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白血病染色体MLL基因断裂（易位）FISH探针的研究
目的自主研制可以检测白血病染色体 MLL 基因断裂的双色 FISH 检测试剂盒。
方法根据染色体基因图谱，选定合适的 BAC 克隆重叠群分别作为 MLL 基因断裂点5'端探针和3'端探针。采用缺口平移法，制作出5'端标记绿色荧光素，3'端标记红色荧光素的探针。用双盲法检测白血病临床样本40例，对自制探针和同类进口探针在各项技术参数上进行对比研究。结果自制探针检测 MLL 基因断裂（易位）的阴、阳性率与同类进口产品完全相符；在 Spectrum Green 和 Cy3?v1通道中，自制探针的平均荧光信号强度比进口探针明显提高（自制探针分别为：2930.5±38.00，2766±59.54；进口探针分别为：2239±45.13，1986±59.56；P<0.01），自制探针信噪比分别为进口探针的2.4倍和1.9倍。
结论自制的 MLL 基因 FISH 检测探针设计合理、质量可靠，与进口探针相比，荧光信号更强，信噪比更高，将来可能替代价格昂贵的进口产品。 -
早幼粒细胞白血病蛋白在髓系白血病中的表达及其对慢性粒细胞白血病增殖的影响分析
目的 探讨早幼粒细胞白血病(PML)蛋白在髓系白血病中的表达情况及其对慢性粒细胞白血病细胞增殖的抑制作用.方法 收集髓系白血病患者(髓系白血病组)60例,非肿瘤性血液病患者(对照组)15例,患者骨髓制备石蜡切片,采用免疫荧光技术观察PML在细胞内的分布和表达;提取骨髓单核细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链反应观察PML mRNA的表达情况;提取骨髓总蛋白,采用蛋白质印迹法(Western Blot)观察PML蛋白的表达情况;K562细胞分别转染空质粒(MSCV组)、截短失活PML(DN组)和野生型PML(Wt组),测定PML基因对K562细胞增殖和集落产生的影响.结果 非肿瘤性血液病患者的PML表达聚集在细胞核内,而髓系白血病患者的PML分散表达在细胞核和胞质内;髓系白血病组PML mRNA水平0.356±0.092显著低于对照组的表达0.536±0.066(t=7.11,P<0.01);髓系白血病组PML蛋白相对表达水平0.189±0.032显著低于对照组0.323±0.025(t=16.10,P<0.01);DN(转染截短失活PML)组,MSCV(转染空质粒)组和Wt(转染野生型PML)组在450 nm波长下吸光度值(Optical Density450,OD450)和集落生成单位(Colony-Forming Units,CFU)的数据均差异有统计学意义(F=34.28,25.39,P<0.05),q检验结果显示,均为Wt组的数值低于DN组和MSCV组.结论 髓系白血病患者中PML蛋白表达水平下降导致细胞异常增殖可能是其发病机制.
