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Ss-A/Ro核蛋白60 ku亚单位反义核酸逆转胃癌细胞多药耐药
目的:对Ro 60反义核酸在逆转胃癌细胞多药耐药中作用进行研究.方法:克隆Ro 60编码基因,构建Ro 60编码基因的反义真核表达载体,将其转导入SGC7901细胞,应用半定量RT-PCR技术,对基因转染细胞进行鉴定,通过MTT法进行体外药物敏感性分析,借助流式细胞仪检测细胞内蓄积的阿霉素.结果:成功构建了Ro 60反义真核表达载体,应用脂质体介导法将其转导入SGC7901-VCR,Ro 60反义真核表达载体转染SGC7901-VCR细胞后,Ro 60的表达量明显下降,体外药物敏感性实验提示其对长春新碱、丝裂霉素、顺铂、阿霉素的敏感性增加,转染反义表达载体的SGC7901-VCR细胞与未转染和转染空载体的细胞相比,IC50值(mg/L)有显著的下降(7.66±0.45 vs 19.56±0.38,17.48±0.85;0.84±0.03 vs 1.62±0.06,1.80±0.03;0.51±0.03 vs 0.87±0.03,0.88±0.03;0.22±0.01 vs 0.52±0.02,0.43±0.03,均P＜0.01),细胞内阿霉素蓄积有显著的增加(51.94±1.26 mg/L vs 36.27±0.98,37.01±0.91 mg/L,P＜0.01).结论:Ro 60反义真核表达载体转染SGC7901后能够抑制胃癌细胞的多药耐药表型.
关键词： 胃癌 Ss-A/Ro 60 ku亚单位 多药耐药 反义核酸 -
Ss-A/Ro核蛋白60 ku亚单位在胃癌多药耐药中的作用
目的:对Ro 60在胃癌多药耐药中的功能进行研究.方法:克隆Ro 60编码基因,构建Ro 60编码基因的正义真核表达载体,将其转导入SGC7901细胞,应用半定量RT-PCR技术,对基因转染细胞进行鉴定,通过MTT法进行体外药物敏感性分析,借助流式细胞仪检测细胞内蓄积的阿霉素.结果:成功构建了Ro 60正义真核表达载体,应用脂质体介导法将其转导入SGC7901,Ro60真核表达载体转染SGC7901细胞后其表达量明显增加,体外药物敏感性试验提示其对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂、阿霉素的敏感性减低,SGC7901细胞的IC50值(mg/L)与未转染细胞和转染空白载体细胞相比,显著增加(2.28±0.11 vs 0.45±0.04,0.65±0.05;2.89±0.14 vs 0.61±0.21,0.90±0.11;1.92±0.03 vs 0.54±0.03,0.75±0.21;1.41±0.06 vs 0.45±0.03,0.54±0.03;0.28±0.03 vs0.14±0.01,0.14±0.01;均P＜0.01),细胞内阿霉素蓄积显著减少(56.30±2.49 mg/L vs 92.83±3.63,87.38±2.94 mg/L,P＜0.01).结论:Ro 60真核表达载体转染SGC7901细胞后显示了一些多药耐药的特性,提示Ro 60在胃癌多药耐药中发挥了一定的作用.
关键词： 胃癌 Ss-A/Ro 60 ku亚单位 多药耐药 基因转染
