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血小板衍生膜微粒对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
本研究探讨血小板衍生膜微粒(platelet-derived membrane microparticles,PMP)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖和凋亡的影响.用不同浓度的凝血酶激活血小板释放出PMP,采用流式细胞术检测PMP的释放量,确定制备PMP时凝血酶的佳应用浓度.以体外培养HUVEC为载体,通过噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞术研究不同浓度的PMP对HUVEC增殖和凋亡的影响.结果表明,2、1.5、1.0和0.5U/ml凝血酶激活血小板后PMP的释放率分别为28.7、47.7、50.1和43.9 %;HUVEC的增殖与PMP呈剂量依赖关系.在培养液中添加40 μg/ml PMP时,HUVEC增殖是空白对照组的1.8±0.3倍;10μl/ml血管内皮细胞生长因子(VEGF)组的HUVEC增殖是空白对照组的1.9±0.5倍,两组之间无统计学差异,(p＞0.05);PMP能抑制HUVEC的凋亡,40 μg/ml PMP组的细胞凋亡率为(3.9±0.4)%,明显低于空白对照组的细胞凋亡率(9.4±0.5)%(p＜0.05).VEGF(10μl/ml)对HUVEC细胞的凋亡无明显抑制作用,其凋亡率为(8.0±0.8)%.结论:用1 U/ml的凝血酶刺激血小板释放的PMP较为均一,且释放量大,可促进HUVEC细胞的增殖并抑制其凋亡.
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血小板衍生膜微粒对内皮细胞增殖及血管生成的影响
目的 探讨血小板衍生膜微粒(PMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响.方法 在血小板悬液中加1.0 U/ml的凝血酶,37℃下作用10 min后,800 g离心20 min,取上清,17 000 g离心分离出PMP,采用BCA法测定PMP含量(以蛋白含量计),将HUVEC与不同浓度的PMP和血管内皮细胞生长因子(VEGF)共同孵育培养24 h后,采用MTT法测定细胞增殖;将20μl的PMP(40 μg/ml)和VEGF(10μl/m1)分别接种于CAM上,孵育72 h后,观察PMP对CAM血管生成的影响.结果 HUVEC的增殖与PMPs呈剂量依赖关系,在培养液中添加40μg/mlPMP时,HUVEC增殖是空白对照组的(1.83士0.33)倍;而VEGF(10 μ1/m1)组HUVEC的增殖是空白对照组的(1.91±0.47)倍,两者相比差异无显著性(P＞0.05).PMP组及VEGF组在接种点周围可见不同程度放射状密集生长的血管网,而对照组无特异性密集血管生成.PMP组及VEGF组的CAM血管分支点数分别为112.5±11.3、128.4±10.0,均显著高于空白对照组82.6±8.1.结论 PMP可促进人脐静脉内皮细胞的增殖和CAM血管的生成.
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血小板衍生膜微粒的生物学功能及其与疾病的关系
血小板衍生膜微粒(platelet-derived microparticles,PMP)是血小板激活后产生的直径为0.1～1.0 μm的小囊泡颗粒,含有多种特异性膜糖蛋白和生物学活性的受体,可通过与靶细胞的相互作用而启动靶细胞的生物学效应,具有促凝与抗凝双重作用,可在多种临床疾病中发生异常改变.
