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非小细胞肺癌患者外周血中多参数检测对诊断微转移的作用
目的探讨细胞角蛋白19(CK19)、肺组织特异性X蛋白(LunX)、上皮癌相关基因(KS1/4)在非小细胞肺癌(NSCLC)外周血中的表达差异与NSCLC微转移的关系.方法选择经过9个月随访的52例患者,分为转移组和无转移组,并以胸部良性病变手术患者20例作为对照组.提取外周血标本的总RNA,反转录为cDNA,采用荧光定量实时聚合酶链反应(PCR)检测其中CK19mRNA、LunXmRNA、KS1/4mRNA的表达水平.结果总RNA通过紫外分光光度仪检测RNA纯度,OD268/280值在1.612 ～2.1之间,RNA浓度在100～ 1410μg/ml之间.经过随访,52例患者中发生转移或复发共18例,转移复发率34.6％ (18/52).其中转移组外周血中CK19mRNA、LunXmRNA明显高于无转移组及对照组(P＜0.05),但KS1/4 mRNA在三组患者外周血的表达差异无统计学意义(P＞0.05);转移组的外周血中LunXmRNA的表达量高,KS1/4 mRNA其次,CK19mRNA表达量低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论CK19、LunX可以作为预测NSCLC转移或复发的指标,辅助诊断NSCLC微转移,其中LunX的敏感性略显优势.
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检测非小细胞肺癌患者淋巴结中CK19、LunX、KS1/4的表达对诊断微转移的意义
目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结中细胞角蛋白19 (CK19)、肺组织特异性X蛋白(LunX)、上皮癌相关基因(KS1/4)的表达与NSCLC微转移的关系.方法 选择经过9个月随访的52例NSCLC患者,分为转移组和无转移组.提取淋巴结标本的总RNA,反转录为cDNA,采用荧光定量实时PCR检测其中CK19、LunX、KS1/4的mRNA表达水平.结果 总RNA通过紫外线分光光度仪检测RNA纯度,OD260/280值为1.650～2.1,RNA浓度为560～1420 mg/L.经过随访,52例研究病例中发生转移或复发共18例,转移复发率为34.6％.其中转移组淋巴结中CK19、LunX、KS1/4的mRNA表达均高于无转移组(P值均＜0.05).结论 CK19、LunX、KS1/4可以作为预测NSCLC转移或复发的指标,辅助诊断NSCLC微转移.
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LUNX与VEGFA基因联合检测对Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移的临床意义
目的 探讨人类肺组织特异性X蛋白(LUNX)与血管内皮生长因子A(VEGFA)基因联合检测对Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结微转移的临床意义.方法 选择入院手术的39例Ⅰ期NSCLC患者(淋巴结78枚)为实验组,同期入院的10例肺良性肿瘤患者(淋巴结19枚)为对照组,采用RT-PCR检测两组患者淋巴结LUNX、VEGFA mRNA表达,并分析其表达与NSCLC患者临床特征的相关性.结果 实验组淋巴结LUNX、VEGFA mRNA阳性表达率为23.08％、19.23％,分别高于对照组的5.26％、0.00％(均P＜0.05).与常规病理检测比较,RT-PCR检测LUNX、VEGFA mRNA表达诊断NSCLC淋巴结微转移阳性率均较高(均P＜0.05).Ⅰ期NSCLC患者淋巴结LUNX、VEGFA mRNA表达水平与肺癌病理类型、细胞分化程度、TNM分期均呈正相关(r=0.661、0.552和0.527,均P＜0.05),与患者性别、年龄、吸烟史等未见相关(r=0.212、0.236和0.183,均P＞0.05).结论 LUNX、VEGF基因联合检测可辅助常规病理检测判断Ⅰ期NSCLC淋巴结微转移,为临床诊治提供一定的帮助.
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肺组织特异性X蛋白在非小细胞肺癌中的表达及与肺癌微转移生物作用的关系
目的：研究肺组织特异性X蛋白（ LunX）在非小细胞肺癌（ NSCLC）患者中的表达，探讨LunX与NSCLC患者肿瘤微转移的关系。方法收集54例NSCLC患者，转移组（ n＝34）为NSCLC并肺门纵隔淋巴结转移，非转移组（n＝20）为NSCLC无肺门纵隔淋巴结转移患者，另选取同期胸部良性病变行手术患者21例为对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应法（ FQ－PCR）、蛋白印记法和免疫组织化法检测54例NSCLC患者癌组织、癌旁组织及淋巴结中LunX基因及蛋白的表达。结果 FQ－PCR结果显示转移组患者癌组织、癌旁组织及癌转移淋巴结中LunX mRNA表达量均明显高于非转移组（ P＜0.01）；蛋白印记结果显示转移组癌组织及癌转移淋巴结中LunX蛋白相对表达量较非转移组明显上调（ P＜0.01）；免疫组织化学结果显示转移组癌组织及癌转移淋巴结LunX蛋白表达量明显高于非转移组（P＜0.01），两组癌旁组织在蛋白印迹及免疫组化表达上差异无统计学意义，而对照组肺组织及肺门纵隔淋巴结无LunX mRNA及蛋白表达。结论 LunX在NSCLC患者癌组织、癌旁组织及淋巴结中均有表达，其表达的上调可能参与NSCLC患者肿瘤微转移的发生发展过程。
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三种基因在非小细胞肺癌外周血有核细胞中阳性表达的意义
目的 为确定外周血有核细胞中LUNX基因、CK19基因和S100A4基因是检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标提供实验依据.方法 术前抽取外周血,通过荧光定量PCR (PCR)检测其肺组织特异性蛋白(LUNX)、细胞角蛋白19(CK19)和钙结合蛋白A4(S100A4)的表达情况,并对其进行半定量分析.结果 肺癌患者外周血标本中LUNX mRNA、CK19 mRNA和S100A4mRNA的阳性表达率分别为66.7％、62.5％和56.3％,明显高于肺良性疾病患者和健康志愿者(P＜0.05),这三种基因的表达与组织学类型、肿瘤位置有关,在腺癌中的阳性表达高于鳞癌,在周围型肺癌中的表达高于中央型肺癌.3种基因的表达与肿瘤的大小无明确关系.随着肿瘤分期的增高和淋巴结转移的发生,三种基因的表达有明显增高的趋势.结论 LUNX mRNA和CK19 mRNA、S100A4mRNA可作为检测肺癌微转移的分子标志物.
