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北京地区2株人偏肺病毒的P和M蛋白基因序列分析
目的进一步了解北京地区人偏肺病毒(hMPV)编码基因的特征. 方法从分属于hMPV的两个不同基因进化簇(即基因型)的2份临床标本BJ1816和BJ1887中扩增P和M全基因,克隆至pBS-T载体中并进行测序,与GenBank中的hMPV的基因序列进行比较分析和种系进化分析. 结果经扩增BJ1816和BJ1887的P基因全长为885个核苷酸,编码294个氨基酸;M基因全长765个核苷酸,编码254个氨基酸.BJ1816和BJ1887的P和M蛋白基因与同一基因簇内的hMPV有相当高的氨基酸同源性(91.9%～100%).BJ1816和BJ1887间P基因的氨基酸同源性仅为85.8%,而M基因的氨基酸同源性为96.9%. 结论 BJ1816和BJ1887的P和M蛋白基因特征与其他国外文献中所报道的hMPV相似,不同型的hMPV的P基因之间比M基因显示了更强的基因多样性.
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北京市门头沟区儿童A组溶血性链球菌M蛋白基因分型研究
目的 明确北京市门头沟区儿童A组溶血性链球菌(GAS)M蛋白基因(emm)各基因型别的分布情况.方法 对哨点医院诊断为"猩红热和链球菌感染/扁桃体炎/咽峡炎"的193名患者的咽拭子标本进行GAS分离、鉴定;应用PCR法扩增emm基因并测序,通过序列比对确定GAS的emM基因型别,并比较不同性别、不同年龄组、不同临床诊断人群间的emm基因型别差异.结果 从193份咽拭子标本中,分离出GAS 47株,阳性率为24.35％.其中emm基因阳性菌株共44株,emm基因型别共3种,分别为emm1、emm12和emmSTG.结论 北京市门头沟区儿童携带GAS的emm基因型别在不同人群、不同疾病间分布差异无统计学意义.
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PRRSV SCQ株M蛋白基因截断片段原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立
通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM（de-letingM）,克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组M蛋白。以纯化的重组M蛋白作为抗原,建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法,并确立ELISA佳工作条件。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验验证,结果表明该方法重复性好、特异性强、敏感度高;与美国IDEXX公司试剂盒相比较,特异性和敏感性分别为96.3%和93.5%,无显著性差异。用建立的方法检测临床血清样品168份,总阳性率为39.9%。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白基因 原核表达 间接ELISA
