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  • 肝癌中基质金属蛋白酶-9表达的临床意义

    作者:蔡阳;封光华;吴志全;樊嘉;贺斌;刘银坤;叶胜龙;汤钊猷

      已有资料表明,肿瘤细胞能分泌大量基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP),且具有高转移倾向的肿瘤细胞分泌的金属蛋白酶的含量亦高,对肿瘤的侵袭和转移起着极为重要的作用〔1〕。基质金属蛋白酶-9(MMP-9,E.C.)是金属蛋白酶类的主要成员之一。我们应用逆转录聚合酶链反应和明胶酶谱法检测肝细胞癌(HCC)组织、癌栓组织和癌旁组织中MMP-9 mRNA的表达水平和酶活性表达,以探讨其在HCC侵袭和转移过程中的意义。  1.资料与方法:7例正常肝组织,47例手术切除并病理证实的癌及癌旁组织,其中8例有门静脉主干癌栓。有包膜者25例,无包膜者22例。大肝癌24例(>5 cm),小肝癌23例(≤5 cm)。所有病例均无肝外转移征象。方法:(1)RT-PCR:使用Trizol溶液一步提取mRNA,条件为94℃ 1 min,65℃ 1 min,循环30次。扩增条带特异性经酶切分析证实。PCR产物经2%琼脂糖电泳,VDS扫描。以MMP-9和内标β-actin扫描值的比值作为MMP-9 mRNA的表达相对值,半定量分析MMP-9 mRNA表达水平。(2)明胶酶谱法:制备蛋白抽提液,行SDS-PAGE电泳后,将凝胶分别置于洗脱液、漂洗液、孵育液、染色液、脱色液中处理,后拍照。(3)统计学处理:MMP-9 mRNA表达相对值以±S,两组间均数采用t检验,两组间率采用χ2检验。

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