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神经营养素-3对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2和Bax表达的影响
目的:观察神经营养素-3(NT-3)对大鼠急性脊髓损伤后B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)表达的影响,探讨NT-3对脊髓损伤的作用及其可能的分子机制.方法:105只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)和NT-3治疗组(C组),每组35只.B、C组用改良Allen's法以30g·cm致伤大鼠T8脊髓制作损伤模型,C组经蛛网膜下腔导管于术后即刻、4h、8h、12h、24h、3d、7d注入NT-3 20μl(含NT-3 200ng),B组在相同时间点给予等量生理盐水;A组打开椎板后蛛网膜下腔置管,不损伤脊髓,不给药.术后24h、3d、7d、14d对大鼠进行脊髓运动功能(BBB)评分.于术后4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d处死动物(n=5),取T8节段脊髓,甲苯胺蓝(Nissl)染色观察脊髓前角运动神经元变化情况,用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax在脊髓前角运动神经元中的表达变化情况.结果:各时间点C组和B组大鼠BBB评分均显著低于A组(P＜0.01),但C组显著高于B组(P＜0.05或0.01).Nissl染色C组大鼠脊髓损伤区较B组出血少、残存神经元多,A组正常.各时间点C组和B组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bax阳性细胞平均光密度(AOD)值均显著高于A组(P＜0.01),但C组显著低于B组(P＜0.05或0.01);各时间点C组和B组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bcl-2阳性细胞AOD值均显著低于A组(P＜0.01),但C组显著高于B组(P＜0.05或0.01).结论:NT-3可能通过抑制Bax表达,提高Bcl-2表达,抑制脊髓损伤后神经元凋亡,从而保护损伤的脊髓组织,这可能是NT-3对脊髓损伤具有保护作用的机制之一.
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银杏叶提取物对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的作用及其机制
目的:观察银杏叶提取物(EGb)对大鼠实验性脊髓损伤后组织结构及运动功能恢复的作用,探讨其对急性脊髓损伤的作用机制.方法:120只SD雄性大鼠,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)、甲基强的松龙(MP)治疗组(C组)和EGb治疗组(D组),每组30只.B、C、D组用Allen's法以50g·cm致伤大鼠T9脊髓制作损伤模型,B组为单纯脊髓损伤,不给药;C组为脊髓损伤后30min内,由腹腔注入MP 30mg/kg;D组为术后至处死前每天腹腔给予EGb 17.5mg/kg;A组只打开T9椎板,不打击脊髓,不给药.术后24h、3d、5d、7d、14d对大鼠进行脊髓运动功能(BBB)评分.于术后24h、3d、5d、7d、14d处死动物(n=6),取T9节段脊髓,切片苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓大体组织结构变化,用免疫组织化学方法检测B细胞淋巴瘤/[白血病基因-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)在脊髓前角运动神经元中的表达变化情况.结果:各时间点B、C、D组大鼠脊髓运动功能(BBB)评分均显著低于A组(P＜0.01),伤后7d、14d时C、D组评分显著高于B组(P＜0.05),各时间点C组与D组评分比较无统计学意义(P＞0.05).HE染色C组和D组大鼠脊髓损伤区较B组坏死程度轻、形成囊腔少,A组正常;1周后D组较C组片状出血灶少,神经细胞肿胀不明显.各时间点B、C、D组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bcl-2阳性细胞数均显著高于A组(P＜0.01),C、D组显著高于B组(P＜0.01),7d、14d时D组显著高于C组(P＜0.05);各时间点B、C、D组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bax阳性细胞数均显著高于A组(P＜0.01),C、D组显著低于B组(P＜0.01),7d、14d时D组显著低于C组(P＜0.01).结论:EGb可能通过抑制Bax表达、提高Bcl-2表达,抑制脊髓损伤后神经元凋亡,在运动功能恢复、损伤脊髓组织保护上发挥其有益作用,1周后EGb仍能抑制脊髓损害后的继发性损伤.
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矢车菊色素对高龄糖尿病大鼠B细胞淋巴瘤基因2及Bcl-2相关X蛋白基因表达的影响
目的 了解矢车菊色素对高龄2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki rats,GK大鼠)肾损害时B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated X protein,Bax)基因表达的影响.方法 25周龄雄性GK大鼠24只随机分为矢车菊组和对照组,每组12只.矢车菊组饲喂含10％葡萄糖的矢车菊色素-3-葡萄糖苷溶液600 mg/L 8周,对照组饲喂10％葡萄糖溶液8周.每周测量体重及空腹血糖,8周后处死.RT-qPCR检测大鼠左肾Bcl-2、Bax mRNA表达,同时检测左肾脏器指数、血清糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,GHbA1c)并观察右肾病理损害.结果 矢车菊组肾Bcl-2 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).矢车菊组Bax基因与对照组比,mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).矢车菊组GK大鼠的体重、空腹血糖、血清GHbA1c和左肾脏器指数较对照组均降低(P＜0.05).与对照组比较,矢车菊组肾脏病理损害明显减轻.结论 矢车菊色素可降低GK大鼠的体重、空腹血糖和血清GHbA1c水平,减轻糖尿病的肾损伤,可能与促进Bcl-2基因表达有关.
关键词： 矢车菊素 B细胞淋巴瘤/白血病基因-2 Bcl-2相关X蛋白 -
大蒜素对膀胱癌细胞增殖和B细胞淋巴瘤-2表达的影响
目的 探讨大蒜素对膀胱癌BIU-87细胞的增殖及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响.方法 用不同浓度的大蒜素处理膀胱癌BIU-87细胞36h,以噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Bcl-2 mRNA的表达,蛋白免疫印迹技术检测Bcl-2蛋白表达的变化.结果 与对照组比较,经大蒜素处理的BIU-87细胞的生长抑制率增加(P＜0.05),且效应呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);大蒜素处理细胞后,BIU-87细胞中Bcl-2 mRNA及蛋白质的表达水平下调(P＜0.01).结论 大蒜素能抑制BIU-87细胞的增殖,且呈剂量和浓度依赖性,其机制可能与大蒜素下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达有关.
关键词： 大蒜素 膀胱癌 B细胞淋巴瘤/白血病基因-2 -
甲状腺癌组织中GPX3和Bcl-2、CyclinD1蛋白的表达及意义
目的 观察甲状腺癌组织中谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)和B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)、细胞周期素D1(CyclinD1)蛋白表达并探讨其意义.方法 采用免疫组化法检测100例份甲状腺癌组织、32例份甲状腺瘤组织和32例份正常甲状腺组织中GPX3、Bcl-2和CyclinD1蛋白表达,并分析其与甲状腺癌患者临床病理特征的关系,Spearman等级相关分析GPX3、Bcl-2和CyclinD1表达的关系.结果 GPX3蛋白在甲状腺癌组织中的阳性表达率(49％)低于甲状腺腺瘤(75％)和正常组织(81.25％)中(P均<0.05).Bcl-2蛋白在甲状腺癌组织中的阳性表达率(71％)高于甲状腺腺瘤组织(18.75％)和正常组织(6.25％)中(P均<0.05).CyclinD1蛋白在甲状腺癌组织中的阳性表达率(64％)高于甲状腺腺瘤组织(3.125％)和正常组织(3.125％)中(P均<0.05).三种蛋白的表达均与甲状腺癌患者性别、年龄无关,而与癌组织类型、淋巴结转移有关(P均<0.05),但在甲状腺癌组织中GPX3蛋白和Bcl-2蛋白的表达无关(r=-0.079,P>0.05),GPX3蛋白和CyclinD1蛋白表达无关(r=0.152,P>0.05),而Bcl-2蛋白和CyclinD1蛋白表达呈正相关(r=0.393,P<0.05).结论 甲状腺癌组织中GPX3蛋白表达降低,Bcl-2、CyclinD1蛋白表达升高;三者可能与甲状腺癌的发生发展有关,而Bcl-2、CyclinD1蛋白可能在甲状腺癌的发生发展中发挥协同作用.
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缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响及机制
目的 观察缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响并探讨其机制.方法 取健康雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,每组8只.假手术组:大鼠麻醉后于上腹部正中取一长3.5 cm纵切口,将腹壁各层依次切开,肝脏显露后进一步游离出肝十二指肠韧带,关腹,无其他干预.缺血再灌注组:在假手术组基础上,游离肝十二指肠韧带,用无损伤动脉夹将肝门区域夹闭,缺血30 min后取下血管夹,使血管开放,对肝脏持续再灌注,后关腹.缺血后处理组:在缺血再灌注组基础上,血供完全恢复之前再灌注10 s,夹闭10 s,如此反复6个循环(共2 min)后完全恢复血供.比色法测定血清γ-GT、SOD活力,免疫组化法测定胆管组织中Bcl-2和Bax蛋白表达,采用原位缺口末端标记法测算胆管细胞凋亡指数(AI),HE染色后光镜下观察胆管上皮细胞基本形态学变化.结果 IR组、IPO组、SO组血清γ-GT值分别为(34.64±3.28)、(26.30±3.32)、(17.33±2.08)U/L,三组间两两比较,P均<0.05.SO组、IR组、IPO组大鼠血清SOD活力值分别为(58.26±3.00)、(60.28±3.73)、(61.53±7.99)U/mL,各组间比较,P均>0.05.IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bcl-2蛋白阳性表达率分别为(42.67±3.73)%、(77.94±5.25)%、(18.21±4.16)%,三组间两两比较,P均<0.05.IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bax蛋白阳性表达率分别为(90.17±2.12)%、(70.10±4.27)%、(30.63±3.00)%,三组间两两比较,P均<0.05.IR组、SO组、IPO组AI分别为79.31±1.12、26.06±2.27、58.90±2.75,三组间两两比较,P均<0.05.IPO组病理改变较IR组明显减轻,肝小叶结构较完整,肝细胞变性程度减轻,汇管区胆管上皮连续完整,炎细胞浸润少.结论 缺血后预处理通过促进肝内胆管组织中Bcl-2蛋白表达、抑制Bax蛋白表达,抑制SD大鼠肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞的损伤.
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丹参酮ⅡA对鼠脑缺血再灌注损伤凋亡基因表达的影响
目的 探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对脑缺血再灌注损伤大鼠B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)及B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)蛋白表达的影响.方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan ⅡA低剂量治疗组和Tan ⅡA高剂量治疗组.线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.Tan ⅡA高、低剂量治疗组分别于术前连续灌胃给予相应剂量Tan ⅡA 3 d,1次/d.除假手术组外的各组于脑缺血90 min再灌注24 h,进行HE染色观察病理形态学变化和神经症状评分,免疫组化法观察大鼠额顶部皮质Bcl-2和Bax蛋白表达.结果Tan ⅡA高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,Tan ⅡA高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组.Tan ⅡA高、低剂量治疗组神经功能缺失评分较缺血再灌注组降低(P<0.05).与假手术组比较,缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加, Bcl-2 /Bax比值下降(P<0.05).与缺血再灌注组比较,Tan ⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达、减少Bax表达,上调Bcl-2 /Bax比值,高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05).结论Tan ⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与通过增加Bcl-2表达,减少Bax表达,上调Bcl-2 /Bax比值抗凋亡有关.
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泡泡浴对新生期惊厥所致神经行为缺损及海马相关基因表达的远期影响
目的 探讨新生期大鼠反复长程惊厥对其神经行为和海马凋亡/自噬蛋白B细胞淋巴瘤/白血病基因-2( Bcl-2)、Beclin-1和可塑性相关基因-1(PRG-1)表达的远期影响及泡泡浴的干预效果.方法 采用随机数字表法将日龄6d的SD大鼠分成对照组、水疗对照组、惊厥组及惊厥水疗组,每组15只.将惊厥组及惊厥水疗组大鼠置于实验舱中,并给予三氟乙醚吸入诱导其惊厥发作,持续30 min,连续作用6d；对照组及水疗对照组大鼠亦于相同时间点置于实验舱内,但未给予三氟乙醚吸入.于末次惊厥后次日给予惊厥水疗组及水疗对照组泡泡浴干预,持续28 d.4组大鼠于出生后第26天进行旷场实验,于出生后第43 ～49天进行Morris水迷宫测试,于出生后第50天处死并提取海马组织,采用免疫印迹技术检测各组大鼠海马Bcl-2、Beclin1及PRG-1表达情况.结果①惊厥组旷场得分较对照组明显降低(P＜0.05),惊厥水疗组旷场得分较惊厥组明显升高(P＜0.05).②Morris水迷宫测试发现各组大鼠逃避潜伏期均随时间进展逐渐缩短,其中惊厥组第4,5天时逃避潜伏期较对照组明显延长(P＜0.05)；惊厥水疔组第4天时逃避潜伏期较惊厥组明显缩短(P＜0.05).③惊厥组海马PRG-1表达较对照组明显增强(P＜0.05),惊厥水疗组PRG-1表达与惊厥组间差异无统计学意义(P＞0.05)；惊厥组海马Bcl-2表达较对照组明显降低(P＜0.05)；惊厥水疗组Bcl-2表达较惊厥组显著增强(P＜0.05)；各组大鼠Beclin1表达组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 新生期反复长程惊厥对大鼠神经行为功能具有远期损害作用,其病理过程可能与上调海马PRG-1表达及下调Bcl-2表达有关；早期运动训练能够显著缓解反复惊厥所致的神经行为损伤,其治疗机制可能与上调海马Bcl-2表达有关.
关键词： 惊厥 泡泡浴 新生期 B细胞淋巴瘤/白血病基因-2 可塑性相关基因-1
