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骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症观察
目的观察骨髓来源的血管内皮祖细胞(EPC)移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症的可行性与疗效. 方法建立实验性股动脉闭塞大鼠模型.分离纯化雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),经体外培养、扩增并诱导分化、体外BrdU标记后移植到16只模型大鼠的右侧后肢(A组),同体左侧相同部位注射生理盐水作为对照(B组).分别在移植当天、移植后第14天和第28天行双下肢激光多普勒扫描,并分别于移植后第14天(8只)和第28天(8只)处死动物取双下肢肌肉组织,行免疫组织化学(FⅧ、BrdU)检查.结果移植后第14天与移植当天、移植后第28天与移植后第14天相比,A组移植后下肢血流量增加( P＜0.05);A组与B组相比,血流量亦增加( P＜0.05).A组肌束间血管内皮细胞呈BrdU阳性染色,而B组则为阴性.平均每视野FⅧ染色阳性的毛细血管数目A组明显多于B组( P＜0.01).结论骨髓来源的EPC移植可增加缺血部位血流量和毛细血管的密度.
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自体外周血单个核细胞移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症
目的:观察自体外周血单个核细胞移植对实验性股动脉闭塞大鼠的疗效.方法:选取12只雄性Wistar大鼠,结扎断离双侧股动脉,心脏抽血,经密度梯度离心获得单个核细胞(0.5～2×107/ml),右侧后肢行单个核细胞移植(A组),左侧后肢为注射生理盐水对照(B组).分别在移植当天、移植后14d和28d行双下肢激光多普勒扫描,然后处死动物取双下肢肌肉组织,行HE和免疫组织化学(FⅧ)检查.结果:①A组移植后28天与14天相比,血流量明显增加,分别是2.6±0.16和2.34±0.26,P＜0.05;移植后无论14d还是28d,A组较B组下肢血流量均有显著增加:移植后28d A组(2.6士0.16),B组(2.12±0.15),P＜0.05;移植后14d A组(2.34±0.26),B组(2.06±0.19),P＜0.05;②A组下肢毛细血管数目显著多于B组,28d A组和B组分别为8.86±1.59与5.46-±-1.06(P＜0.01).结论:自体外周血单个核细胞的移植可以显著增加缺血部位血流量和毛细血管的密度,提示单个核细胞在活体缺血环境中有分化为血管内皮细胞的潜能.
关键词： 单个核细胞 细胞移植 股动脉闭塞症 激光多普勒 血管内皮细胞第八因子相关抗原 -
大鼠骨髓间充质干细胞移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症的研究
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)单独或与必要的诱导因子组合移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症,为临床应用间充质干细胞移植治疗糖尿病足等血管闭塞性疾病提供实验依据.方法 密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化MSCs,结扎并断离大鼠双侧股动脉,复制成大鼠股动脉闭塞症模型.分别在大鼠后肢局部缺血肌肉通过多点注射的方法注射生理盐水(A组),BrdU标记的MSCs悬液(B组);BrdU标记的MSCs与利于血管新生的细胞因于悬液(C组).14天处死大鼠,取双下肢缺血部位肌肉做HE染色、免疫组织化学(FVIII、BrdU)检测.结果 密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化MSCs,移植后14d免疫组化染色发现,肌束间B组、C组有BrdU阳性的血管,而A组无Brdu阳性的血管.平均每视野FVIII染色阳性的血管数目:A组为2.8±O.6个HP,B组为8.4+2.3个、HP,C组为12.6±2.9个/HP;B组明显高于A组(p＜0.01).C组明显高于B组(p＜0.05).结论 密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化MSCs:在体外扩增的MSCs移植于缺血的活体组织可以发育成血管,从而改善缺血部位的血液循环.无论是MSCs单独移植还是与必要的细胞因子组合移植其血管再生作用都超过大鼠自身在缺血环境中的血管重建或再生.但MSCs与必要的细胞因子组合的血管再生作用明显超过MSCs单独移植.
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蓬子菜冲剂对降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平的影响
目的:观察蓬子菜冲剂对股动脉闭塞症家兔的降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的水平的影响.方法:建立股动脉闭塞症家兔模型,并观察蓬子菜冲剂对其血浆降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的影响.结果:股动脉闭塞症家兔的降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平降低.蓬子菜冲剂能够明显提高降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的水平,且效果类似康脉胶囊.结论:蓬子菜冲剂治疗动脉闭塞症的机理与调节降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平相关.
