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鸟苷酸环化酶C基因沉默对人胃癌裸鼠皮下种植瘤的影响
目的:探讨鸟苷酸环化酶C(GC-C)基因沉默对人胃癌裸鼠皮下种植瘤的影响及其机制.方法:将SGC-7901细胞(SGC-7901组)、空质粒转染的细胞(PRNA组)、GC-C基因稳定沉默的细胞(GC-C-shRNA组)悬液先在裸鼠皮下接种成瘤,再取瘤组织块分别接种到裸鼠皮下,建立3种胃癌裸鼠皮下种植瘤模型.观察裸鼠一般情况、肿瘤的成瘤率、生长速度,描绘肿瘤的生长曲线,计算肿瘤的抑瘤率；采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR),Western blot和免疫组织化学法检测GC-C和趋化因子受体4(CXCR4)在各组移植瘤组织中的表达.结果:与SGC-7901组和PRNA组比较,GC-C-shRNA组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢、体积明显变小(抑制率分别为33.7％、33.2％),肿瘤异型性、坏死程度明显降低,差异具有统计学意义(均P＜0.05),且移植瘤组织中GC-C和CXCR4 mRNA和蛋白均明显下调(GC-C mRNA:7.47±1.70 vs 11.18±0.60,11.28±0.85; GC-C蛋白:0.52±0.15 vs 1.04±0.19,1.03±0.24; CXCR4蛋白:0.67±0.13 vs 1.02±0.21,1.03±0.23,均P＜0.05).结论:GC-C基因稳定沉默在体内能保持稳定,且能抑制裸鼠移植瘤生长,该过程可能与CXCR4下调有关.
关键词： 鸟苷酸环化酶C基因沉默 裸鼠 胃癌 皮下种植瘤 趋化因子受体4 -
HCT116细胞意外皮下转移成瘤的初步研究
目的 探讨结肠癌细胞株HCT116皮下种植瘤的组织细胞再行尾静脉注射成瘤的可行性.方法 将30只裸鼠随机分为A、B、C组,每组10只.A组尾静脉注射生理盐水,B组尾静脉注射HCT116细胞悬液0.1 ml,C组尾静脉注射HCT116皮下种植瘤组织悬液0.1 ml.将HCT116细胞皮下种植瘤组织悬液离心分为细胞与组织悬液.另取20只裸鼠随机分为细胞组和悬液组(n=10),尾静脉注射细胞或悬液.观察各组裸鼠成瘤及转移情况.结果 A组无肿瘤形成.B组裸鼠尾静脉注射HCT116细胞成功9只,8只形成肺部转移瘤,其中2只同时形成肝部转移瘤.C组裸鼠尾静脉注射HCT116皮下种植瘤组织悬液成功9只,初期有4只尾根部出现肿块,30天后5只裸鼠的骶部、颈部出现肿瘤(严重者有1只同时胸窝皮下也形成肿瘤),50天后形成肺部转移瘤,死亡;未形成皮下种植瘤的4只裸鼠中有3只形成肺部转移瘤后死亡.细胞组裸鼠注射离心后的细胞成功8只,仅1只形成肺部转移瘤.悬液组裸鼠注射离心后组织悬液无肿瘤形成.结论 HCT116皮下种植瘤组织悬液尾静脉注射后,能定向地从血管迁移至裸鼠皮下组织成瘤.
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多不饱和脂肪酸n-6／n-3对子宫内膜癌小鼠皮下种植瘤中AKT、mTOR表达的影响
目的：研究不同比例n-6/n-3多不饱和脂肪酸（ PUFAs）对人子宫内膜癌瘤组织中AKT、mTOR表达的影响。方法建立人子宫内膜癌小鼠皮下种植瘤模型，40只实验BALB/C模型小鼠随机分为A组（ n-6 PU-FAs）、B组（10∶1 n-6/n-3 PUFAs）、C组（对照）、D组（1∶1 n-6/n-3 PUFAs）、E组（n-3 PUFAs），每组8只。A、B、D、E组分别灌胃给予不同比例 PUFAs，C组给予等量生理盐水。6周后处死小鼠，切取皮下种植瘤组织，苏木精-伊红染色镜下定位观察肿瘤组织形态，免疫组化SP法检测种植瘤组织中AKT、mTOR蛋白表达， RT-PCR法检测各组种植瘤组织中AKT、mTOR的mRNA表达。结果苏木精-伊红染色结果确认皮下种植瘤模型建立成功；免疫组化SP法和RT-PCR结果显示n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PuFAs 组中AKT、mTOR的蛋白和mRNA的表达增加，与对照组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）；n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3 PUFAs 组中的中AKT、mTOR的蛋白和mRNA表达下降，与对照组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论不同比例的 n-6/n-3 PUFAs对人子宫内膜癌的作用机制可能是通过PI3k/AKT/mTOR信号通路调节 AKT、mTOR的表达而起作用的。
