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自噬相关基因在小鼠急性胰腺炎中的表达及其意义
目的 检测小鼠急性胰腺炎(AP)胰腺组织中自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)的表达,并探讨其意义.方法 20只小鼠随机分为AP组和对照组.采用腹腔内注射20％L-精氨酸溶液(4 g/kg体重)2次、间隔1h的方法制备AP模型;对照组腹腔注射等容积生理盐水.24 h后观察两组小鼠胰腺组织的病理改变,采用蛋白质印迹法检测小鼠胰腺组织LC3、p62和LAMP-2蛋白的表达.结果 对照组小鼠胰腺组织未见明显病理改变;AP组小鼠胰腺腺泡水肿,腺泡结构破坏、消失,叶间隔、小叶间隔及腺泡间隔显著增宽,腺泡细胞呈不同程度变性坏死.AP组胰腺组织水肿、出血、坏死和炎症评分分别为(3.13±0.50)、(2.83 ±0.32)、(3.25±0.46)、(3.16±0.47)分,对照组的4项评分均为0分,差异均有统计学意义(P值均＜0.01).AP组胰腺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及p62、LAMP-2蛋白表达量分别为1.16 ±0.08、0.94 ±0.04、0.35 ±0.04;对照组分别为0.24±0.02、0.34±0.03、0.95±0.03.AP组胰腺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、p62蛋白表达显著高于对照组,LAMP-2蛋白表达显著低于对照组,差异均有统计学意义(P值均＜0.01).结论 腹腔注射L-精氨酸诱导AP后小鼠胰腺组织出现自噬受损,这可能与AP时胰腺组织LAMP-2蛋白表达下降有关.
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微管相关蛋白轻链3和溶酶体相关膜蛋白2基因表达及其临床意义
目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中巨自噬标志性分子微管相关蛋白轻链3 (LC3)和分子伴侣介导的自噬(CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因表达,探讨其与SLE发病的关系.方法 纳入2017年11月至2018年3月在川北医学院附属医院风湿免疫科诊治的88例SLE患者(SLE),采用密度梯度离心法分离外周血单个核白细胞(PBMCs);采用实时荧光定量PCR法测定患者PBMCs中LC3和LAMP-2在mRNA水平的表达量;采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分判断疾病活动度,分析LC3和LAMP-2表达与SLE患者临床特点及病情活动度的相关性.同期纳入年龄匹配的40例健康体检者作为正常对照组.结果 正常对照组受检者PBMCs中LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA相对表达量分别为1.021±0.551和1.015±0.667,SLE组患者分别为0.783±0.435和2.402±2.233,组间比较差异均有统计学意义(P=0.020、0.000).SLE患者PBMCs中LAMP-2 mRNA表达水平与SLEDAI呈明显正相关(rs=0.312,P=0.003),LC3mRNA表达水平与SLEDAI无明显相关性(rs=-0.175,P=0.103).LAMP-2 mRNA表达量升高患者肾脏损害发生率明显高于非升高患者(40.7％ vs.16.3％),LC3 mRNA表达量降低患者的血液系统受累率明显高于无LC3 mRNA表达降低患者(65.2％vs.32.3％),差异均有统计学意义(P=0.013、0.006).不同LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA表达水平组实验室检查指标和治疗效果的患者分布差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 SLE患者LC3 mRNA表达水平下调,LAMP-2 mRNA表达水平上调,提示SLE患者存在巨自噬功能不足.SLE患者CMA功能增强,并且与肾脏和血液系统受累有关.
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溶酶体相关膜蛋白2抗体在抗中性粒细胞胞质抗体相关性小血管炎患者血清中的表达及临床意义
目的 检测溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)抗体在ANCA相关性小血管炎(AASV)患者血清中的表达并探讨其临床意义.方法 选取20例AASV患者血清作为试验组,20名同期性别、年龄相匹配的健康体检者血清作为对照组.采用ELISA检测所有研究对象血清中LAMP-2抗体水平,对LAMP-2抗体水平与AASV患者ESR、CRP、伯明翰血管炎活动积分(BVAS)、血红蛋白、白蛋白等指标进行相关分析.2组间LAMP-2抗体水平比较采用t检验,LAPM-2抗体水平和ESR、CRP相关性检验采用Spearman相关分析,LAMP-2抗体水平和BVAS积分、血红蛋白、白蛋白相关性检验采用Pearson相关分析.结果 ①AASV患者血清中LAMP-2抗体水平[(3714±1446) pg/ml]高于对照组[(174±43) pg/ml](t=10.94,P＜0.05),血红蛋白[(99±30) g/L]、白蛋白[(27±5) g/L]明显低于对照组[(138±14)g/L,(44±3)g/L](t=5.27,t=13.04,P均＜0.05).②AASV患者血清中LAMP-2抗体水平与BVAS积分呈正相关(r=0.6699,P＜0.05),与ESR、CRP、血红蛋白、白蛋白无相关性(P＞0.05).结论 ①LAMP-2抗体可能参与了AASV的发病过程;②LAMP-2抗体能反映AASV疾病活动性,可作为血管炎活动的血清学临床监测指标.
关键词： 抗体 溶酶体相关膜蛋白2 ANCA相关性小血管炎 -
sFlt-1与LAMP-2在ANCA相关性肾炎患者血清中的表达水平及其相关性分析
目的 探究可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(sFlt-1)与溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)在抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性肾炎患者血清中的表达水平及其相关性.方法 选择2016年10月至2017年10月间90例ANCA相关性肾炎患者作为研究组,根据24h尿蛋白水平分为低蛋白尿组和高蛋白尿组.选择同期单纯慢性肾小球肾炎患者共90例作为对照组以及50例健康者作为健康组.分别比较不同组间的血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平,并分别研究sFlt-1和LAMP-2水平与ANCA相关性肾炎以及24h尿蛋白的相关性.结果 研究组血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平均显著高于对照组和健康组(P<0.05).将尿液和血清中的sFlt-1和LAMP-2纳入Logistic多元回归分析,结果显示血清LAMP-2以及尿液LAMP-2是ANCA相关性肾炎的高危因素(P<0.05).在ANCA相关性肾炎患者(研究组)中,高蛋白尿组患者血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平均显著高于低蛋白尿组(P<0.05),并且均显著高于健康组(P<0.05).血清和尿液中sFlt-1和LAMP-2与ANCA相关性肾炎患者24h尿蛋白呈现显著的正相关性(P<0.05).结论 慢性肾小球肾炎患者血清和尿液中sFlt-1和LAMP-2水平显著升高,AN-CA相关性肾炎患者LAMP-2水平显著高于慢性肾小球肾炎患者,并且血清和尿液中LAMP-2是ANCA相关性肾炎的高危因素.
