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RNA编辑酶ADAR2在人胶质瘤细胞株中的表达
目的 观察人胶质瘤细胞株SHG44、BT325、U251和正常人脑星形细胞(NHA)中ADAR2mRNA表达水平及苯乙酸(PA)对U251细胞中ADAR2表达的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time fluorescent quantitative PCR)方法检测胶质瘤细胞中ADAR2mRNA表达水平,检测PA处理前后U251细胞中ADAR2mRNA表达水平的变化；噻唑蓝(MTT)比色法检测PA作用24、48和72 h后U251细胞增殖.Western印迹法检测PA作用前后U251细胞中ADAR2蛋白表达.结果 Real-time PCR检测显示:ADAR2 mRNA在NHA中表达极弱(19.9±2.2),在SHG44和BT325细胞中明显表达(35.6±2.8、78.8±3.2),在U251细胞中表达水平高(101.3±3.5).PA3.0和5.0 mmol/L作用U251细胞24h后,ADAR2mRNA分别为60.3±1.5和50.5±l.2(P＜0.01)；MTT法检测显示PA对U251细胞的增殖呈时间和剂量依赖性抑制(P＜0.01)；Western印迹法显示PA可降低ADAR2蛋白表达水平.结论 在不同的胶质瘤细胞中,ADAR2mRNA表达水平不同；PA可抑制U251细胞中ADAR2mRNA和蛋白水平的表达.
关键词： 胶质瘤 ADAR2 苯乙酸 实时荧光定量聚合酶链反应 Western印迹法 -
Ephrin-B2在人胶质瘤中的表达及意义
目的探讨Ephrin-B2基因在人胶质瘤中的表达规律及意义.方法分别用免疫组织化学和Western印迹法检测4例正常脑组织和21例人脑胶质瘤中Ephrin-B2基因的表达.结果 Western印迹法检测显示,人正常脑组织中未见Ephrin-B2基因明显表达,不同病理级别胶质瘤组织均有不同程度Ephrin-B2蛋白表达,Ⅲ级、Ⅳ级表达较强,分别与Ⅰ、Ⅱ级比较,差异均有显著性(P<0.01), Ⅲ级与Ⅳ级之间以及Ⅰ与Ⅱ级之间比较,差异无显著性(P>0.05).免疫组化检测显示,Ephrin-B2蛋白除在肿瘤细胞中有表达外,在各级别胶质瘤中血管内皮细胞表达呈强阳性.结论 Ephrin-B2在胶质瘤发生、发展和血管生成中可能有重要作用.
关键词： 胶质瘤 Ephrin-B2 表达 免疫组化 Western印迹法 -
PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及意义
目的:探讨磷酸酶-张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在正常脑组织及星形细胞瘤中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学法及RT-PCR方法检测正常脑组织及不同分级星形细胞瘤组织中PTEN蛋白及mRNA的表达水平,探讨并分析其与星形细胞瘤组织学分级的关系,Western印迹法检测正常脑组织及星形细胞瘤脑脊液中PTEN蛋白的表达.结果:免疫组织化学方法显示PTEN在正常脑组织中阳性率较高,为90%(9/10),星形细胞瘤中阳性率较低,为47.5%(19/40),且PTEN在不同的组织学分级中,阳性率不同.RT-PCR结果显示PTEN mRNA在正常脑组织中表达较高,其相对表达量为0.861±0.072,显著高于星形细胞瘤组织中的表达(0.127±0.008),差异有统计学意义(P<0.05),并随着组织学级别增加,其表达呈降低趋势.Western印迹法结果显示PTEN蛋白在非星形细胞瘤组脑脊液中的相对表达量为1.549±0.194,高于星形细胞瘤组脑脊液中的相对表达量(0.602±0.058),差异具有统计学意义(P<0.05).结论:检测PTEN基因蛋白表达有望作为评估人星形细胞瘤生物学行为和预后的参考指标.
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46例非小细胞肺癌Western blot与免疫组化神经内分泌表达的检测
目的:探讨Western印迹法与免疫组化在非小细胞肺癌中神经内分泌(NE)分化诊断中的价值.方法:对46例非小细胞肺癌(NSCLC)采用Western印迹法及免疫组化进行了神经特异性烯醇化酶(NSE)、嗜铬粒素A(CgA)、突触素(Syn)的检测.结果:Western印迹法在非小细胞肺癌(NSCLC)中检测NSE、CgA和Syn的阳性率分别为63.0%、65.0%、50.0%,均高于免疫组化的阳性率47.8%、26.1%、34.7.Western印迹法和免疫组化的检测结果与肺癌的组织学类型和分化程度无明显关系.结论:NSCLC中存在较高比例的神经内分泌分化.Western印迹法和免疫组化对诊断NSCLC中的神经内分泌分化均有重要帮助.
关键词： 肺癌 神经内分泌 Western印迹法 免疫组化 -
实验性肝纤维化过程中基质分解素-1酶原的表达变化
目的研究实验性肝纤维化过程中基质分解素-1(MMP-3)酶原蛋白表达的动态变化.方法建立四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化模型, 采用半定量Western 免疫印迹方法,对肝纤维化不同阶段肝内MMP-3的酶原蛋白的表达水平进行了检测.结果在正常大鼠肝组织中有MMP-3的酶原表达.在肝纤维化发生发展过程中MMP-3酶原蛋白表达水平逐渐增强,至肝纤维化中期到达高峰,到肝纤维化晚期及肝硬化阶段其表达较中期下降,但仍高于正常对照水平.结论 MMP-3在肝纤维化的发生、发展直至肝硬化形成过程中可能发挥着重要作用.
关键词： 实验性肝纤维化 基质分解素-1 酶原蛋白 Western印迹法 -
Caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达研究
目的研究caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达及其意义.方法用western-blot方法对出生1天和3个月SD大鼠的大脑皮质、中脑和小脑组织的caspase-3进行半定量测定.结果出生1天大鼠脑的caspase-3表达较高,出生3个月大鼠脑的caspase-3表达较低.结论caspase-3在中枢神经系统的发育成熟过程中对神经元的凋亡起着关键性作用.
关键词： 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 脑 细胞凋亡 Western印迹法 -
KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠心脏组织中的分布和表达
目的 研究KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠(SHR)心脏不同部位的分布和表达差异,及鼠龄对其表达水平的影响.方法 提取幼龄和高龄SHR心肌不同部位(心室、室隔膜和心房)组织的膜蛋白,利用Western印迹技术和图象分析方法,比较KCNE2蛋白在样品之间免疫强度差异.结果 SHR心肌不同部位组织中均有KCNE2蛋白的分布;同龄大鼠心肌不同部位组织中KCNE2蛋白的表达均无显著性差异;但在高龄大鼠的右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达显著高于其在幼龄大鼠相同组织中的表达.结论 KCNE2蛋白在SHR心脏不同部位均有分布;在高龄大鼠右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达水平均高于其在幼龄大鼠同一组织中的表达.
关键词： KCNE2 自发性高血压大鼠 Western印迹法
