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脓毒症患者血清促炎和抗炎细胞因子的变化
目的 检测不同病情程度的脓毒症患者血清中促炎和抗炎细胞因子的浓度,探讨不同病情程度的脓毒症患者免疫状态变化的特点和规律.方法 因子和分别收集2005年6月至2008年2月复旦大学附属中山医院急诊科收治的38例脓毒症患者和32例重症脓毒症患者的血清标本,另选15例健康成年人作为正常对照进行前瞻性研究;排除既往患有自身免疫性疾病、正在应用免疫抑制剂、AIDS以及肿瘤患者.本研究获得复旦大学附属中山医院伦理委员会的同意.采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清标本中炎症和抗炎症细胞因子的浓度;并采用急性生理学与慢性健康评分U(APACHEⅡ)系统对患者进行病情程度的评分.各组之间的数据比较采用方差分析,运用Stepwise方法 建立多元线性回归方程.结果 脓毒症和重症脓毒症组患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-10(IL-10)的浓度与对照组相比明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);重症脓毒症组患者IL-l和Ⅱ-10的血清浓度高于脓毒症组,两组患者Ⅱ-1的浓度为26.96 ng/L和21.19 ng.L,Ⅱ-10的浓度为37.57 ng/L和26.66 ng/L,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05).TNF-α和Ⅱ-6的质量浓度较脓毒症组下降,但仍高于正常对照组,重症脓毒症组和脓毒症组TNF-α浓度为3_4.98 ng/L和44.28 ng/L,Ⅱ-6的质量浓度分别为22.48 ng/L和26.04 ng/L,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05).Ⅱ-1和IL-10的质量浓度与APACHEⅡ评分具有明显的相关性.建立的多元线性回归方程为:APACHEⅡ=-9.393+(IL10×0.550)+(Ⅱ,1×0.305)(F=26.198,P<0.001).结论 不同病情程度的脓毒症患者促炎和抗炎细胞因子的表达存在着明显差异,且免疫状态不同.脓毒症时主要表现为炎症反应的持续激活,重症脓毒症时抗炎症因子表达明显增加.
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白细胞介素-10和肿瘤坏死因子基因多态性与湖北汉族人群胃十二指肠疾病及幽门螺杆菌感染的相关性
目的 研究我同湖北汉族人群IL-10及TNF的基因多态性与胃十二指肠疾病及幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法 采用病例财照研究和聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测605例胃十二指肠疾病患者(包括196例慢性胃炎、189例胃十二指肠溃疡及220例胃癌患者)和624例健康对照者中IL-10基因启动子区3个位点(IL-10-1082/-819/-592)的等位基因型和TNFα-308、LTα(淋巴毒素α,亦称TNFβ)Nco Ⅰ、AspH Ⅰ双等位基因型分布;用ELISA法检测血清中Hp-IgG及cagA-IgG抗体水平.结果 (1)IL-10-1082 AG+GG基因型在胃癌组、慢性胃炎组及胃十二指肠溃疡组(非胃癌组)、健康对照组分布频率分别为20.0%、7.5%、6.0%和5.0%,IL-10-1082 AG+GG基因型分布在非胃痛组及健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),而胃癌组高于非胃癌组(P<0.05)及健康对照组(P<0.05),其差异均有统计学意义.胃癌组中IL-10-592及-819两个位点与非胃癌组及健康对照组比较,基因型分布差异无统计学意义(P>0.05).IL-10-819位点与IL-10-592位点基因型分布频率一致.(2)胃癌组与其余3组比较,IL-10-1082 AG+GG基因型且Hp阳性的分布频率的差异有统计学意义(P<0.05).(3)LTα Nco Ⅰ AG基因型在Hp阳性胃癌患者中(66.7%)高于Hp阳性的健康对照组(47.8%),差异有统计学意义(P<0.05),该基因型与其他胃十二指肠疾病尤相关性.TNFα-308、LTα AspH Ⅰ与Hp感染及胃十二指肠疾病亦无相关性.结论 (1)IL-10-1082 AG+GG基因型与湖北地区汉族人群胃癌发生有相关性.(2)IL-10-1082 AG+GG基因型和LTα Nco Ⅰ AG基因型与湖北汉族人群Hp阳性胃癌有相关性.
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白细胞介素10基因转染延长移植物存活的研究
目的克隆大鼠白细胞介素10(IL-10)的cDNA序列并研究IL-10基因转染对移植物的保护作用.方法一步法从脂多糖(IPS)刺激培养的脾细胞中提取细胞总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)克隆出IL-10的cDNA.将IL-10 cDNA插入pcDNA3载体进行制备、纯化.建立大鼠异位心脏移植模型,在脂质体介导下将pcDNA-IL10重组体通过冠状动脉灌注转染移植心脏.观察移植心脏的存活时间,半定量RT-PCR法检测移植心脏IL-10的转录水平,ELISA法检测IL-10的表达水平.结果大鼠IL-10 cDNA全长序列被成功克隆,序列测定证实与基因库报告的结果完全一致.基因转染的移植心脏平均存活时间明显延长(17.8天vs8.5天,P＜0.01);RT-PCR法在对照组未发现IL-10转录,而在基因转染组有3只移植心脏表现高水平转录;基因转染后3天IL-10的表达明显增加(270.8ng/L vs31.5 ng/L,P＜0.01),且移植心脏输出静脉血IL-10高于外周静脉血(270.8 ng/Lvs 163.5 ng/L).结论通过冠状动脉灌注能够进行基因转染,IL-10基因转染可以延长移植心脏的存活时间.
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大环内酯类抗生素减轻大鼠油酸性急性肺损伤
目的:观察大鼠油酸性急性肺损伤过程中的肺组织病理改变,并比较大环内酯类抗生素干预前后油酸肺组织病理形态学的变化及肺组织和血清中TNF-α、IL-10含量的变化.方法:48只健康Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组:尾静脉注射生理盐水(0.15 mL/kg);油酸(OA)模型组:尾静脉注射油酸(0.15 mL/kg);红霉素预防组和阿奇霉素预防组:分别尾静脉注射红霉素针剂(75 mg/kg)和阿奇霉素针剂(15 mg/kg)后1 h时再选另1条尾静脉注射油酸(0.15 mL/kg);红霉素治疗组和阿奇霉素治疗组:分别尾静脉注射油酸(0.15 mL/kg)后0.5 h时选另1条尾静脉分别注射红霉素针剂(75 mg/kg)和阿奇霉素针剂(15 mg/kg),注射油酸4 h后取材进行各组大鼠肺组织病理形态学评分,计算肺湿干重比,检测肺组织及大鼠血清TNF-α及IL-10含量.结果:油酸致大鼠急性肺损伤时肺组织病理形态学评分值明显高于对照组(P<0.01),肺湿干重比值高于对照组(P<0.01).肺组织及血清TNF-α、IL-10含量也明显高于正常对照组(P<0.01),药物干预组与OA模型组比较,肺组织病理形态学评分值明显降低(P<0.01),肺湿干重比值明显减小(P<0.05),肺组织及血清TNF-α含量明显减少(P<0.01),而肺组织及血清IL-10含量无显著差别(P>0.05).结论:大鼠静脉注射油酸可导致肺损伤和全身炎症反应;大环内酯类抗生素红霉索和阿奇霉素可以不同程度抑制TNF-α的产生并减轻油酸性急性肺损伤.
