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香烟烟气提取物对NR8383细胞吞噬功能的影响
目的 探讨不同浓度香烟烟气提取物(CSE)对大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)吞噬功能的影响.方法 通过CCK-8法分析细胞比活力,Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡以及CFSE荧光标记分析细胞的分裂增殖,来确定CSE对NR8383细胞的作用浓度和作用时间.收集经不同浓度CSE处理24 h的NR8383细胞,与FITC标记的大肠杆菌共同孵育2 h后,用流式细胞仪检测胞内荧光强度,分析CSE对细胞吞噬功能的影响.结果 NR8383细胞的吞噬功能随着CSE浓度的变化先增强后降低.单独用CSE处理NR8383细胞,在100μg/ml CSE作用下,巨噬细胞的吞噬功能与正常对照组相比提高0.5倍,此时的细胞比活力高.在CSE和LPS共同作用下,CSE的浓度为100μg/ml时,NR8383细胞的吞噬功能提高到正常水平的3倍.而当CSE浓度达到200μg/ml时,NR8383细胞的吞噬功能受到损伤,细胞凋亡率为54.1%.结论 CSE可以影响NR8383细胞的吞噬功能,在较低浓度时可能激活巨噬细胞的吞噬功能,但较高浓度时可能对巨噬细胞的吞噬功能造成损伤,CSE可能具有激活巨噬细胞吞噬功能的潜能.
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香烟烟气与纳米二氧化钛对人支气管上皮细胞的遗传损伤研究
目的 探讨香烟烟气与纳米二氧化钛(nano-TiO_2)单独及联合染毒对人支气管上皮细胞株(16-HBE)DNA断裂及染色体畸变的影响.方法 将状态良好的16-HBE单独及混合暴露于香烟烟气提取物(cigarette smoke extract,CSE)和nano-TiO_2,其终浓度分别为0、0mg/L,50、0mg/L,75、0mg/L,100、0mg/L,0、10mg/L,50、10mg/L,75、10mg/L,100、10mg/L.24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HBE的存活率,以单细胞凝胶电泳检测DNA损伤程度,以微核试验检测染色体畸变.结果 除10mg/L nano-TiO_2单独染毒组以外,各染毒组的存活率较对照组降低,彗星率(Comet%)较对照组升高,有统计学意义(P<0.05);75、100mg/LCSE单独染毒组及各联合染毒组的彗星尾长(Ltail)较对照组升高,有统计学意义(P<0.05);100mg/LCSE单独染毒组及100mg/LCSE+10mg/Lnano-TiO_2联合染毒组的尾部DNA含量(TailDNA%)较对照组升高,有统计学意义(P<0.05);100 mg/L CSE单独染毒组及75 mg/L CSE+10 mg/L nano-TiO_2,100 mg/L CSE+10 mg/L nano-TiO_2联合染毒组的尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM)均较对照组升高,有统计学意义(P<0.05);除10mg/Lnano-TiO_2单独染毒组以外,各染毒组微核率均较对照组升高,有统计学意义(P<0.01).各指标析因分析结果均未显示CSE及nano-TiO_2联合染毒有交互作用.CSE与HBE的彗星率和微核率均呈正相关(P<0.01).结论 香烟烟气诱导的HBE DNA断裂和染色体畸变随染毒剂量增加而加重;尚未见香烟烟气和nano-TiO_2对HBE的遗传损伤具有交互作用.
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香烟烟气提取物对原代皮肤成纤维细胞生长与凋亡的影响
[目的] 探讨香烟烟气提取物(Cigarette smoke extract,CSE)对原代皮肤成纤维细胞生长周期动力学和凋亡的影响.[方法] 采用噻唑盐(MTT)吞噬试验、乳酸脱氢酶(LDH)释放及流式细胞仪等技术研究0.2%～10%的CSE对成纤维细胞生长、毒性及细胞周期动力学和凋亡发生率的影响.[结果] CSE抑制细胞生长,LDH释放增加,并具有剂量反应关系.细胞周期动力学,表现为G2/M期细胞数增加(近4倍);S期细胞数从15.7%减少到8.5%.同时凋亡发生率由2.1%增至23.0%.[结论] CSE抑制皮肤成纤维细胞生长,促进凋亡发生,G2/M期生长阻滞可能是CSE作用皮肤细胞的主要环节.
