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Transwell穿膜实验文献资料
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靶向干预N-WASP功能区对大肠癌细胞侵袭转移能力的影响
目的:探讨干扰N-WASP功能区对大肠癌细胞侵袭转移能力的影响.方法:采用基因克隆方法构建包含N-WASP功能区V片段的重组质粒,转染大肠癌株LOVo.采用Transwcll穿膜实验观察大肠癌细胞侵袭能力的变化:应用Capture-ELISA方法检测大肠癌细胞内吞生物素标记的转铁蛋白(Tfn)的能力改变.脾内注射制备大肠癌肝转移裸鼠模型,在体内进一步观察大肠癌细胞转移能力改变.结果:成功构建了含有N-WASP的V结构区域的重组质粒,并转染大肠癌株LoVo获得稳定表达.实验组表达V片段的大肠癌细胞穿膜的细胞数为42.15±7.35,而对照表达空载体的大肠癌细胞穿膜细胞数为85.25±6.16,未转染的大肠癌细胞穿膜细胞数为84.35±7.99,与实验组相比具有显著差异(P<0.05).表达V片段的大肠癌细胞内吞转铁蛋白的数量较对照组明显减少,内吞作用能力减弱.动物实验显示表达V片段的大肠癌细胞肝转移发生数为2/12,较对照组(10/12)和未转染组(10/12)明显减少.结论:靶向干预N-WASP与微丝蛋白结合的功能区域的新方法能够抑制人大肠癌细胞的侵袭和转移能力.
关键词： N-WASP 大肠癌 转移 肌动蛋白单体 Transwell穿膜实验
