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酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究
目的：探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠 VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将 VSMCs 按随机数字表法分为正常对照组、高磷+ pH7.4、高磷+ pH7.1和高磷+ pH6.8(在高磷培养基的基础上调整 pH 值为6.8、7.1和7.4三个亚组)。刺激4 d 后,采用 RT-PCR 检测 L 型钙通道(LTCC)α1C、β2和β3亚基, Runt 相关转录因子2(Runx2)及 Smad1基因的表达；应用钙离子探针 Fluo-3/ AM 检测 VSMCs 胞外钙离子内流的效应变化。刺激14 d 后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组钙含量、ALP 活性、Runx2和 Smad1mRNA 的表达明显增高(88.26±6.43比22.39±3.19、94.33±3.08比20.39±1.18、0.37±0.02比0.01±0.00、0.65±0.05比0.07±0.01,均为 P ﹤0.05)；与高磷+ pH7.4组比较,高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的钙含量、ALP 活性、Runx2和 Smad1mRNA 的表达均降低(69.95±1.72和50.74±3.29、51.11±2.05和34.62±1.13、0.25±0.02和0.09±0.01、0.44±0.04和0.23±0.01,均为 P ﹤0.05)。与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组的 LTCCβ3亚基 mRNA 表达水平增加(0.80±0.01比0.34±0.13, P ﹤0.01),高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的 LTCCβ3亚基 mRNA 表达水平均下降(0.64±0.11和0.43±0.01,均为 P ﹤0.01)。各组之间 LTCCα1C 和β2亚基 mRNA 的表达差异无统计学意义(P =0.08和0.74)。与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组的 VSMCs 胞内钙离子浓度增加(438.33±7.50比149.54±20.89,P ﹤0.05)；高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的 VSMCs 胞内钙离子浓度均降低(329.66±16.64和234.00±17.43,均为 P ﹤0.01)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs 钙化,其可能是通过抑制 LTCC β3亚基表达,降低 VSMCs 钙离子内流,阻滞 VSMCs 发生表型转化来实现的。
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钩端螺旋体L型感染与钩端螺旋体脑动脉炎的关系
目的探讨钩端螺旋体 L 型感染与钩体脑动脉炎发病的可能关系.方法对74例钩体脑动脉炎患者血液及脑脊液进行钩端螺旋体普通培养、L 型培养,患者血清做显微镜凝集试验,用免疫荧光染色确定钩体 L 型及其原菌型.结果钩体脑动脉炎患者钩体L型培养、普通培养、钩体 MAT的阳性率分别为:47.3%、18.9%、70.3%.分离出的钩体 L 型呈多形性.结论钩端螺旋体 L 型感染与钩体脑动脉炎的发病关系密切.
