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运动性骨疲劳大鼠OPG/RANKL/RANK系统和雌激素变化的实验研究
目的：研究骨疲劳大鼠OPG/RANKL/RANK系统和雌激素的变化，为寻找骨疲劳早期预警指标提供参考。方法雌性SD大鼠适应性训练1周后随机分为对照组（n=10）和训练组（n=10）。用Instron5800双立柱万能材料试验机测定胫骨骨刚度判定骨疲劳是否建模成功。用HOLOGIC Discovery W（S/N 87901）双能骨密度检测仪检测骨密度，用荧光实时定量RT-PCR和Western Blot进行骨组织RANKL、OPG和ERα的mRNA测定和蛋白相对定量，ELISA检测血清RANKL、OPG和E2。结果6周训练后，训练组比对照组的骨刚度下降27.43%，提示大鼠骨疲劳建模成功。训练组骨密度[（0.247±0.011）g/cm2]低于对照组[（0.266±0.004）g/cm2](t=4.244，P=0.001)。骨疲劳大鼠骨组织OPGmRNA和蛋白，ERα蛋白低于对照组，RANKL mRNA和蛋白高于对照组，差异均有统计学意义。训练组大鼠的血清OPG、E2及OPG/RANKL比值低于对照组，RANKL水平高于对照组，差异均有统计学意义。血清OPG与血清E2、骨组织OPG呈正相关；血清E2与骨组织OPG、ERα呈正相关关系。结论骨疲劳大鼠血清E2降低，骨吸收增强，血清OPG、RANKL和E2可作为运动性骨疲劳发生的早期预警指标。
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运动性骨疲劳大鼠血清代谢组学分析
目的:用代谢组学方法筛选运动性骨疲劳的差异代谢产物,为运动性骨疲劳的早期筛查提供依据.方法:20只雌性SD大鼠,8周龄,体重210～ 250 g,适应性训练1周后随机分为对照组(C组,n=10)和模型组(T组,n=10).对照组不训练,模型组进行递增负荷的跑台训练,6周训练结束后,用Instron 5800双立柱万能材料试验机测定大鼠胫骨骨刚度判定骨疲劳是否建模成功.血清样品经超高效液相色谱系统(UHPLC)分离后用Triple TOF 5600质谱仪(AB SCIEX)进行质谱分析,应用MetaboAnalysis软件进行多维统计分析和单维统计分析.结果:构建了正离子和负离子状态下偏小二乘判别分析(PLS-DA)模型,其模型评价参数(R2,Q2)分别为(1.00,0.78)和(0.92,0.82).共筛选出21个差异代谢产物,主要涉及色氨酸、酪氨酸,胆汁酸和磷脂代谢及丙氨酸-葡萄糖循环.具体来说,与对照组比较,模型组的L-赖氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、甘氨胆酸、牛黄胆酸和牛黄去氧胆酸上调,L-酪氨酸、L-犬尿氨酸、5-羟基多巴胺、5-羟色胺、吲哚乙酸、前列腺素、胆酸、石胆酸、脱氧鹅胆酸、卵磷脂、溶血磷脂酰胆碱、鞘磷脂下调.结论:用代谢组学方法可初步筛选出运动性骨疲劳的差异代谢物,其早期诊断价值的评价有待进一步研究.
