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芹菜素对肝癌细胞生长及基因表达的影响
目的:探讨芹菜素(apigenin)对Huh-7肝癌细胞生长及基因表达的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测芹菜素对Huh-7细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响:通过动物模型观察芹菜素对裸鼠人肝癌Huh-7移植瘤肿瘤质量及体积的影响;采用基因芯片技术检测芹菜素作用前后Huh-7细胞全基因组序列,分析其基因表达差异;采用qRT-PCR、Westem blot技术验证基因芯片结果.结果:与对照组相比,不同浓度的芹菜素(5、10、20 mg/L)处理Huh-7细胞后,芹菜素对Huh-7细胞的生长有显著的抑制作用(IC50=10.5 mg/L±0.3 mg/L).细胞周期阻滞于G2/M期、降低G0-G1期细胞的比例、并促进细胞凋亡和抑制移植瘤的生长.全基因芯片发现芹菜素可改变Huh-7细胞中1 764个功能性基因的表达.在这些差异表达的基因中,大多数与核酸结合、转运、接触和酶调节活性、转录调节、细胞骨架结构和黏附、信号转导、代谢、凋亡以及免疫反应等有关.其中重要的发现是芹菜素显著下调IL-4R和USP18基因表达,qRT-PCR、Westem blot检测结果与芯片结果相符.结论:芹菜素可能通过阻滞细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡从而抑制体内体外Huh-7细胞的生长,并影响多种基因的表达.
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USP18及其在病毒性肝炎等疾病中的研究进展
泛素特异性蛋白酶18(USP18)初在1999年被克隆,其编码的蛋白相对分子质量为43×103,因此也被称作泛素特异性蛋白酶43(UBP43).USP18初是Liu等[1]在分析AML1-ETO融合基因敲入小鼠的基因差异表达时被发现并克隆的.近年研究发现USP18在干扰素(IFN)治疗多种疾病的应答不佳组中高表达,USP18可能在其中扮演了重要角色.本文就近年来USP18的结构、信号转导及在病毒性肝炎等疾病中的生物学功能等研究进展综述如下.
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泛素化特异性蛋白酶18在结直肠癌中的表达及其临床意义
目的 检测USP18在结直肠癌新鲜组织及石蜡组织样本中的表达情况,分析USP18的表达与结直肠癌的恶性进程的关系及其临床应用价值.方法 时荧光定量PCR法及免疫印迹实验检测USP18在40例结直肠癌新鲜组织及癌旁正常组织中mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色检测USP18在114例结直肠癌石蜡标本中的蛋白表达情况,并分析其与结直肠癌的临床病理相关指标的关系.结果 在结直肠癌组织中USP18 mRNA及蛋白表达水平显著高于正常结直肠黏膜组织;此外,USP18的表达水平与结直肠癌分化程度、淋巴结转移以及远处转移呈负相关关系(P<0.05).结论 USP18的表达在结直肠癌组织中明显上调,其高表达与结直肠癌进展密切相关,可作为预测结直肠癌进展和转移的分子标记物之一.
