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EGCG对阿霉素诱导的胃癌细胞MKN28衰老的影响
目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)]对阿霉素诱导的胃癌细胞MKN28衰老的影响.方法:Western blot检测EGCG对EZH2蛋白表达的影响；阿霉素诱导经EGCG处理的MKN28细胞衰老,衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色检测各组细胞衰老情况,激光共聚焦显微镜检测各组细胞核中衰老相关异染色质灶(senescence-associated heterochromatic foci,SAHF)的形成；噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞术检测EGCG对MKN28细胞生长和周期的影响,并比较在阿霉素诱导下各组细胞的相应变化.结果:EGCG可明显抑制EZH2蛋白表达,经EGCG处理的MKN28细胞在阿霉素诱导下SA-β-gal染色阳性率和SAHF形成比例明显高于阿霉素组和EGCG组,分别为72.16％±4.03％、34.42％±7.06％、15.40％±1.70％和86.44％±4.33％、47.73％±3.03％、80.28％±1.24％;与空白对照组相比,经不同浓度EGCG处理的MKN28细胞其周期G0/G1比例以及生长抑制率会随浓度的增高而增大(P＜0.05),在阿霉素的诱导下此趋势更为明显.结论:EGCG可通过抑制EZH2表达来促进阿霉素对MKN28细胞的衰老诱导作用.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 EZH2 细胞衰老 MKN28细胞 阿霉素 -
胃癌细胞MKN28(p53-/-)对NSAIDs诱导凋亡敏感性的研究
目的1.明确非甾体消炎药(NSAIDs)能否诱导p53基因突变的胃癌细胞MKN28凋亡.2.明确NSAIDs对MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2、bax表达的调控.方法1.通过MTT比色法检测NSAIDs对细胞生长活力的影响.2.应用丫啶橙染色、Annexin-Ⅴ/PI双染色、共聚焦显微镜、流式细胞术检测细胞凋亡.3.应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)方法检测bcl-2、bax基因水平的改变.结果1.NSAIDs药物吲哚美辛(Indo)和阿斯匹林(Asp)对胃癌细胞株MKN28均有生长抑制作用,且呈时间/浓度依赖性增强.2.在Indo 800μmol/L、Asp8 mmol/L作用48～96 h后,MKN28细胞凋亡数量稍有增多,但不具有统计学意义.3.随着药物作用时间的延长,MKN28细胞的bcl-2基因mRNA表达逐渐减弱,bax基因表达逐渐增强.结论1.NSAIDs可抑制MKN28胃癌细胞株增殖.2.NSAIDs不能诱导p53基因突变的MKN28胃癌细胞株发生显著的凋亡,提示p53基因突变可能阻断了NSAIDs诱导的细胞凋亡.3.NSAIDs可使MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2和bax的水平呈现促进凋亡倾向的改变.
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叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28的抑制作用
目的 体外实验初步探讨叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28生长的影响.方法 通过集落形成试验观察叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28集落形成的影响;将不同浓度叶下珠醇提物作用于MKN28细胞,倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定叶下珠醇提物对MKN28细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测叶下珠醇提物作用48 h后MKN28细胞的凋亡情况.结果 在2mg/mL和1 mg/mL2个浓度下叶下珠醇提物对MKN28胃癌细胞集落形成具有不同程度的抑制作用,浓度大者.抑制作用更强.MTT法测定细胞增殖抑制率结果表明,叶下珠醇提物对MKN28细胞增殖有抑制作用,其抑制效应具有浓度和时间依赖性.流式细胞检测提示叶下珠醇提物能诱导人胃癌细胞MKN28发生凋亡.结论 叶下珠醇提物能抑制人胃癌细胞MKN28增殖,凋亡是其作用机制之一.
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肿瘤坏死因子诱导凋亡配体诱导胃癌细胞株MKN28细胞凋亡及机制探讨
目的 探讨肿瘤坏死因子诱导凋亡配体(TRAIL)对胃癌细胞株MKN28细胞体外诱导凋亡的作用及机制.方法 采用MTT法培养、分析细胞增殖抑制率及细胞存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期,AO/EB染色观察凋亡细胞.结果 TRAIL可明显抑制MKN28细胞的增殖,并可诱导细胞的凋亡.结论 TRAIL可诱导MKN28细胞株的凋亡,并呈剂量依赖性.
关键词： 肿瘤坏死因子诱导凋亡配体 凋亡 胃癌细胞株 MKN28细胞 -
Hedgehog信号通路在胃癌细胞中活化并通过GLI1促进MKN28细胞增殖
目的 研究Hedgehog(HH)信号通路在胃癌细胞中的活化形式及其转录因子GLI1对胃癌细胞增殖和体外成瘤能力的影响.方法 通过反转录PCR分析HH通路相关组成分子在7株细胞系中的表达情况,化学合成针对HH信号通路转录因子GLI1的siRNA并转染胃癌MKN28细胞.通过CCK8法和体外克隆形成实验,观察GLI1 siRNA转染胃癌MKN28细胞后的细胞增殖能力和克隆形成能力的变化.结果 在不同胃癌细胞株中,HH信号通路各相关基因的表达情况存在差异,SHH在6株胃癌细胞系中均表达上调,PTCH在KATOⅢ细胞系、SUFU在MKN28和KATOⅢ表达下调.转染GLI1 siRNA后,MKN28细胞中GLI1 mRNA表达受到明显抑制:经GLI1 siRNA作用的MKN28细胞生长明显缓于阴性对照和未处理组(P=0.014),克隆形成数目及体外克隆形成能力降低(P<0.001).结论 HH信号通路在胃癌细胞系中被普遍激活,HH信号通路活化后可通过转录因子GLI1促进MKN28细胞增殖.
关键词： 胃肿瘤 Hedgehog信号通路 MKN28细胞 RNA干扰 -
叶下珠醇提物对人胃癌细胞的抑制作用
目的 体外实验初步探索叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28增殖、迁移及迁移能力的影响.方法 不同质量浓度的叶下珠醇提物作用于人胃癌细胞MKN28,MTT法测定其对MKN28的增殖抑制率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 MTT法结果显示叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28的增殖有明显抑制作用,并且呈现质量浓度和时间依赖性;细胞划痕实验结果显示叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28迁移能力有明显抑制作用:Transwell小室侵袭实验结果显示叶下珠醇提物对人胃癌细胞MKN28侵袭能力有明显抑制作用.结论 叶下珠醇提物能有效抑制人胃癌细胞MKN28的增殖、侵袭及迁移.
