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  • chOPG RNA探针的制备及其在鸡骨组织的原位杂交

    作者:张风荣;侯加法

    目的 制备地高辛标记的禽OPG cRNA探针.方法 将目的片段重组到T载体中,构建chOPG/pGM-Teasy重组质粒,EcORI酶切鉴定并测序验证.分别用SalI和NcoI进行酶切得到线性化DNA模板,用Sp6和T7 RNA聚合酶体外转录合成地高辛标记的正反义RNA探针.运用斑点杂交的方法检验探针的标记效率,并通过骨组织原位杂交反应进一步检测探针标记是否制备成功.结果 成功构建出chOPG/pGM-Teasy质粒.结论 获得的高效正、反义chOPGRNA探针,为进一步研究OPG在蛋鸡各组织中的表达奠定基础.

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