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IL-1β刺激人眼球后成纤维细胞CC类趋化因子RANTES的表达
白细胞介素1β(IL-1β)以剂量依赖方式刺激人眼球后成纤维细胞(RF)产生调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES),Graves眼病(GO)患者的RF产生RANTES的量明显高于对照组,结果提示RANTES可能与GO患者眶内淋巴细胞浸润有关.
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CC族趋化因子结合蛋白D6在乳腺癌中的表达及其调节
目的:研究CC族趋化因子结合蛋白D6在乳腺癌中的组成性表达及细胞因子IL-1β诱导后D6表达的改变.方法:采用半定量RT-PCR法检测D6 mRNA在人乳腺癌细胞株、乳腺癌组织以及正常脾组织中的表达,并用实时荧光定量-PCR进一步验证其在细胞中表达的差异;Western blot法分析D6蛋白在乳腺癌细胞中的表达;用重组人IL-1β(0.5 ng/mL,1 ng/mL,2 ng/mL)刺激MDA-MB-231细胞24 h,实时荧光定量-PCR分析D6基因表达的改变.结果:D6 mRNA在所有9种人乳腺癌细胞系、4例乳腺癌组织以及作为阳性对照的人正常脾组织中均可检出,其表达水平因细胞的不同而异,其中MCF-7、ZR-75-1和SK-BR-3细胞的表达量较高.MDA-MB-435和MDA-MB-231细胞中可检测出D6蛋白.此外,以MDA-MB-231细胞为对象的细胞因子诱导实验结果显示,IL-1β可呈剂量依赖性地促进D6的基因表达.结论:D6 分子在来源于不同患者的乳腺癌组织及生物学特性各异的多种人乳腺癌细胞系中均呈组成性表达,提示CC族趋化因子的结合蛋D6可能参与乳腺癌中趋化因子的调控,从而影响乳腺癌的发生、发展过程.
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口服人乳头瘤病毒18 E7与次级淋巴组织趋化因子联合基因疫苗的抗肿瘤作用
目的 观察口服人乳头瘤病毒(HPV)18型E7联合次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因疫苗的抗肿瘤作用.方法 Western blotting方法鉴定稳定表达E7的B16F1细胞株.小鼠腋下接种稳定表达耵的小鼠黑色素瘤B16F1细胞,荷瘤小鼠随机分为5组(n=12),灌胃途径给予各种伤寒沙门菌液免疫小鼠:生理盐水组(生理盐水0.2 mL)、空载体组(携带空载体的菌液0.2 mL)、E7组(携带E7的菌液0.2mL)、SLC组(携带SLC的菌液0.2 mL)和历联合SLC组(携带E7或SLC的菌液各0.1 mL).检测各组小鼠免疫后的瘤重及生存率、血清及阴道分泌物E7特异性抗体产生情况、脾细胞增殖指数和杀伤活性,并观察肿瘤组织局部淋巴细胞浸润情况.结果 稳定表达E7的B16F1细胞株成功构建.E7联合SLC组小鼠瘤重显著降低,生存期显著延长(P<0.05),诱导产生血清E7特异性IgG抗体水平显著增加(P<0.01),淋巴细胞增殖指数和细胞毒T淋巴细胞杀伤率显著高于其他组(P<0.05或P<0.01).SLC组及E7联合SLC组肿瘤组织浸润的淋巴细胞数均明显增多.结论 口服HPV 18型E7联合SLC基因疫苗可发挥抗肿瘤作用,其机制可能为增强体液和细胞免疫应答.
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人乳头瘤病毒18型E7基因和次级淋巴组织趋化因子基因疫苗的制备
目的 以减毒的鼠伤寒沙门菌为载体,制备人乳头瘤病毒(HPV)18型E7基因与次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因疫苗.方法 PCR方法扩增HPV 18 E7和SLC基因片段,将其连接至pcDNA3.1(一)载体中,构建重组质粒pcDNA3.1(-)-HPV 18 E7和pcDNA3.1(-)-SLC.酶切及测序鉴定重组质粒.重组质粒转染至小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16F10中,RT-PCR和Western blotting方法检测目的基因和蛋白的表达.重组质粒电转化导入减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,酶切鉴定重组质粒的正确导入.结果 pcDNA3.1(-)-HPV 18 E7和pcDNA3.1(-)-SLC经相应酶切及测序证实其大小和序列与理论结果一致.HPV 18 E7和SLC在B16F10细胞中正确表达,RT-PCR和Westem blotting所得结果及导入沙门菌SL3261的重组质粒酶切所得片段大小均在理论值范围内.结论 成功制备以沙门菌SL3261为载体的HPV 18 E7和SLC基因疫苗.
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巨噬细胞衍生化学激活因子与皮肤病
巨噬细胞衍生化学激活因子是一种巨噬细胞来源的趋化因子,属于趋化因子CC家族(即β家族).它具有与同族的其他趋化因子同样的化学诱导作用,主要趋化单核细胞、单核细胞衍生的树突状细胞以及自然杀伤细胞.随着近年来对其化学本质的发现和趋化因子在细胞因子介导的炎症反应以及病毒性疾病中作用的深入研究,巨噬细胞衍生化学激活因子逐渐显示出其潜在的临床意义.
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寻常性银屑病患者血清趋化因子CCL27的检测及临床意义
目的 检测寻常性银屑病患者血清CCL27水平并探讨其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法检测61例寻常性银屑病患者治疗前后和45例健康人血清CCL27水平.结果 61例寻常性银屑病患者血清CCL27水平为(670.02±262.15)ng/L,健康人对照组为(373.10±92.84)ng/L,两组差异有统计学意义(t=8.18,P＜0.01).进行期患者血清CCL27水平为(799.94±214.54)ng/L,静止期为(422.57 ±135.53)ng/L,两组差异有统计学意义(t=8.39,P＜0.01).经药物治疗8周后,银屑病患者PASI评分下降70%以上者36例,其CCL27水平明显下降,与治疗前比较,差异有统计学意义(t=9.95,P＜0.01);PASI评分下降不足70%者25例,CCL27水平与治疗前比较差异无统计学意义(t=1.84,P＞0.05).61例银屑病患者血清CCL27水平与PASI评分呈正相关(r=0.58,P＜0.01).结论 寻常性银屑病患者血清CCL27水平明显增高,并与疾病活动性相关.
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CCL27和CCR10在寻常性银屑病皮损的表达及与PASI的相关性
目的 探讨皮肤特异性趋化因子CCL27及其受体CCR10在寻常性银屑病皮损中的表达和表达强度与疾病活动性的相关性.方法 SP免疫组化染色检测20例寻常性银屑病皮损区皮损和10例正常人皮肤中CCL27、CCR10的表达,以PASI评分评价银屑病患者疾病活动性.结果 ①CCL27在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤中表达的阳性率分别为95%和20%,两者差异有统计学意义(χ2=17.86,P＜0.01);CCR10在20例寻常性银屑病皮损和10例正常人皮肤表达的阳性率分别为85%和10%,两者的差异有统计学意义(χ2=15.63,P＜0.01).②CCL27和CCR10在皮损中的表达水平与PASI评分均呈明显正相关,r值分别为0.82和0.83,P值均＜0.01.结论 CCL27和CCR10的过度表达与银屑病患者的疾病活动性相关.
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慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞CC型趋化因子的表达
目的研究CC型趋化因子家族中调节激活正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)和巨噬细胞炎症蛋白(MIP-1α)的mRNA在慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞中的表达情况及其相互关系;探讨CC型趋化因子的水平与慢性荨麻疹患者血清总IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白水平的相关性.方法逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测31例慢性荨麻疹患者和22例正常人对照外周血单一核细胞中RANTES、MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA的表达水平.结果①与正常人对照相比,慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞中RANTES、MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA表达水平均明显增高(P＜0.001).②慢性荨麻疹患者中RANTES mRNA的表达水平与MCP-1、MCP-3、MIP-1α的水平呈正相关(P＜0.05),MCP-1与MIP-1α的mRNA表达水平之间亦呈正相关(P＜0.01),但MCP-1与MCP-3之间、MCP-3与MIP-1α之间的mRNA表达水平无显著相关(P＞0.05).③慢性荨麻疹患者中RANTES的mRNA表达水平与血清总IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白的水平呈负相关(P＜0.05);MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA表达水平与血清总IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白的水平之间无显著相关(P＞0.05).结论慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞中RANTES、MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA表达水平的上调可能与荨麻疹的发病有关.
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寻常型银屑病患者血管内皮生长因子及单核细胞趋化因子-1表达的研究
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在银屑病患者皮肤中的表达及其意义.方法用免疫组化法检测银屑病患者皮损、非皮损及正常人皮肤中VEGF、MCP-1的表达与分布.用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中VEGF、MCP-1水平.结果①银屑病患者皮损及非皮损中VEGF表达较正常人皮肤明显增强(P<0.05).皮损中MCP-1表达较非皮损及正常人皮肤明显增强(P<0.05).②患者血清中VEGF水平明显高于正常人(P<0.05),MCP-1水平与正常人比较差异无显著性(P>0.05).③皮损角质形成细胞中VEGF、MCP-1的表达与PASI评分无显著相关性(P>0.05).结论VEGF、MCP-1的表达增强在银屑病的发病机制中可能起重要作用.
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CCL18表达与卵巢癌预后的临床分析
目的 探讨趋化因子配体18(chemokine ligand 18,CCL18)在卵巢上皮性癌组织中的表达水平及其与患者生存预后的关系.方法 收集病理诊断为卵巢上皮性癌的肿瘤组织标本60例,配对癌旁正常组织标本60例.免疫组织化学染色检测组织中CCL18表达情况,并结合临床资料分析其与预后的关系.结果 CCL18在卵巢癌组织中的表达高于癌旁正常组织(P＜0.01),并且随着临床分期的增加而升高(P＜0.01).多因素分析发现CCL18的表达、淋巴结侵袭和治疗方式的选择为影响卵巢癌患者预后的独立危险因素(均P＜0.01).结论 CCL18表达水平对卵巢癌的预后有重要意义.
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小鼠CCL21真核表达载体构建及趋化活性检测
目的:构建趋化因子CCL21的真核表达载体并表达蛋白,初步检测其趋化活性.方法:RT-PCR方法扩增CCL21 cDNA片段,并将扩增的片段插入pcDNA3.1真核表达载体,构建重组载体pcDNA3.1-mCCL21,将其转染到小鼠前胃癌细胞(mouse forestomach carcinoma,MFC).利用趋化小室法,检测表达产物针对树突状细胞(DC)趋化活性.结果:基因测序结果证实克隆产物为CCL21基因scya21b型,pcDNA3.1-mCCL21载体构建成功,Western印迹法检测到CCL21蛋白表达,转基因细胞的培养上清对树突状细胞具有显著趋化活性.结论:成功构建真核表达载体pcDNA3.1-mCCL21,其表达产物具有针对DC的趋化活性.
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趋化因子CCL21的研究进展
趋化因子CCL21属于CC类趋化因子,主要表达于周围淋巴组织.研究表明,CCL21可以促使血管内皮细胞黏附流动的T细胞参与淋巴细胞归巢,能够很强地趋化T、B淋巴细胞、成熟树突状细胞(DC)及NK细胞,参与T细胞免疫应答.CCL21可以募集活化效应细胞,使其肿瘤周围聚集,在肿瘤治疗方面具有较大潜力.CCL21的高表达也与许多免疫疾病的发生相关.
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反义单核细胞趋化蛋白1对大鼠系膜细胞增生的影响
目的 研究反义单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对系膜细胞MCP-1分泌及增生的影响.方法 用逆转录病毒感染体外培养的系膜细胞,得到转染反义MCP-1的系膜细胞,经PCR及Southern印迹鉴定外源基因在系膜细胞基因组DNA上的整合.脂多糖(LPS)刺激反义MCP-1系膜细胞,以正常系膜细胞及转染空白载体的系膜细胞为对照,观察其增生情况.用RT-PCR法检测MCP-1、CC趋化因子受体2(CCR2)的mRNA表达.ELISA法检测细胞上清中MCP-1蛋白的分泌.结果 经逆转录病毒转染得到的反义MCP-1的系膜细胞,其基因组DNA中有外源基因的整合.在正常的培养条件下,反义组与对照组系膜细胞的增生差异无统计学意义;MCP-1、CCR2的mRNA均有少量表达;MCP-1的蛋白也有微弱表达.在LPS的刺激下,反义组与对照组MCP-1的mRNA的表达均增高;MCP-1蛋白的分泌均增多.与对照组比较,反义组系膜细胞的增生受抑制[(16.83+1.16)×104/mi比(19.63+1.85)×104/ml],MCP-1的mRNA的表达较少(0.424比0.866,P＜0.01),MCP-l蛋白的分泌减少.CCR2的mRNA表达与MCP-1的变化一致.结论 (1)逆转录病毒载体pLXSN可有效地介导MCP-1 cDNA在系膜细胞的转染.(2)反义MCP-1可降低系膜细胞MCP-1的转录和翻译.(3)反义MCP-1的转染可降低系膜细胞在炎症状态时的增生.(4)大鼠系膜细胞具有CCR2的表达,在炎症状态时形成MCP-1、CCR2的自分泌环路.
关键词： 单核细胞化学吸引蛋白质1 细胞增殖 趋化因子 CC 系膜细胞 -
趋化因子受体CCR7促进乳腺癌细胞的趋化与侵袭
目的:研究趋化因子受体CCR7的表达对乳腺癌细胞趋化活性与侵袭活性的促进作用.方法:RT-PCR法测定3株乳腺癌细胞MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-361中CCR7的表达;在CCR7的配体SLC作用下,通过趋化小室法检测不同乳腺癌细胞的趋化活性与侵袭活性;检测CCR7的封闭对乳腺癌细胞趋化活性和侵袭活性的影响. 结果: 3株乳腺癌细胞中均存在不同程度CCR7的表达,其配体SLC对3种乳腺癌细胞均存在不同程度的趋化活性和侵袭活性,CCR7的封闭也能够在不同程度上抑制乳腺癌细胞的这种趋化活性和侵袭活性. 结论: 趋化因子受体CCR7的表达能够促进乳腺癌细胞的趋化与侵袭,从而可能在乳腺癌细胞向淋巴结转移中发挥重要作用.
