首页 > 文献资料
-
实时荧光环介导等温扩增在快速检测结核分枝杆菌中的应用
目的：建立实时荧光环介导等温扩增快速检测结核分枝杆菌的方法。方法针对结核分枝杆菌特异序列建立实时荧光环介导等温扩增技术；对其特异性和敏感性进行评估；通过敏感性和特异性等指标验证其稳定性。结果建立的实时荧光环介导等温扩增法对结核和非结核分枝杆菌标准菌株检测的敏感性和特异性均为100%，灵敏度可达102个菌/mL；痰标本结核分歧杆菌检测的敏感性为94.64%（53/56），荧光定量聚合酶链式反应方法检测的敏感性为92.86%(52/56)；检测的特异性为96.55%（28/29），荧光定量聚合酶链式反应方法检测的特异性为96.55%(28/29)。结论建立实时荧光环介导等温扩增检测结核分枝杆菌的方法，敏感性和特异性强，灵敏度高，稳定性好，可用于痰液中结核分枝杆菌的快速检测。
关键词： 结核分枝杆菌 实时荧光环介导等温扩增 快速检测 -
NDM-1阳性细菌实时荧光 LAMP 方法的建立及应用
目的：建立一种实时荧光环介导等温扩增（LAMP）方法快速检测新德里金属β-内酰胺酶1（NDM-1）阳性细菌。方法根据NDM-1基因序列设计4套引物并进行优化，对LAMP反应中的荧光染料SYTO-9浓度进行优化，同时考察该方法的检出限和特异性。利用本方法检测72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌。结果本研究建立的实时荧光LAMP方法，其荧光染料SYTO-9的佳浓度为4μmol/L；63℃恒温扩增35 min可检出101拷贝/μL的标准阳性模板；特异性较好；对72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌检出的阳性率为16.7%（12/72），12株NDM-1阳性细菌经测序验证，准确率为100%。结论本研究建立的检测NDM-1阳性细菌的实时荧光LAMP方法具有快速、操作简便、特异性好、敏感性高、准确、可靠等优点，可以直观、实时地观察反应的进行情况，适合临床NDM-1阳性细菌的快速检测。
