首页 > 文献资料
-
整合素αvβ3和骨桥蛋白在多囊卵巢综合征患者植入窗期子宫内膜的表达
目的 探讨整合素αvβ3和骨桥蛋白(OPN)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者植入窗期子宫内膜的表达. 方法 选取15名典型PCOS患者(其中7例为自主排卵,8例为促排卵)为PCOS组,同期选择15例月经周期规律妇女为对照组.阴道超声监测排卵,排卵日测定子宫内膜分型及厚度;免疫组织化学技术测定植入窗期的子宫内膜整合素αvβ3和骨桥蛋白的表达;放射免疫法测定内膜活检当天的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)的浓度. 结果 与对照组比较,PCOS组植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均显著下调(P＜0.01),两者之间不伴有比例的失调;排卵日子宫内膜厚度两组无显著差异(P>0.05);子宫内膜分型有显著性差异(P＜0.05);血清E2水平显著高于对照组(P<0.01),E2/P比值亦显著高于对照组(P<0.05),而P显著低于对照组(P<0.01). 结论 PCOS患者植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和OPN表达均下调,子宫内膜容受性降低,影响了胚泡着床.
-
子宫内膜整合素αvβ3表达与体外受精-胚胎移植反复种植失败的相关性研究
目的 研究整合素αvβ3在人各时期子宫内膜及蜕膜组织的表达,并探讨其与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)反复种植失败的相关性.方法 以40例IVF-ET治疗反复种植失败的患者为研究对象,以40例因男性因素行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的患者及5例正常孕早期患者作为对照,获取患者各个时期的子宫内膜及蜕膜组织,采用免疫组织化学法检测整合素αvβ3蛋白的定位和表达,并对所获得的结果应用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测定阳性反应强度.结果 整合素αvβ3蛋白定位于子宫内膜腺上皮细胞和腔上皮细胞的细胞浆;增殖早、中、晚期及分泌早期内膜上均无表达,分泌中期、晚期内膜明显表达,蜕膜中表达强(P<0.05).反复种植失败患者子宫内膜整合素αvβ3的表达同样存在周期性变化,但其在分泌中、晚期的表达要明显弱于对照组,差异有统计学意义 (P<0.05).结论 整合素αvβ3在正常子宫内膜组织中的表达呈现明显周期依赖性,与胚胎种植密切相关;而其在IVF-ET反复种植失败患者种植窗期子宫内膜组织中的表达明显减弱,可能是导致胚胎种植失败的原因之一.
-
整合素αvβ3、骨桥蛋白对子宫内膜容受性的影响
除了胚胎质量,子宫内膜容受性对成功着床也同样重要.子宫内膜在分化发育过程中受多种生物因子的调控,其中整合素αvβ3及其配体骨桥蛋白在子宫内膜表面呈周期性高表达,与子宫内膜"着床窗"期同步,是目前公认的子宫内膜容受性标志物,其表达异常与不孕症的发生发展密切相关.本文对整合素αvβ3、骨桥蛋白与子宫内膜容受性的关系及其在胚胎着床中的作用进行综述.
-
cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞的体外抑制作用及在荷瘤鼠体内分布及显像研究
目的 探讨cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞的体外抑制作用及其在荷B16黑色素瘤细胞小鼠动物模型体内的分布及显像研究.方法 用MTT法检测不同浓度及作用时间cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞体外增殖能力的影响.采用直接标记法标记99 Tcm-c(RGD)2.建立荷B16黑色素瘤株动物模型,待肿瘤体积为1.0 ～ 1.5cm3左右时,分别于30min、1h、2h、3h、4h、5h及6h时,进行荷瘤鼠体内生物分布及动态显像研究.结果 cRGD肽二聚体浓度为500mg/L、作用48h时,对B16黑色素瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.室温下、ρ(SnCl2·2H20)=1 g/L、反应时间为30 min时,99Tcm-c(RGD)2的标记率可达(87.42±3.21)％,标记产物经Sephadex G10分离纯化后放射化学纯度大于95％;静脉注射后30min行小鼠全身SPECT显像,肿瘤部位可见明显显像剂聚集,但肿瘤与周围组织的对比度较低;延迟至6小时肿瘤仍清晰可见,且随时间延迟肿瘤与周围组织的对比度增高,此时肿瘤/血液为2.15±0.24,肿瘤/肌肉为5.07 ±0.03.结论 该结构cRGD肽二聚体对B16黑色素瘤细胞株具有一定的体外抑制作用,且动物体内肿瘤组织摄取率高,显像清晰,证明其可进一步应用于聚合物多肽靶向药物的研发.
-
大肠癌ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达及微血管形成的相关性
目的 探讨大肠癌组织中单ADP核糖基转移酶ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达的相关性及其对大肠癌组织微血管生成的影响.方法 免疫组化检测大肠癌组织中ART1、VEGF及整合素αVβ3的表达；免疫荧光双标检测ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3的共表达,用Chalkley分析法评估微血管的形成.结果 ART1、VEGF与整合素αVβ3的表达高于对照(P＜0.05),且ART1与VEGF、整合素αVβ3的表达呈正相关(P＜0.05).ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3共表达的大肠癌组织微血管密度较高(分别为25.4±8.23和22.3 ±5.9),且高于非共表达组(分别为5.5±2.0和8.1±3.3,P＜0.01).结论 ART1在大肠癌组织中表达增强,并与VEGF及整合素αVβ3的表达具有正相关性,可能促进肿瘤微血管生成.
-
SZ-21拮抗血管生成的初步研究
本研究的目的是从SZ-1,-2,-21,-22,-51,-65及262(GPⅡ b/Ⅲa McAb)中筛选出与ECV304(人脐静脉内皮细胞株)起反应的单抗,研究其抗血管生成的能力.用流式细胞仪筛选与ECV304起反应的单抗,用酶标法检测反应的单抗对ECV304、肺癌细胞株A549粘附、迁移的作用,采用鸡绒毛尿囊膜(CAM)血管生成分析法观察其体外抗血管生成作用,以AnnexinV TITC盒检测单抗对A549细胞的凋亡作用.结果表明:筛选出了与ECV304起反应的SZ-21,其对ECV304与基质纤连蛋白(Fn)、胶原蛋白(Col)Ⅳ间粘附、迁移均有抑制作用,鸡绒毛尿囊膜经TNF-α诱导血管生成后SZ-21可抑制其新生.进一步研究发现SZ-21对肿瘤细胞A549(肺癌细胞株)与基质Fn,ColⅣ间粘附、迁移亦有拮抗作用,对A549细胞可诱导其凋亡.结论:SZ-21通过对整合素(integrin)β3的抑制和诱导凋亡的作用表现了抗血管生成的能力,整合素与Fn,COlⅣ的结合部位也不限于RGD序列,而具有不同的识别信号.
-
RGD双模态探针分子影像学研究进展
整合素αvβ3在肿瘤新生血管形成中发挥十分重要的作用,利用其特异性配体RGD (Arg-Gly-Asp)动态监测整合素αvβ3的表达情况、定性评估肿瘤血管生成,对肿瘤的良恶性判定及预后评估有重要的意义.基于RGD肽的分子影像学检查方法是监测整合素αvβ3表达的无创新技术,在肿瘤的早期诊断与疗效监测、肿瘤靶向药物的研制以及其他非肿瘤疾病的治疗中有潜在的应用前景.本文对RGD双模态分子探针在临床前期应用中的研究价值进行综述.
-
αvβ3整合素受体靶向性超顺磁性脂质体的建立及体外磁共振观察
目的 合成以RGD短肽为亲和成分的靶向性超顺磁性长循环脂质体,并通过体外细胞学实验确定其受体靶向性,探讨其用于肿瘤受体成像的可能性.方法 采用薄膜法分别合成表面连接和不连接RGD的靶向性和非靶向性长循环脂质体;以流式细胞分析及共聚焦激光扫描显微镜观察靶向对比剂对HUVEC细胞的特异性标记.结果 ①合成的超顺磁性脂质体粒径在150 nm左右,具有较高的弛豫率;②靶向性对比剂对αvβ3整合素受体具有较高的特异性亲和力;可通过受体介导的内吞作用进入细胞内;③靶向对比剂与细胞结合后,可以明显降低细胞的信号.结论 RGD-超顺磁性长循环脂质体具有较高的弛豫率,能与αvβ3整合素受体特异性结合,在靶点特异性浓聚,并能经MR扫描证实.
关键词： 超顺磁性脂质体 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸 整合素αvβ3 血管生成 磁共振成像 -
MR分子探针RGD-USPIO评价核苷组合对人肝癌细胞Bel-7402的作用
目的 利用超微超顺磁性氧化铁(USPIO)标记的含有精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸(RGD)序列的环肽探针(RGD-USPIO)评价核苷组合对人肝癌细胞Bel-7402的作用效果及抗肿瘤作用机制.方法 将对数生长期的人肝癌细胞Bel-7402分为2组,实验组加入1 mmol/L核苷组合,对照组加入1640培养液,共同培养48 h后加入等量的RGD-USPIO培养6h,行体外MR成像并测量T2WI信号强度.提取实验组和对照组的细胞总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR及Western blot检测整合素αvβ3的表达情况.结果 MR扫描显示对照组和实验组T2WI信号强度分别为241.05土15.36、997.35±42.83,差异有统计学意义(t=28.79,P＜0.01);实时荧光定量PCR结果显示实验组αvβ3 mR-NA表达水平是对照组的(0.22±0.02)倍(t=4.50,P＜0.01);Western blot结果显示实验组蛋白条带较对照组浅,实验组肿瘤细胞整合素αvβ3的表达较对照组低(t=11.88,P＜0.01).结论 核苷组合通过抑制整合素配体受体结合而发挥抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关;MR分子探针RGD-USPIO可简便、准确地评价核苷组合对Bel-7402细胞的作用.
关键词： 精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸 超微超顺磁性氧化铁 核苷组合 整合素αvβ3 -
Integrin αvβ3靶向超声微泡的制备及体外寻靶实验
目的 制备Integrin αvβ3靶向超声微泡,对其一般理化性质及体外寻靶能力进行检测.方法 采用巯基-马来酰亚胺连接法制备携FITC标记iRGD肽的Integrin αvβ3靶向微泡(MBIntegrinαvβ3),并制备空白微泡(MBcontrol).检测两组微泡的一般理化性质,在荧光显微镜下观察两组微泡荧光显像,流式细胞仪检测两组微泡FITC荧光含量.于光学显微镜及荧光显微镜下观察两组微泡与小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的黏附情况.结果 ①MBIntegrin αvβ3粒径为(0.84±0.26)μm,与MBcontrol粒径(0.79±0.19)μm差异无统计学意义(P＞0.05);②荧光显微镜下观察,MBcontrol组微泡无荧光显示,MBIntegrinαvβ3组微泡表面显示绿色荧光;③流式细胞仪测得MBIntegrinαvβ3组微泡FITC荧光含量为98.4％,MBcontrol组微泡FITC荧光含量为2.5％;④体外寻靶实验显示,MBIntegrinαvβ3组微泡能聚集结合于bEnd.3细胞表面.结论 成功制备了携iRGD肽的Integrin αvβ3靶向微泡,其具有良好的体外寻靶能力.
-
构建及应用针对非小细胞肺癌整合素αvβ3受体靶向性纳米分子探针:体外实验研究
目的 构建以整合素αvβ3为靶点的纳米分子探针,探讨其理化、生物学特征及对非小细胞肺癌A549细胞靶向性MR成像能力.方法 构建以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(RGD)为靶向基团的分子探针RGD-Gd@BSA,检测其T1弛豫率、水合动力学直径、Zeta电位、分散稳定性和细胞毒性,并比较RGD-Gd@BSA(靶向组)和Gd@BSA(非靶向组)与肺癌A549细胞的靶向能力.结果 线性拟合获得RGD-Gd@BSA的T1弛豫率为18.615 L/(mmol·s),明显高于Gd-DTPA的3.404 L/(mmol·s);RGDGd@BSA探针呈类球形,平均水合动力学直径为(99.52±2.62) nm;Zeta电位为(-11.07±0.42) mV,在溶液中分散稳定.Gd3+浓度为0.15、0.30、0.60、1.20和2.40 μmol/L的RGD-Gd@BSA溶液中,人胚肾293T细胞的存活率分别为81.74％、86.80％、69.83％、78.41％和66.95％.共聚焦显微镜成像可见靶向组细胞具有比非靶向组更高的荧光强度;靶向组细胞悬液的T1WI相对信号强度高于非靶向组.结论 纳米分子探针RGD-Gd@BSA具备稳定的理化特性、较好的生物相容性、较高的T1弛豫率和对肺癌A549细胞的靶向性,具有作为用于非小细胞肺癌特异性诊断的纳米分子探针的价值.
-
卵泡未破裂黄素化患者子宫内膜中雌、孕激素受体及整合素αVβ3的表达及其意义
目的 研究卵泡末破裂黄素化(LUF)患者子宫内膜中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及整合素αVβ3的表达,探讨其对子宫内膜容受性的影响.方法 选择2007年5-11月在武汉大学人民医院生殖医学中心拟行冻融胚胎移植的17例发生LUF的不孕患者为LUF组,选掸同期排卵周期正常的13例不孕患者作为对照组.于两组患者黄体生成素(LH)峰出现后第7-11天刮取子宫前、后壁获取子宫内膜组织,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法检测子宫内膜中ER、PR及整合素αVβ3的表达;同时采用化学发光法测定两组患者血清雌二醇、孕酮水平;分析LUF组患者子宫内膜中整合素αVβ3表达水平与血清雌二醇、孕酮水平的关系.结果 (1)LUF组及对照组患者血清雌二醇水平分别为(656±299)和(727±275)pmol/L,两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);孕酮水平分别为(23±8)和(35±10)nmol/L,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)LUF组患者子宫内膜中ER及PR的表达水平分别为(183.9±2.4)、(168±3)分,均高于对照组[分别为(109.4±6.3)、(106±4)分],整合素αVβ3的表达水平为(115±11)分,低于对照组[(191±9)分],两组间分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(3)LUF组患者子官内膜中整合素αVβ3的表达水平与血清孕酮水平旱正相关关系(r=0.77,P<0.01),而与血清雌二醇水平无关(r=0.01,P>0.05).结论 LUF患者子宫内膜中ER及PR的表达升高,整合素αVβ3的表达降低,可能导致子官内膜容受性受损,从而影响胚胎的着床.
-
胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养的滋养细胞黏附作用的影响及机理探讨
目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)影响体外培养的滋养细胞黏附作用的机理.方法从6例早孕患者人工流产的绒毛组织中获取滋养细胞,建立体外滋养细胞黏附模型,在无血清培养液中,加入浓度为10 nmol/L的IGF-Ⅰ进行培养处理.单纯加入IGF-Ⅰ的细胞为IGF-Ⅰ组;加入IGF-Ⅰ及抗整合素αvβ3 抗体(抗整合素抗体)的细胞为IGF-Ⅰ+抗整合素组;不加IGF-Ⅰ的细胞为对照组.采用酶联免疫检测仪测定吸光度(A)值,表示黏附细胞的相对数量.于扫描电镜下观察IGF-Ⅰ组和对照组的细胞形态的变化,并采用免疫组化方法,检测该两组细胞中磷酸化黏着斑激酶的表达.结果 IGF-Ⅰ组的平均A值为0.491±0.049,明显高于对照组的0.198±0.022,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).IGF-Ⅰ+抗整合素组的平均A值为0.184±0.031,明显低于IGF-Ⅰ组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜观察显示,滋养细胞加入IGF-Ⅰ后,与纤维粘连蛋白黏附局部,可见滋养细胞表面片状伪足形成,与对照组比较,片状伪足明显增多并伸展.免疫组化染色结果,滋养细胞加入IGF-Ⅰ后,细胞膜及细胞质中磷酸化黏着斑激酶呈阳性表达.结论浓度为10 nmol/L的IGF-Ⅰ通过激活磷酸化黏着斑激酶,刺激滋养细胞表面片状伪足的形成并伸展,促进滋养细胞黏附到纤维粘连蛋白上,而抗整合素抗体则可明显抑制IGF-Ⅰ的促黏附作用.
-
重组多肽CH50抑制肿瘤细胞侵袭生长和血管形成能力
目的 观察纤连蛋白重组多肽CH50对小鼠肝癌细胞侵袭和肿瘤血管形成能力的影响,探讨CH50多肽治疗肿瘤可能的分子机制.方法 接种H22肝癌细胞建立小鼠肿瘤模型,采用裸DNA-尾静脉注射方法在小鼠体内表达CH50多肽,进行基因治疗.HE染色观察治疗后肿瘤细胞侵袭能力和血管形成的改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和明胶电泳检测肿瘤组织边缘基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA和蛋白表达及活性;体外培养H22细胞,检测CH50多肽对相关基因表达和细胞黏附能力的影响.结果 小鼠体内非定位转染表达CH50多肽,对肿瘤生长具有明显的抑制作用,接种后第16天,治疗组瘤重为(0.78±0.18)g,低于质粒对照组和空白对照组(P＜0.05);从组织水平观察,CH50多肽治疗导致肿瘤细胞大量坏死,可抑制肿瘤细胞侵袭生长和肿瘤血管生成,抑制肿瘤血管建立侧支循环.pCH510治疗组的肿瘤边缘组织中,活性型MMP-9的含量为3.2±0.7,显著低于空白对照组和质粒对照组,且活性型MMP-9占总MMP-9的比例也显著降低,是空白对照组和质粒对照组的1/4左右,但对MMP-9 mRNA表达没有明显影响.CH50多肽可下调H22细胞的αv、β3、cdc2基因的表达水平,降低H22细胞整合素αvβ3的活性.结论 CH50多肽可以通过影响MMP-9和整合素αvβ3的功能起到抑制肿瘤生长、侵袭和肿瘤血管形成的作用.
-
整合素αvβ3、趋化因子受体4和7在头颈部鳞状细胞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系
目的 探讨整合素αvβ3、趋化因子受体(CXC chemokine receptor,CXCR)4、CXCR7在头颈部鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of head and neck,SCCHN)及颈淋巴结组织中的表达及其在淋巴结转移中的作用.方法 收集2010年1月至2015年1月郑州大学附属肿瘤医院头颈甲状腺外科92例SCCHN,应用免疫组织化学SABC法检测SCCHN、淋巴结转移灶、正常淋巴结以及正常黏膜组织中整合素αvβ3、CXCR4和CXCR7的表达情况.结果 整合素αvβ3、CXCR4和CXCR7主要表达于SCCHN的胞质和胞膜,三者在SCCHN原发灶中阳性表达率分别为75％(69/92)、82％(75/92)和76％(70/92),在淋巴结转移灶中阳性表达率分别为81％(75/92)、76％ (70/92)和65％(60/92).整合素αvβ3、CXCR4在SCCHN原发灶(r=0.813,P＜0.05)和淋巴结转移中(r=0.541,P＜0.05)的表达呈正相关;整合素αvβ3及CXCR7在SCCHN原发灶(r=0.683,P＜0.05)和淋巴结转移中(r=0.708,P＜0.05)的表达呈正相关;CXCR4、CXCR7在SCCHN原发灶(r=0.644,P＜0.05)和淋巴结转移中(r=0.707,P＜0.05)的表达呈正相关.整合素αvβ3、CXCR4和CXCR7表达的强弱与肿瘤大小(P=0.040、0.001、0.009)、淋巴结转移(P=0.001、0.000、0.000)、有无周围组织侵犯(P=0.046、0.002、0.001)显著相关,与患者年龄(P=0.097、0.274、0.162)、性别(P=0.103、0.309、0.187)无关.结论 整合素αvβ3、CXCR4、CXCR7在SCCHN原发灶组织及转移淋巴结中呈高表达,并与淋巴转移显著相关,三者可能共同促进SCCHN的淋巴结转移.
-
靶向肿瘤血管生成的体外MR分子成像的初步研究
目的 应用GoldMagTM-CS纳米金磁微粒标记含RGD序列的环形多肽[cyclic arginine-glycineaspartic-D-phenylalanine-lysine,c(RGDfK))]构建靶向肿瘤新生血管特异性分子探针并探讨其在体内MR成像的可行性.方法 通过GoldMagTM-CS纳米金磁微粒与c(RGDfK)非共价键偶联方法构建特异性分子探针(RGD@GOLDMag).利用流式细胞术观察RGD@GOLDMag与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)结合的特异性.建立MR扫描序列,根据孵育HUVECs的探针的不同,分为A阳性组(RGD@GOLDMag孵育)、B阴性对照组(无关抗体和金磁颗粒耦合成的探针孵育)和C竞争抑制对照组[预先加入c(RGDfK)、30 min后再加入RGD@GOLDMag孵育],另外设立2个空白对照组D及E(试管中只加水或凝胶).利用临床应用的3.0 T磁共振扫描仪进行MR成像,观察其对磁共振信号的影响.结果 成功构建了靶向血管生成的特异性MR分子探针;构建的MR分子探针能与HUVECs特异性地结合;并可显著降低T2*序列信号.竞争抑制对照组及阴性对照组信号无明显改变,信号差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 应用纳米金磁微粒及c(RGDfK)构建的MR分子探针能在临床应用的3.0 T磁共振扫描仪特异性的靶向肿瘤血管生成,有望应用于活体肿瘤新生血管的特异性显像.
-
Interceed对宫腔粘连兔子宫内膜容受性的影响
目的 探讨氧化再生纤维素防粘连膜(Interceed)治疗新西兰大白兔宫腔粘连(IUA)的有效性及其对子宫内膜容受性的影响.方法 将48只雌兔随机分为4组(每组12只):正常对照组(A)、Interceed对照组(B)、模型未治疗组(C)、Interceed治疗组(D).A组行假手术,不造模;B组:正常兔子宫内放置Interceed;C和D组均采用机械和感染双重损伤法构建IUA动物模型,C组不进行治疗,D组建模后7d宫腔内放置Interceed.各组于28d各处死4只动物,收集双侧子宫组织,行HE和Masson染色检测子宫内膜腺体计数和纤维化面积.每组剩余的8只兔于动情期刺激阴道排卵,于假孕第7天处死,取子宫组织,扫描电镜观察子宫内膜胞饮突的表达,免疫组化检测子宫内膜中整合素αVβ3蛋白水平.结果 与C组比较,D组子宫内膜腺体表达及纤维化程度均明显改善(P＜0.05),但A、B、D组两两比较差异均无统计学意义.A组子宫内膜表面有大量发育完全的胞饮突;B组胞饮突表达与A组相似;C组胞饮突分布稀少,发育不同步;D组胞饮突分布较C组增多,形态欠规则,发育同步.C组子宫内膜整合素αVβ3蛋白表达明显低于A组(P＜0.05);D组整合素αVβ3蛋白表达较C组明显增高(P＜0.05).结论 Interceed可一定程度逆转IUA的病理改变,增加子宫内膜整合素αVβ3蛋白的表达,并改善胞饮突的表达和发育,从而改善子宫内膜的容受性.
关键词： 宫腔粘连 氧化再生纤维素防粘连膜 胞饮突 整合素αvβ3 -
原位脑胶质瘤99Tcm-Galacto-RGD2microSPECT/CT靶向显像研究
目的 合成99Tcm-半乳糖化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(99Tcm-HYNIC-Galacto-RGD2-tricine-TPPTS,99Tcm-Galacto-RGD2),探讨其用于原位胶质瘤靶向显像的价值.方法 一步法制备99Tcm-Galacto-RGD2,考察其体内外稳定性及体内生物学分布;构建荷人原位脑胶质瘤(U87MG)动物模型,99Tcm-Galacto-RGD2尾静脉注射后行microSPECT/CT显像,勾画肿瘤感兴趣区,定量肿瘤的放射性摄取,病理学检查肿瘤整合素αvβ3表达水平,与放射性摄取进行相关性分析.结果 99Tcm-Galacto-RGD2放射化学纯度为(97.7±0.8)％,体内外稳定性好,能与脑胶质瘤细胞特异性结合,IC50为(18±3)nmoL/L.裸鼠尾静脉注射后血液清除快,脑组织放射性摄取少.静脉注射60 min后,肿瘤放射性摄取明显高于30 min(t =7.13,P＜0.05),lh肿瘤/脑组织放射性摄取比为13.92±3.43.microSPECT-CT显像阻断2 min后,肿瘤放射性摄取显著低于非阻断组(t=11.36,P＜0.05);基于microSPECT-CT显像勾画肿瘤感兴趣区获得的肿瘤体积与肿瘤参考体积具有较好的一致性(95％CI=-11.94％ ～ 11.92％).肿瘤99Tcm-Galacto-RGD2摄取与整合素αvβ3表达水平呈线性相关(R2 =0.896).结论 99Tcm-Galacto-RGD2易于合成,理化性质好,microSPECT-CT融合显像可用于脑胶质瘤病灶的感兴趣区勾画和评价肿瘤组织整合素αvβ3的表达水平.
关键词： 脑胶质瘤 靶区 分子显像 整合素αvβ3 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽 -
99Tcm-3P4-RGD2 microSPECT／CT 显像评价抗新生血管治疗肿瘤疗效价值的实验研究
目的：探讨整合素αvβ3受体靶向microSPECT／CT显像在抗新生血管治疗肿瘤效果中的应用价值。方法构建荷人脑胶质瘤（U87MG）和荷人前列腺癌（PC-3）裸鼠模型。在肿瘤直径为6.0～7.0 mm时，分别给予Avastin治疗，并以生理盐水为对照组，在Avastin给药前1 d、给药后3、5、10和15 d，分别行99 Tcm-3P4-RGD2 microSPECT／CT显像，测定肿瘤体积和放射性百分注射剂量率（％ID和％ID／g）摄取。监测荷瘤鼠一般情况，按照随机数字表法，在每个显像时间点取1只处死，进行病理学检查。结果 U87MG治疗组肿瘤体积在治疗后10 d明显小于U87MG对照组（t＝5.81，P＜0.05），差异有统计学意义，PC-3治疗组与PC-3对照组肿瘤体积差异无统计学意义（P＞0.05）；U87MG治疗组肿瘤对99 Tcm-3P4-RGD2摄取（％ID／g）在治疗前高于PC-3（t＝10.48， P＜0.05），给药后3 d低于U87MG对照组（t＝3.26， P＜0.05），且随着治疗进行逐渐减少，PC-3治疗组和对照组肿瘤摄取（％ID／g）均较低。病理结果显示，U87MG治疗组整合素β3表达降低以新生血管内皮为主，肿瘤细胞呈缓慢降低，U87MG 肿瘤摄取（％ID／g）与整合素β3表达呈线性相关y＝0.4991x－0.2438（R2＝0.8117）。结论 Avastin治疗脑胶质瘤早期表现为新生血管整合素受体β3表达显著降低，99 Tcm-3P4-RGD2 microSPECT／CT显像预期可作为脑胶质瘤抗新生血管治疗疗效早期评价的无创性手段。
-
整合素αvβ3受体拮抗剂药效团模型的研究
为构建可靠的整合素αvβ3受体选择性拮抗剂的药效团模型并根据模型设计小分子活性化合物,选择对αvβ3受体具有较高抑制活性(IC50＜110 nmol·L-1)的4个类型(分别以酰胺、哌嗪、哌啶、γ-戊内酰胺为中间连接基)的30个化合物为训练集,利用Catalyst软件构建整合素αvβ3受体选择性拮抗剂药效团模型,并在数据库中寻找具有活性的母体结构,对母体结构进行修饰和改造及类药性分析得到先导化合物.得到的药效团模型相关系数好、预测能力高,可较准确的预测相关化合物的活性.优化模型含1个芳环中心(RA)、1个可阴离子化部位(NI)和2个疏水作用基(HP),其相关系数与权重值分别为:RMS=0.73,Correl=0.90,Weight=1.17,Config=14.00,所设计的目标化合物预测活性强且结构简单,易于合成,噻唑类为未见报道的一类母体结构化合物.
