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高效液相色谱法监测丙戊酸血药浓度回顾性分析
丙戊酸(Vaproic acid,VAP)是治疗癫痫失神发作、不典型失神发作、肌阵挛性发作及全身性强直阵挛发作的首选药物，疗效较好［1］。由于癫痫患者需长期服用药物，患者的个体差异较大，临床上难以控制用药剂量和对治疗效果作出正确的判断。为此，我们利用高效液相色谱法对服用丙戊酸的癫痫患者进行血药浓度监测，现将监测结果及分析总结报道如下。1 材料和方法1.1 仪器与试剂 ①仪器：日本岛津公司液相色谱系统。②试剂：丙戊酸对照品(纯度99.8%，河南省人民医院提供)，W-溴苯乙酮(中国青浦合成试剂厂提供)，甲醇为色谱纯；正已烷、三乙胺均为分析纯；重蒸馏水。③标准贮备液：丙戊酸1mg/ml的甲醇液，W-溴苯乙酮0.5 mg/ml的乙腈液。1.2 样品处理与测定方法 ①采血时间 患者服药2～4wk达稳态后静脉抽血。②样品处理 将静脉血离心，取200 μl血清，加1 mol/L硫酸0.2 ml，正已烷2 ml旋涡混旋后离心15min，取有机层100 μl，入具塞锥形试管中，加2 g/L三乙胺应用液40 μl，再加W-溴苯乙酮液40 μl密塞，55℃～60℃水浴衍生化20min去塞，55℃～60℃水浴氮气流吹干，100 μl甲醇重溶，取10 μl～20 μl进样。③色谱条件 150mmODS×4.6mmODS柱。流动相：甲醇∶水＝80∶20，流速：1ml/min，紫外检测波长254 nm。
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阿尼西坦改善脑性继发性癫痫患者智能障碍28例报告
继发性癫痫伴发智能障碍患者28例,在服用抗癫痫药的同时,加服阿尼西坦治疗,剂量200mg,3次/d,口服,疗程2个月.观察治疗前和治疗2个月后临床记忆量表、简明精神状态(MMSE)行为量表和评分变化.疗效为总有效率83.3%.治疗后记忆商均值和MMSE均值较治疗前明显提高.提示阿尼西坦对癫痫患者的智能障碍有效.
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雷帕霉素脑靶向制剂对大鼠癫痫的治疗作用
目的:比较雷帕霉素靶向制剂与雷帕霉素普通制剂治疗癫痫的差异.方法:制备脑靶向的雷帕霉素纳米粒.采用毛果芸香碱诱发大鼠癫痫发作.脑电描记术监测自发性癫痫的发作;蛋白质印迹法检测不同剂型雷帕霉素对mTOR信号通路的影响;Fluoro-Jade B染色观察海马区神经元活性;Timm染色观察海马区苔藓纤维出芽情况.结果:脑靶向制剂可降低大鼠自发性癫痫发作频率,作用效果较普通制剂明显(P<0.05);以磷酸化S6K和S6为指征,脑靶向制剂比普通制剂雷帕霉素对mTOR信号通路异常激活的抑制作用更强(均P<0.05);脑靶向制剂可显著改善神经元凋亡,但与普通制剂无差异(P>0.05);脑靶向制剂可减少海马区苔藓纤维出芽,作用效果较普通制剂明显(P<0.05);脑靶向制剂对大鼠体质量增长的抑制作用较普通制剂减弱(P<0.05).结论:雷帕霉素脑靶向制剂对癫痫的治疗作用优于普通制剂,且其不良反应小于普通制剂.
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丙戊酸钠慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3及GABA-TmRNA表达的影响
目的通过研究丙戊酸钠(VPA)慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞γ-氨基丁酸转运体-3(GAT-3)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T) mRNA表达水平的影响,从星形胶质细胞的角度来探讨VPA的停药反跳机制.方法用含50mg/L VPA的DMEM培养基将C6细胞培养2周后制成VPA慢性作用模型,采用半定量RT-PCR方法检测VPA慢性作用及停药后对C6神经胶质瘤细胞GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的变化.结果 (1)在VPA慢性作用下,相对灰度值(RV值,即GAT-3、GABA-T电泳条带与相应的β-actin灰度积分的百分比)为(39.1±0.5)%,低于正常对照组的(46±1.3)%;各停药组的RV值均低于VPA慢性作用组,其中停药24 h组的低,为(11.7±1.6)%,停药30 min组的高,为(38.9±0.6)%;而停药48 h组又升高到(33.5±1.1)%.(2)VPA慢性作用组[RV值为(71.31±6.91)%]与对照组[RV值为(34.77±3.26)%]相比,GAB-TmRNA表达明显上调;各停药组与VPA慢性作用组相比GABA-TmRNA的表达明显下调,其中停药12 h组[RV值为(25.36±7.68)%]降至低.结论VPA慢性作用可使GAT-3 mRNA的表达下调,使GABA-TmRNA表达上调.VPA慢性作用后停药造成的GAT-3和GABA-T mRNA表达水平的波动可能与VPA停药反跳有关.
