此后逐渐下降,至76 h仅可检测到少量抗原的表达;给予AS后与对照组相比,CⅡTA mRNA和HLA-DR表达量均下降.结论 CⅡTA与HLA-DR表达成正相关性,且先于HLA-DR出现,因此有可能作为检测GVHD的早期指标.
关键词： Ⅱ类抗原反式激活因子 人类白细胞抗原-DR 移植物抗宿主病
