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口腔黏膜细胞与膀胱黏膜下脱细胞基质复合物构建组织工程化尿道的实验研究
目的 探讨以兔口腔黏膜细胞与同种异体膀胱黏膜下脱细胞基质(BAMG)复合物构建组织工程化尿道的可行性.方法 新西兰雄性兔24只,距尿道外口2.0 cm剥离尿道黏膜(2.0 cm×0.8 cm)后,随机分实验组和对照组,每组12只.切取实验组兔口腔黏膜组织分离细胞,在有灭活的3T3细胞培养皿上进行培养扩增,将培养获得的第2代口腔黏膜细胞种植于BAMG(2.2 cm×1.0 cm)上,植入实验组兔尿道缺损区域;对照组单纯采用无细胞植入的BAMG修复尿道.分别于术后1、2、6个月观察动物排尿情况,行尿道造影,8 F尿管插管确定有无狭窄;随后处死实验兔,取修复段尿道黏膜组织行组织学检查.结果 细胞培养获得的口腔黏膜细胞形态均一,生长良好;组织形态学、扫描电镜观察见口腔黏膜细胞与BAMG具有良好的相容性.实验组兔术后1、2、6个月伤口愈合良好、排尿通畅,无尿瘘发生,组织学和尿道造影检查显示带细胞修复的尿道形态完整、清晰宽敞,无狭窄发生;术后6个月植入的口腔黏膜细胞仍然存在,并明显扩增.对照组兔则出现排尿困难、尿道狭窄,光镜下发现黏膜及黏膜下存在严重的炎症反应.结论 兔口腔黏膜细胞与同种异体BAMG复合后,可成功用于尿道缺损的修复,构建组织工程化尿道.
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应用人自体血清培养人口腔黏膜上皮的实验研究
目的研究人自体血清培养人口腔黏膜移植生长的生物学特性,为组织工程化尿道提供新材料.方法将人自体血清培养黏膜移植于裸鼠体内,分别于移植后2、3、4、6周观察培养黏膜生长与转归,应用anti-HLA免疫荧光鉴定成活黏膜组织属性,应用抗人Ⅳ型胶原及抗人层黏蛋白为基底膜形成指标.结果裸鼠体内移植培养黏膜成活生长分化良好,anti-HLA免疫荧光证实为移植的培养人黏膜组织;免疫组化发现移植后3周开始形成基底膜,4周形成完整的基底膜.结论自体血清培养的人口腔黏膜可形成功能完整的上皮组织.
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不同营养状态下大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率的关系研究
目的 通过研究手术前后不同营养状态下大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率,探讨两者间的相关性.方法 雄性SD 大鼠(250±20g)60 只,随机分为术前组、手术组并建立胃大部切除模型.用亚G1 峰法检测大鼠口腔与肠道黏膜细胞凋亡率,方差分析和相关性分析手术前后不同营养状态下,口腔与肠道黏膜细胞凋亡率的相关性.结果 术后可观察到口腔及肠道黏膜细胞凋亡率均有显著下降(P＜0.05),均约在术后7d 后凋亡率逐渐上升(P ＜ 0.05),这变化同我们测量的营养指标的变化是基本一致的.结果 证明口腔及肠道黏膜细胞凋亡率具有显著相关性(P＜0.05).结论 通过对口腔及肠道黏膜细胞凋亡率及传统的营养状况评价指标的观察,发现口腔及肠道黏膜细胞凋亡率均随着机体营养状况的变化而变化.口腔黏膜细胞凋亡率可以及时反映肠道黏膜凋亡状况并有可能成为监测甚至预测机体营养状况的评价指标.
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甲醛暴露的医学生口腔黏膜细胞的DNA-蛋白质交联
目的研究医学生上解剖课甲醛暴露后对口腔黏膜DNA-蛋白质交联(DPC)的影响.方法以37名(男20名,女17名)正在上解剖课程的医学院学生和40名(男20名,女20名)同年级理学院的学生为研究对象.取口腔黏膜上皮细胞,应用改良的SDS-KCl沉淀法,测定口腔黏膜细胞DNA-蛋白质交联率.结果两组学生性别和年龄构成差异无统计学意义.解剖实验室空气甲醛浓度范围在0.42～1.57 mg/m3之间.医学院学生口腔黏膜细胞DNA-蛋白质交联率(25.72%±6.48%)高于对照组(22.88%±5.34%),P＜0.05.其中医学院女生DNA-蛋白质交联率(27.72%±5.76%)明显高于对照组女生(22.29%±4.20%),P＜0.01.结论医学生解剖课甲醛暴露可导致口腔黏膜细胞DNA-蛋白质交联率增高.女性对气态甲醛暴露可能较男性敏感.
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当头发与你短暂分离后
放疗后为什么会脱发化疗后为什么会脱发?多长时间能长出头发?这是很多患者非常关注的一个问题.化疗药物通过循环到达患者全身,在作用于肿瘤细胞的同时也作用于正常细胞,而且对一些快速生长的细胞如头发、口腔黏膜细胞及胃肠道黏膜细胞的破坏作用尤为强烈,因此头发脱落是化疗药物常见的副作用之一.
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口含冰块降低氟尿嘧啶相关性口腔溃疡的护理观察
氟尿嘧啶(5-Fu)是肿瘤科常用的化疗药物之一,它在抑制或杀灭肿瘤细胞的同时,对更新较快的口腔黏膜组织也可以产生明显的毒性作用[1].5-Fu 主要通过毛细血管到达口腔,破坏口腔黏膜细胞,终导致口腔溃疡.
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硅胶材料隆乳对人体口腔黏膜细胞状态的影响
背景：既往研究显示，口腔黏膜细胞的生存状态直接受人体营养状态的影响，因此可能是外科营养状态的良好指标，但该指标是否同样会受到外科手术创伤刺激影响这一问题的答案尚不明确。目的：观察硅胶隆乳相关外科创伤性刺激对口腔黏膜细胞生存状态的影响。方法：选择拟行硅胶隆乳的女性患者32例，其中有生育史13例，无生育史19例，年龄23-45岁，分别采用亚G1峰法及Ki-67法于硅胶隆乳前后检测患者口腔黏膜细胞的增殖率及凋亡率，对数据进行统计学比较。结果与结论：32例硅胶隆乳者均顺利完成手术，围术期未发生严重不良反应。32例硅胶隆乳患者隆乳前口腔黏膜细胞凋亡率及增殖率分别为(27.3±6.2)%与(27.8±5.8)%，隆乳后口腔黏膜细胞凋亡率及增殖率分别为(27.8±5.8)%与(20.2±7.7)%，隆乳前后口腔黏膜细胞凋亡率及增殖率比较差异均无显著性意义(P >0.05)。表明人体口腔黏膜细胞的增殖及凋亡并未受到硅胶隆乳相关外科创伤的明显影响，口腔黏膜细胞生存状态用于硅胶隆乳受者营养状态的评估可能具有一定的价值。
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口腔黏膜微核细胞组分析在遗传损伤及其相关疾病风险评价中的应用
口腔黏膜细胞易于收集、储存,与外界环境因素有恒定的接触,并具有外源物代谢活性.人口腔黏膜微核细胞组分析(BMcyt)广泛应用于监测机体微营养素状态,能够体现生活方式、遗传毒物对DNA结构与功能、细胞增殖和细胞死亡的影响.本文综述了BMcyt技术的进展及其在遗传损伤和相关疾病风险评价中的应用.
关键词： 口腔黏膜细胞 人口腔黏膜微核细胞组分析 遗传损伤 疾病风险评价 -
兔口腔黏膜细胞与灭活的3T3成纤维细胞的体外共培养
目的 探讨口腔黏膜细胞的培养方法,为进一步以口腔黏膜细胞为种子细胞构建组织工程化尿道提供实验依据.方法 体外分离口腔黏膜细胞,取部分细胞与经丝裂霉素灭活的3T3成纤维细胞进行共培养(共培养组),定期观察细胞形态变化及生长增殖情况.以非共培养的口腔黏膜细胞作为对照(非共培养组).同时,对体外培养获得的口腔黏膜细胞进行广谱角蛋白抗体(AE1/AE3)和K19免疫荧光染色鉴定;流式细胞仪检测第2代共培养组细胞的AE1/AE3阳性细胞百分比.结果 共培养组口腔黏膜细胞,呈现典型的"铺路石"状,细胞形态均一,可传代至7～8代.非共培养组口腔黏膜细胞则形态多样,传至第2代时,即开始出现老化,细胞贴壁及增殖能力均明显减弱.免疫荧光染色显示,体外培养获得的口腔黏膜细胞AE1/AE3免疫荧光染色阳性,40%细胞K19染色阳性.流式细胞仪检测结果表明,第2代共培养组口腔黏膜细胞AE1/AE3阳性细胞百分比》95%.结论 口腔黏膜细胞在有灭活的3T3成纤维细胞存在时可成功培养和扩增,为进一步将其作为种子细胞构建组织工程化尿道奠定了良好的基础.
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儿童口腔黏膜细胞内Ca2+含量与患龋状况的关系
目的探讨儿童口腔黏膜细胞内Ca2+含量与儿童患龋状况的关系.方法将46名3～5岁儿童根据龋蚀指数分为两组:龋病高危组(25例)、无龋组(21例).刮取儿童口腔黏膜脱落细胞,Fluo-3染色,用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+的荧光强度值,统计分析其与龋患程度的关系.结果高危组儿童口腔黏膜细胞内Ca2+的荧光强度低于无龋组,两组间差异有高度统计学意义;不同性别间细胞内Ca2+的荧光强度的差异无统计学意义;高危组儿童口腔黏膜细胞内Ca2+的荧光强度与dft、CSI呈负相关关系.结论儿童口腔黏膜细胞内Ca2+的荧光强度与龋患程度具有一定的相关性,龋患程度重则细胞内Ca2+的荧光强度低.口腔黏膜细胞内Ca2+的荧光强度值或可作为预测儿童龋病易感性的一项参考指标.
关键词： 儿童 口腔黏膜细胞 钙离子 荧光强度 激光扫描共聚焦显微镜 -
化疗对患者口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响及中药的干预作用
[目的]了解化疗药物引起患者口腔黏膜溃疡的机制以及中药对其干预作用.[方法]选取48例因消化道肿瘤术后接受化疗患者,其中20例为健康对照组(A组),20例为单纯化疗(B组),28例化疗同时加用中药治疗(C组).用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜的凋亡率和增殖率,通过统计学分析各组患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的差别.[结果]化疗组口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率较健康对照组显著下降(P＜0.05),中药加化疗组口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率较单纯化疗组显著增加(P＜0.05),较健康组有所下降,但无统计学意义(P＞0.05).[结论]化疗可以降低口腔黏膜细胞的凋亡和增殖状态,中药可改善这一状况,减轻化疗引起的口腔黏膜溃疡.
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安徽省汉族人氨基糖苷类抗生素致耳聋患者基因突变的研究
目的：研究安徽省汉族人氨基糖苷类抗生素致耳聋( AAID)患者基因突变与其非综合征性耳聋( NSHL)的关系,建立口腔黏膜细胞基因组DNA新一代基因测序法( NGS)。方法由122例NSHL患儿及120例健康儿童,取得口腔黏膜基因组DNA,应用NGS对GJB2、12S rRNA 基因测序。结果口腔黏膜细胞的基因组DNA质量较好,能满足NGS 研究需要；在122例NSHL患者中,28例GJB2基因突变,占耳聋患者的22．95%；10例12S rRNA基因突变,占耳聋患者的8．20%。120例健康儿童中,未发现基因突变( P <0．01)。结论口腔黏膜细胞基因组DNA 的NGS检测法能用于检出安徽省汉族人 AAID 基因突变；在安徽 NSHL 患者中GJB2、12S rRNA基因突变有其一定的特点,能对安徽省汉族人AAID基因突变研究提供帮助。
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小肠黏膜下基质复合口腔黏膜细胞和转染TIMP-1 siRNA的成纤维细胞用于尿道重建的实验研究
目的:探索应用小肠黏膜下基质(small intestinal submucosa,SIS)复合口腔黏膜细胞(oral keratino cytes,OK)和转染金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)siRNA的成纤维细胞(fibroblasts,FB)构建组织工程化尿道的可行性.方法:分离培养OK,FB,并用TIMP 1 siRNA转染FB,检测转染前后FB分泌Ⅰ型胶原的改变.剥离24只雄性兔子腹侧尿道黏膜2.0 cm×0.8 cm,并将其平均分为3组,每组8只.第1组应用单纯SIS修复,第2组应用SIS复合OK修复,第3组应用SIS复合OK和转染TIMP 1 siRNA的FB修复.术后1个月、6个月行逆行尿道造影检查和组织学分析评估三组尿道重建的效果.结果:转染TIMP-1 siRNA的FB分泌Ⅰ型胶原明显减少.逆行尿道造影下,第1组兔子中有5只尿道管腔通畅,第2组有6只,第3组有7只.组织学上,第1组在1个月时形成了不完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较明显.第2组和第3组在1个月时形成了完整的尿路上皮,在6个月时纤维化和炎症较轻,且第3组生长的尿路上皮、平滑肌和血管较第2组明显增多.结论:OK和转染TIMP-1 siRNA的FB可作为尿道组织工程中的种子细胞用于尿道修复重建,OK和转染TIMP-1 siRNA的FB可抑制尿道瘢痕的产生.
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手术创伤对口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响
目的 观察不同手术创伤程度人群口腔黏膜细胞(OME)的凋亡和增殖,探讨手术创伤对在体口腔黏膜细胞状态的影响.方法 选取乳腺癌保留乳房手术患者10例,乳腺癌根治术患者13例,于手术前、手术后分别用亚G1峰法和Ki-67分别检测其口腔黏膜凋亡率和增殖率；非配对t检验分析两组间及每组内手术前、手术后口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率的差异.结果 乳腺癌保留乳房手术组与乳腺癌根治术组患者在年龄、性别、营养状态、一般状况上差异无统计学意义(P＞0.05),乳腺癌保留乳房手术组患者与乳腺癌根治术组患者手术前口腔黏膜凋亡率分别为(27.51±0.61)％、(27.33±0.53)％,差异无统计学意义(P＞0.05)；增殖率分别为(15.98±0.36)％、(16.04±0.55)％,两组数据差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌保留乳房手术组患者与乳腺癌根治术组患者手术后口腔黏膜的凋亡率分别为(27.01±0.46)％、(27.36±0.50)％,差异无统计学意义(P＞0.05)；增殖率分别为(16.25±0.25)％、(16.24±0.64)％,差异无统计学意义(P＞0.05).保留乳房手术组患者与乳腺癌根治术组患者每组内手术前后口腔黏膜凋亡率和增殖率差异均无统计学意义.结论 手术创伤对在体口腔黏膜细胞凋亡和增殖状态无明显影响.
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口腔黏膜细胞凋亡率与患者手术前后营养状况的关系
目的通过对比一组胃肠道手术患者手术前、后口腔黏膜细胞凋亡率和一系列传统的营养状况评价指标的动态变化,探讨口腔黏膜细胞凋亡率与人营养状况的相关性.方法连续观察一组经胃肠道手术患者.手术前至手术后一段时间内连续检测患者口腔黏膜细胞凋亡率,同时在术前、术后第3、7天测定总淋巴细胞计数、前白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、白蛋白.结果术后首先观察到口腔黏膜细胞凋亡率显著下降(P＜0.01),约在术后7 d后口腔黏膜凋亡率逐渐上升(P＜0.01),这变化同我们测量的各营养指标的变化是基本一致的.结果证明口腔黏膜细胞凋亡率同淋巴细胞计数、转铁蛋白、前白蛋白等传统的营养指标具有显著相关性(P＜0.05).结论口腔黏膜细胞凋亡率随着机体营养状况的改变而变化.口腔黏膜细胞凋亡率有可能成为一个新的评价,监测甚至预测机体营养状况的评价指标.
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肠外瘘对患者口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响
目的:通过测定口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率来评估肠外瘘对患者营养状况的影响.方法:选取25例肠外瘘住院患者为实验组,同时设12例健康人作对照组.用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率.通过统计学分析两组之间口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的差异.并检测实验组的血液生化指标来比较该实验方法与传统的营养评估方法的优缺点.结果:肠外瘘患者口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率明显低于健康对照组,肠外瘘患者口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率的降低早于血液生化指标的改变.结论:口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的变化与肠外瘘导致的营养障碍密切相关,其检测可以作为一种新的灵敏、可靠的营养评估方法.
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化疗对患者口腔黏膜细胞生长状态的影响
目的:了解化疗药物对患者口腔黏膜细胞的生长更新状态的影响.方法:选取21例因胃部肿瘤行胃大部切除术后接受化疗患者,其中10例为术后第1次化疗,11例为术后第6次化疗.用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜的凋亡率和增殖率,常规留取患者的血常规资料,通过统计学分析化疗患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率与骨髓抑制之间的关系.结果:第6次化疗组的白细胞计数较第1次化疗组和健康对照组显著下降(P<0.01):第6次化疗组口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率较第1次化疗组和健康对照组显著下降(P＜0.05).结论:化疗可以影响口腔黏膜细胞的凋亡和增殖状态.
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口腔黏膜细胞凋亡和增殖率与化疗患者营养状况的关系
目的 通过测定口腔黏膜细胞的凋亡和增殖率来评估化疗患者的营养状况.方法 选取65例因胃部肿瘤行胃大部切除术后1个月接受化疗的患者,根据化疗后不同程度恶心呕吐反应造成的短期食物摄入障碍分为轻、中和重度营养障碍组.用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率.通过统计学分析不同营养状态患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的差异.结果 轻度和中度营养障碍患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率在化疗前后没有出现显著性改变(P0.05);重度营养障碍患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率则较化疗前显著下降(P<0.05).同时各组患者的血常规及血液营养指标检测未出现显著性改变.结论 口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率与不同化疗副反应所致的急性营养障碍程度密切相关.
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应用组织工程口腔黏膜重建尿道的初步实验研究
目的 探讨兔口腔黏膜细胞的体外培养方法,并以其为种子细胞与异体膀胱黏膜下脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)复合,构建组织工程尿道. 方法 18只10周龄雄性新西兰大耳白兔,体重0.3～0.5 kg.取其中12只兔口腔黏膜组织,分离获得口腔黏膜细胞.将口腔黏膜细胞分别接种于有3T3细胞及无3T3细胞的培养皿进行培养,接种后第2天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,绘制细胞生长曲线,观察生长增殖情况,并行免疫荧光组织化学染色鉴定.取余6只兔膀胱,经脱细胞处理制备BAMG,随机取1 cm×1 cm组织行HE染色,观察脱细胞效果.将接种于有3T3细胞培养皿培养获得的第2代口腔黏膜细胞种植于BAMG上,培养1周后,行HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG的复合状况. 结果 倒置相差显微镜下观察,接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞可传至7～8代,其细胞形态均一,功能良好;无3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞形态多样,传至第2代时,即开始出现老化.细胞生长曲线显示,两种方法培养的口腔黏膜细胞均于第8天开始呈对数增长,第14天达峰值.接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞,培养至融合时所获得细胞数量明显多于接种于无3T3细胞培养皿的u腔黏膜细胞.两种方法培养的口腔黏膜细胞行免疫荧光染色,均呈绿色荧光.HE染色观察,BAMG经脱细胞处理后未见细胞,脱细胞效果良好.复合培养1周后,HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG复合良好. 结论 兔口腔黏膜细胞可在体外成功培养、扩增,与同种异体BAMG复合后生长良好,为构建组织工程尿道提供了一种新的选择.
关键词： 组织工程尿道 口腔黏膜细胞 膀胱黏膜下脱细胞基质 体外复合 兔 -
口腔黏膜细胞的X小体染色法
口腔黏膜染色是镜检分析人体细胞X小体的简单方法.只需用一个刮舌板从面颊部内侧刮取细胞即可,将刮取的细胞置于载玻片上,然后固定并染色.成功的要点在于得到足够的细胞.方法是用一手的手指在面颊外加压,另一手持刮舌板刮颊黏膜,然后将取得的黏膜涂于载玻片上(面积约1平方英寸),在其干燥之前固定.另外,为了保证收集到较深部且健康的细胞,应将颊部第一次取得的材料弃去,选用第二次轻轻刮取所得的细胞.
