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用PCR分析高水平耐四环素淋病奈瑟菌质粒类型
1985年美国首次分离出高水平质粒介导的耐四环素淋病奈瑟菌(hight-level plasmid mediated tetracycline-resistant N.gonorrhoea,TRNG)以来,在世界各地引起广泛流行,欧洲、非洲、亚洲、拉丁美洲等地区都有报道,有些地方TRNG在质粒介导型耐药菌株中分离率居首位.根据限制性内切酶谱将TRNG分为"荷兰型"和"美国型"两种[1],"美国型"与1600 bp的扩增产物相关,"荷兰型"与700 bp大小的扩增产物相关.1991年成都地区首次分离出TRNG[2],现已成为本地区流行的主要耐药菌株.我国过去对TRNG分型主要采用琼脂稀释法测定对四环素的小抑菌浓度或质粒抽提等方法,未对其携带的质粒类型进行基因分型.我们对1999年-2002年我所性病门诊收集的476株淋病奈瑟菌采用琼脂稀释法和聚合酶链反应对其携带的质粒类型进行检测和分析,现报告如下.
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霍乱的分子流行病学
分子流行病学是近年来新兴的一门学科.从分子乃至基因水平上研究医学事件在人群和环境生物群体中的分布及其决策因素和调控手段的学科,是由分子生物学理论、技术与现代流行病学相结合而形成的,既有流行病学宏观概念,又有分子生物学的先进手段,从根本上对疾病的发生、发展、分布及来源进行追踪和分析,现已广泛应用于传染病、酶学方法及核酸研究手段包括生物(群)体间遗传距离的计算、蛋白质的研究、酶学方法及核酸研究方法等.本文主要介绍核酸方法:①分析染色体外DNA多态性,如质粒酶谱分析、噬菌体酶谱分析; ②染色体DNA多态性,如染色体DNA酶谱; ③重要基因的分析与病原体有关毒力因子,抗原因子等检测,在霍乱弧菌中有CTX、tcpA ,hly,zot,ace,RS1,Omp,nanH,DNase等等,采用的技术手段有琼脂凝胶电泳,基因探针及分子杂交分析方法,PCR技术及基因序列分析等已被广泛应用于霍乱流行病学研究中 .
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伤寒沙门菌CWDMs染色体的限制性内切酶谱分析
目的了解伤寒沙门菌CWDMs染色体的特点,探讨限制性内切酶谱在伤寒沙门菌CWDMs检测的应用价值.方法对伤寒沙门菌CWDMs染色体的特异性PCR扩增产物进行限制性内切酶谱分析.结果限制性内切酶谱分析显示伤寒沙门菌CWDMs具有与其亲代细菌型相同的酶谱.结论可用限制性内切酶谱分析对伤寒沙门菌CWDMs进行检测.