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微小RNA27a在利拉鲁肽改善心肌细胞凋亡中的作用
目的 探讨微小RNA-27a(miR-27a)在利拉鲁肽改善心肌细胞凋亡中的作用.方法 大鼠H9c2心肌细胞在不同培养条件下分为低糖培养组、高糖培养组、miR-27a过表达组、miR-27a抑制组、阴性miR-27a过表达组、阴性miR-27a抑制组、脂质体lipo2000组、高渗组、利拉鲁肽干预组、利拉鲁肽干预miR-27a过表达组、利拉鲁肽干预阴性miR-27a过表达组.采用实时定量聚合酶链反应检测及比较低糖、高糖培养和利拉鲁肽干预后H9c2心肌细胞miR-27a的表达;原位末端转移酶标记技术观察miR-27a模拟物或抑制剂转染心肌细胞后及利拉鲁肽干预前、后细胞凋亡变化并计算、比较细胞凋亡指数(AI),Western blotting法检测B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、细胞凋亡抑制蛋白1(cIAP-1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)、凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)表达变化.采用单因素方差分析及t检验分析数据.结果 与低糖组相比,高糖组H9c2心肌细胞miR-27a表达增加(35.8±4.9比1.0±0.0,t=12.199,P<0.05).与高糖组相比,miR-27a过表达组心肌细胞AI显著增加[78.5±6.6比22.9±1.7,小显著性差异法(LSD法),P<0.05],同时Bcl-2、cIAP-1表达降低(LSD法,均P<0.05),Bax、caspase-3、Apaf-1表达增高(LSD法,均P<0.05).与高糖组相比,miR-27a抑制组H9c2心肌细胞AI显著降低(2.6±0.4比22.9±1.7,LSD法,P<0.05),同时Bcl-2、cIAP-1表达增加(LSD法,均P<0.05),Bax、caspase-3、Apaf-1表达降低(LSD法,均P<0.05).与高糖组相比,利拉鲁肽干预组心肌细胞miR-27a表达明显被抑制(7.9±0.2比35.8±4.9,t=-9.785,P<0.05),AI显著降低(4.9±0.1比22.9±1.7,LSD法,P<0.05).与利拉鲁肽组相比,利拉鲁肽干预miR-27a过表达组心肌细胞AI显著增高(61.3±5.1比4.9±0.1,LSD法,P<0.05).结论 利拉鲁肽可改善高糖状态下心肌细胞凋亡,可能与其显著抑制心肌细胞miR-27a表达有关.
