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MR分子探针RGD-USPIO评价核苷组合对人肝癌细胞Bel-7402的作用
目的 利用超微超顺磁性氧化铁(USPIO)标记的含有精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸(RGD)序列的环肽探针(RGD-USPIO)评价核苷组合对人肝癌细胞Bel-7402的作用效果及抗肿瘤作用机制.方法 将对数生长期的人肝癌细胞Bel-7402分为2组,实验组加入1 mmol/L核苷组合,对照组加入1640培养液,共同培养48 h后加入等量的RGD-USPIO培养6h,行体外MR成像并测量T2WI信号强度.提取实验组和对照组的细胞总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR及Western blot检测整合素αvβ3的表达情况.结果 MR扫描显示对照组和实验组T2WI信号强度分别为241.05土15.36、997.35±42.83,差异有统计学意义(t=28.79,P＜0.01);实时荧光定量PCR结果显示实验组αvβ3 mR-NA表达水平是对照组的(0.22±0.02)倍(t=4.50,P＜0.01);Western blot结果显示实验组蛋白条带较对照组浅,实验组肿瘤细胞整合素αvβ3的表达较对照组低(t=11.88,P＜0.01).结论 核苷组合通过抑制整合素配体受体结合而发挥抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关;MR分子探针RGD-USPIO可简便、准确地评价核苷组合对Bel-7402细胞的作用.
关键词： 精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸 超微超顺磁性氧化铁 核苷组合 整合素αvβ3 -
MR分子探针RGD-USPIO评价核苷组合对小鼠结肠癌的抑瘤作用
目的 利用前期制备的超微超顺磁性氧化铁(USPIO)标记的含有精-甘-天冬氨酸(RGD)序列的环肽探针(RGD-USPIO)进行MRI、HE染色及Western blot检测,评价核苷组合(脱氧腺苷∶鸟苷∶脱氧鸟苷摩尔浓度比例2∶1∶2)对小鼠结肠癌的作用效果及抗肿瘤作用机制.方法 建立BALB/c小鼠CT26移植瘤模型,实验组腹腔注射核苷组合,对照组注射生理盐水,分别于用药后第7、14天尾静脉注射RGD-USPIO,注射前及注射后1h行MRI,测量肿瘤T2 WI信号强度.MRI检查结束后,处死小鼠,行HE染色及Western blot检测整合素αvβ3的表达.结果 MRI扫描显示注射RGD-USPIO前后,第7天实验组T2 WI信号强度分别为941.46±68.12、637.39±32.27,有显著差异(P＜0.05),对照组T2 WI信号强度为966.14±82.11、265.04±21.05,有显著差异(P＜0.05);第14天实验组T2 WI信号强度分别为999.32±65.91、497.31±27.64,有显著差异(P＜0.05),对照组T2 WI信号强度为1 004.47±72.55、114.29±19.33,有显著差异(P＜0.05).第7、14天实验组和对照组之间,增强前后瘤灶的T2信号差值亦有显著差异(P＜0.05).Western blot结果显示,实验组蛋白条带较对照组浅,说明实验组肿瘤整合素avβ3的表达较对照组低(P＜0.05).结论 核苷组合抗肿瘤机制可能与抑制肿瘤细胞和肿瘤新生血管的生长有关;MR分子探针RGD-USPIO可实时、动态、无创地评价核苷组合对小鼠结肠癌的作用.
