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大肠杆菌O157∶H7多糖-重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗的研制
目的用大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7, E. coli O157)的一个重要保护性抗原即菌体脂多糖(LPS)制备有效的候选疫苗. 方法选用Westphal热酚法提纯E. coli O157∶H7的LPS,经酸水解法进一步脱毒处理后得到无毒但却具弱免疫原性的O-特异性多糖(O-SP),然后采用己二酸二肼(ADH)将其共价结合到琥珀酰化(或没琥珀酰化)重组铜绿假单胞菌外毒素(rEPAsucc或rEPA)上. 结果制备得到的E. coli O157∶H7的O-SP-rEPAsucc或O-SP-rEPA结合疫苗是安全有效的,其免疫原性要比单一O-SP的免疫原性强,免疫小鼠后产生的血清抗LPS IgG抗体滴度比单一O-SP免疫后产生的抗体水平均有显著性升高(P<0.01),且再次注射后存在加强应答. 结论 E. coli O157∶H7的O-SP-rEPAsucc结合疫苗可望作为一种预防肠出血性E. coli引起的感染性腹泻的有效候选用疫苗.
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肠侵袭性大肠埃希菌O抗原多糖的致病作用
目的研究肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)O抗原多糖(OPS)的特异性致病作用.方法提取并纯化大肠埃希菌O29 EIEC的脂多糖(LPS)亚单位分子--OPS进行体内外试验,观察其毒性作用并与LPS作对比.结果EIEC OPS可引起HeLa细胞病变;致兔回肠袢肠黏膜出血,但不引起肠腔积液;电镜观察OPS致病变的HeLa细胞,明显可见细胞的超微病理损害.结论EIECOPS有特异的致病作用,与其LPS的内毒素作用不同;大肠埃希菌O29(致病菌株)OPS毒性作用比大肠埃希菌HB101(非致病菌株)OPS毒性强烈.
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菌体抗原"缺失"的宋内氏志贺菌研究
目的:研究O抗原"缺失"的宋内氏志贺菌其它生物学性状的变化情况.方法:检测试验菌株的生化特性和对抗生素的敏感性,以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验.结果:具有典型的宋内氏志贺菌的生化特性;与对照菌相比,有较高抗生素耐药性,对复方新诺明等多种抗生素耐药.与效期内的多批宋内氏志贺菌诊断血清不能产生凝集反应,而对照菌凝集良好.结论:该株宋内氏志贺菌的O抗原表达减弱,同时药敏谱也产生明显的改变.
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大肠杆菌O157∶H7 CVa9株O抗原变异的研究
目的研究本实验室保藏的大肠杆菌O157:H7(E.coli O157:H7)日本分离株CVa9 O抗原的变异.方法血清凝集试验检测CVa9菌株O和H抗原,区分O抗原变异株与非变异株.聚合酶链反应(PCR)法分别检测O157和H7特异性基因.生化试验检测生化特性.观察菌株在麦康凯、山梨醇麦康凯、棉子糖麦康凯及Chromagar O157显色培养基上菌落形态,菌落计数法计算变异率.结果抗-O157抗血清与CVa9菌株进行玻片凝集试验出现强凝集(CVa9-8)和不凝集(CVa9-1、CVa9-15)两种菌落,试管凝集试验结果相同,证实不凝集菌落O抗原发生变异.抗-HT抗血清分别与变异株和非变异株H抗原进行试管凝集试验,均为强凝集.两种菌株O157和H7特异性基因均为阳性.变异株与非变异株生化特性基本相同,但变异株不发酵棉子糖.两种菌株在麦康凯及山梨醇麦康凯培养基上菌落形态特征没有区别.在Chromagar O157显色培养基上培养48h,变异株为浅紫红色,菌落周边呈毛边状,非变异株为紫红色,菌落边缘整齐.变异株在用棉子糖代替乳糖制备的棉子糖麦康凯培养基上菌落呈粉红色,非变异株呈红色.菌落计数显示变异率为99.80%.结论 CVa9 菌株在保存过程中O抗原发生变异,菌落形态及部分生化特征亦有所改变.变异株和非变异株均携带O157和H7特异性基因,O157基因丧失O157抗原表达能力的原因尚待进一步研究.
关键词： 大肠杆菌O157:H7 O抗原 变异 -
宁波市食源性致病菌监测中首次检出一株印地安纳沙门菌
沙门菌属是一类广泛存在于自然界,能引起各种脊椎动物的肠道感染,对人类和动物具有极大危害的革兰阴性肠道致病菌.受人们关注的是伤寒和副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌.近年来陆续有一些新菌型报道,如喀普斯塔德[1]、基桑加尼[2]、波摩那[3]沙门菌等.
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菌体抗原"缺失"的宋内志贺菌研究
目的:研究O抗原"缺失"的宋内志贺菌其它生物学性状的变化情况.方法:检测试验菌株的生化特性和对抗生索的敏感性,以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验.结果:具有典型的宋内志贺菌的生化特性;与对照菌相比,能够耐包括复方新诺明在内的多种抗生素;与有效期内的多批宋内志贺菌诊断血清不能产生凝集反应,而对照菌凝集良好.结论:该株宋内志贺菌的O抗原表达显著减少,同时药敏谱也产生明显的改变.
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人工繁育蝇蛆对鸡免疫应答功能的影响
目的: 观察在饲料中添加鲜蛆、进口鱼粉、国产鱼粉对鸡免疫应答功能的影响.方法: 选成年罗曼褐壳蛋鸡,在基本饲料相同的前提下,添加鲜蝇蛆、进口鱼粉、国产鱼粉养鸡,每种饲料均设全量和减量两组,共6组,每隔一定时间以伤寒沙门菌O抗原免疫,测定血清凝集效价和脾脏指数,观察鸡的免疫应答情况,每组随机设立未免疫对照.结果: 血清凝集效价各全量组之间差别无显著性意义(P＞0.05),减量鲜蝇蛆和减量国产鱼粉差别无显著性意义(P＞0.05),但均高于减量进口鱼粉组(P＜0.05);各饲料减量组凝集效价均明显高于全量组(P＜0.05);脾脏增大以全量和减量鲜蛆组、全量进口鱼粉组、减量国产鱼粉组为明显,增大率达77.28%(P＜0.001).结论 :在饲料中添加适量家蝇幼虫对罗曼褐壳蛋鸡具有免疫调节作用.
