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MAGE-A1,-A4基因在大肠肿瘤中的表达及临床意义
目的:探讨MAGE-A1,-A4基因在大肠肿瘤中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测正常人大肠黏膜38例,大肠腺瘤31例,大肠腺癌组织83例中MAGEA1,-A4蛋白的表达和定位特点.结果:MAGE-A1蛋白定位于胞质,MAGE-A4蛋白定位于胞质及胞核;二者在正常大肠黏膜组织中几乎均不表达,在大肠肿瘤(大肠腺瘤、大肠腺癌)中均有较高水平的表达;但在大肠腺瘤与大肠腺癌中的表达差异均无显著性;二者在大肠腺瘤中的表达与患者的性别、年龄、组织学类型、是否复发及癌变之间差异均无显著性;二者在大肠腺癌中的表达均与患者的性别、年龄、组织学分级、侵袭深度、有无肝转移之间无统计学意义,均与有无淋巴结转移之间有统计学意义(P＜0.01),且均呈正相关关系(PA1＜0.01,rsA1=0.287;PA4＜0.01,rsA4=0.312).在有淋巴结转移的大肠腺癌中,MAGE-A1与A4蛋白表达呈正相关关系(P＜0.05,rs=0.247).结论:MAGE-A1,-A4基因可能在大肠肿瘤的发生、发展(尤其是淋巴结转移)中起作用,有望成为诊断大肠肿瘤及其发生淋巴结转移的分子生物学标记物之一.
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人重组pMAGE-A1/EGFP真核表达质粒的构建与表达
目的特异克隆MAGE-A1开放读码框基因,构建以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的包含MAGE-A1的真核表达载体并转染人PBMC来源DC细胞.方法根据MAGE-A1特征序列设计PCR扩增引物,从Mel-526中扩增MAGE-A1基因开放读码框,并克隆至pIRES-EGFP中,构建人重组pMAGE-Al/EGFP真核表达质粒.利用电转染方法将该重组质粒转入人外周血来源DC细胞并检测MAGE-A1和EGFP的表达情况.结果成功构建真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,转染人PBMC来源DC细胞并检测到MAGE-A1和EGFP表达,两者表达率分别为(8.8±0.9)%和(8.47±0.78)%,无统计学差异.结论成功构建人重组真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,为开展MAGE-A1为基础的免疫治疗提供有利的分子生物学工具.
