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  • 1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2真核表达系统的构建和鉴定

    作者:刘煜;朱虎;曾丽玲;陈家伟;杨金奎;钟耀华;王若宁;陈小章

    目的构建能高效表达自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2(IA-2)的真核表达载体作为预防发生1型糖尿病(T1DM)的基因疫苗. 方法利用基因工程技术构建重组pEGFP/IA-2真核表达系统,并且转染、筛选稳定高表达IA-2的RIN5F胰岛细胞株,用免疫印迹法并在荧光显微镜下鉴定其表达,利用共培养体系检测IA-2刺激淋巴细胞增殖率. 结果双酶切结果表明成功构建了重组pEGFP/IA-2真核表达系统,免疫印迹法证实可在RIN5F细胞内高表达IA-2.并且该表达的IA-2可显著促进NOD小鼠淋巴细胞增殖反应(P<0.05). 结论成功构建的IA-2真核表达系统对于T1DM基因疫苗预防策略和对于IA-2生理功能的研究都具有重要的意义.

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