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HIV-1包膜蛋白V2区突变对V3区特异的中和抗体的影响
目的 研究HIV-1包膜蛋白V2区突变对V3区特异中和抗体与HIV-1中和作用的影响.方法 使用假病毒中和试验测定L175P突变对于V3区中和抗体对HIV-1中和能力的影响,ELISA方法测定上述中和抗体对gp120蛋白单体的结合力.结果 V2区突变L175P可以改变多个V3区特异性中和抗体对病毒的中和能力,但这些中和抗体对gp120蛋白单体的结合力不因V2区突变而改变.结论 V2区的L175P突变改变了gp120蛋白天然三聚体的结构,促进了V3区抗体的中和能力.
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HIV-1V2区175位变异可提高中和抗体对病毒的结合能力
目的 探讨HIV-1 V2区175位变异对于V3中和抗体与病毒结合能力的影响.方法 使用真核细胞表达质粒分别串联HIV-1野生型和突变型的env基因和绿色荧光蛋白GFP,并转染293T细胞,使gp120表达到293T细胞的表面,并根据GFP荧光来检出转染成功细胞.然后使用免疫染色和双荧光流式细胞仪检测几种常见V3区中和抗体对野生型和突变型gp120的结合力.结果 L175P突变使表达在293T细胞表面的gp120三聚体与3种V3区特异性抗体结合的荧光强度差异有统计学意义,与阴性对照的荧光强度分布差异有统计学意义,图形的位置和峰值均有变化,平均荧光强度MFI显著升高;而表达野生株gp120三聚体的293T细胞与V3抗体作用后,曲线与阴性对照的荧光强度分布基本重叠,MFI 基本相同.结论 提示V2区突变可以提升病毒对V3抗体中和作用的敏感性.