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肾癌相关新基因GYLZ-RCC18反义寡核苷酸转染对肾癌细胞系GRC-1的作用
目的探讨肾癌相关新基因GYLZ-RCC18在肾癌发生发展中的作用机制. 方法采用逆转录PCR方法检测GYLZ-RCC18在肾癌和正常肾细胞系中的表达,将第一编码区起始处的20个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC-1,连续观察对肾癌细胞生长、增殖凋亡、死亡率、形态学的影响. 结果 GYLZ-RCC18在肾癌细胞系中表达明显高于正常肾细胞系;导入 GYLZ-RCC18反义寡核苷酸后,GRC-1细胞的核分裂可明显减少,导致GRC-1细胞死亡,抑制癌细胞的生长和增殖活性,并可特异诱导GRC-1连续凋亡. 结论 GYLZ-RCC18是肾癌发生发展密切相关的癌基因,其表达可促进肾癌细胞的生长和增殖,并通过抗癌细胞死亡和凋亡机制对癌细胞起保护作用.
关键词： 肾肿瘤 癌 基因 GYLZ-RCC18 -
肾癌特异相关新基因GYLZ-RCC18的克隆及功能研究
目的克隆肾癌相关新基因GYLZ-RCC18的全长,并探讨其功能.方法应用SMART RACE技术克隆GYLZ-RCC18的全长,应用逆转录PCR的方法检测其在肾癌组织和细胞系中的表达特点,以及与肾癌组织分级、分期的关系,通过转染GYLZ-RCC18的反义寡核苷酸阻断其表达,观察其对肾癌细胞系生命特征的变化.结果 GYLZ-RCC18全长约3.5 kb(基因号:BE825133).GYLZ-RCC18在肾癌特异高表达,正常肾表达量极低甚至不表达,两者表达量差别1-9倍之间;GYLZ-RCC18在高分级、高分期肾癌中表达明显高于低分级、低分期肾癌的表达.转染反义基因可明显抑制GRC-1的生长、降低其增殖活性、减少核分裂、并诱导其持续性凋亡.结论本研究表明GYLZ-RCC18是肾癌发生发展密切相关的重要新的癌基因,它的表达与肾癌细胞的生存、增殖、抗凋亡发展密切相关,它的成功克隆为今后肾癌分子机制研究提供了新的理论依据.
关键词： 肾肿瘤 癌 基因 GYLZ-RCC18
