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三阴性乳腺癌原代细胞的培养及其特异性结合肽的筛选
目的:利用噬菌体肽库筛选技术获得与三阴性乳腺癌原代细胞特异性结合的多肽,为探索三阴性乳腺癌的治疗靶点提供试验支持。方法从三阴性乳腺癌新鲜组织分离、培养原代癌细胞并以其为靶细胞,以hs578bst人正常乳腺细胞为吸附细胞,对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选;随机挑取15株富集后的噬菌体单克隆,ELISA及DAB染色鉴定噬菌体克隆的亲和力及特异性,并对阳性噬菌体单克隆测序。结果经过3轮筛选,噬菌体克隆得以明显富集,随机挑取的15株噬菌体单克隆中有11株为阳性,ELISA及DAB鉴定发现,5号噬菌体(phage-5)对靶细胞亲和力及特异性强,经DNA测序和推导,其多肽序列为PHETLTSFVRRG。结论从噬菌体随机十二肽库中成功筛选出与三阴性乳腺癌原代细胞特异性结合的多肽,该多肽可能作为三阴性乳腺癌靶向治疗药物的载体。
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白藜芦醇对宫颈鳞癌原代细胞增殖及荷瘤小鼠成瘤的影响
目的 研究白藜芦醇对宫颈鳞癌的抗肿瘤功能.方法 分离宫颈鳞癌原代细胞,予以系列浓度的白藜芦醇干预;MTT法检测细胞生长情况,明确适药物浓度;FCM检测细胞周期阻滞情况.构建宫颈鳞癌荷瘤小鼠,予以白藜芦醇灌胃,检测小鼠生长情况及成瘤情况,免疫组化方法检测肿瘤组织中P53和Bcl-2表达情况.结果 白藜芦醇可以抑制宫颈鳞癌原代细胞增殖,使肿瘤原代细胞生长周期阻滞于G1/S期.白藜芦醇可以减缓荷瘤小鼠的体重下降,小鼠的精神状况较好,瘤体生长速度减缓,同期瘤体体积减小.白藜芦醇可以促进瘤体组织的P53表达而抑制Bcl-2表达.结论 白藜芦醇可以有效抑制宫颈鳞癌肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抑制瘤体的生长.白藜芦醇具有一定的抗宫颈鳞癌的特性.
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MTT法测定化疗药物及郑氏植物蛋白对肿瘤原代细胞体外增殖的影响
目的与方法:为了给临床提供肿瘤标本细胞的生长信息并筛选敏感性抗癌药,提高疗效,本文以MTT比色法对100例实体瘤原代细胞进行了8种化疗药物及郑氏植物蛋白对其体外增殖影响作用的测定.结果与结论:结果表明8种临床常用的化疗药物中以顺铂、卡铂、5-氟脲嘧啶、丝裂霉素C的抑瘤敏感性较高,但不同标本瘤细胞的敏感性药谱不一样,提示了肿瘤治疗个体化的必要性.同时显示郑氏植物蛋白对70%的标本瘤细胞有促进增殖的作用.长春新碱、阿霉素和足叶乙甙对个别标本瘤细胞也有促增殖作用.