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荧光杂交探针实时聚合酶链式反应快速检测甘露聚糖结合凝集素启动子区基因变异方法的建立
目的 建立用荧光杂交探针实时聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测人甘露聚糖结合凝集素(MBL)启动子区基因变异新型的基因分型法--Tm基因分型法.方法 收集30例健康献血员外周抗凝全血,提取基因组DNA.通过Light Cycler实时PCR仪描绘扩增的目标DNA片段的熔解曲线,根据熔解温度(Tm)峰值判定待测标本的基因变异类型.后,用基因测序法检测PCR产物来验证Tm基因分型法的准确性.结果 建立了新型的Tm基因分型法,且测定PCR产物的时间仅180 min,检测结果与测序法完全吻合.结论 Tm基因分型法检测人MBL启动子区基因变异快速、准确,重复性好,具有广泛的临床应用前景.
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补体活化旁路途经在抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎发病机制中作用的研究进展
抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）相关性血管炎（AAV）是一组与环境、遗传及自身免疫等多因素有关的系统性疾病，常导致患者死亡。因 AAV 的肾损害病理检查多显示为寡或无明显免疫复合物沉积，虽然有证据显示 ANCA 参与 AAV 的发病，但免疫复合物及补体系统活化在 AAV发病中的作用长期未被重视。近10余年来，越来越多的病理、动物实验及临床研究证据，提示补体活化旁路途经在 AAV 的发病中发挥关键作用，尤其是 C5a 在 AAV 的病理损害中的作用成为研究热点，对 C5a 及 C5a 受体在 AAV 发病中作用的深入探讨，不仅进一步提示补体旁路途经参与 AAV 的发病，而且为临床治疗 AAV 提供潜在的靶点途经。
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高糖对人脐静脉内皮细胞CD26的表达及MBL补体途径的影响及作用机制
目的 通过观察高糖培养下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的CD26表达变化、甘露聚糖结合凝集素(MBL)补体途径的激活及炎症因子(IL-6和NF-kB)的表达,探讨CD26在糖尿病肾病(DN)慢性炎症发病机制中的作用.方法 体外培养HUVEC,分别设置对照组、高渗组、高糖组,采用免疫组化法及Western Blot检测细胞表面CD26、MBL、C3和膜攻击复合物(MAC)蛋白,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测细胞中CD26、IL-6和NF-kB的mRNA.结果 与对照组及高渗组相比,高糖组CD26、MBL、C3、MAC的蛋白表达量明显升高(P＜0.05),且高精组CD26、IL-6、NF-kB mRNA的相对表达量较其余两组亦明显升高(P＜0.05);而高渗组与对照组相比,各指标蛋白及mRNA表达量均无统计学意义(P＞0.05).结论 高糖作用下的HUVEC CD26蛋白表达量是增高的,其作用机制可能是通过激活MBL介导的甘露糖结合凝集素补体途径,使炎症因子IL-6、NF-kB表达增加,从而引起细胞的炎症反应.
