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磁流体靶向热疗小鼠胰腺癌细胞
目的 观察磁流体在交变磁场中的升温行为并探讨其作为热疗介质应用于小鼠胰腺癌细胞(mouse pancreatic cancer cell, MPC-83)的热疗效应. 方法 将不同浓度Fe3O4水基磁流体置于中频交变磁场中观察其升温情况.透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)观察磁性纳米颗粒被MPC-83吞噬的情况,并将其置于交变磁场中升温至44 ℃,同时与兔平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC)比较,流式细胞仪检测细胞凋亡. 结果 在交变磁场中磁流体迅速升温,且升温与磁流体的浓度呈显著正相关关系(n=5,r=0.937,P=0.019).透射电镜下(×120 000)观察磁性纳米颗粒可被MPC-83吞噬.磁感应热疗后流式细胞仪检测MPC-83凋亡率为(26.87±8.50) %与SMC(18.45±3.28)%无统计学差异(n=3,t=1.601,P=0.185). 结论 肿瘤治疗用磁流体可以在交变磁场中产热,通过改变磁流体浓度可进行温度控制,小鼠胰腺癌细胞对磁性纳米颗粒有较强的吞噬能力,且对温度升高比正常细胞敏感.
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IL-2基因逆转录载体的构建与B7联合表达的抗肿瘤研究
目的:IL-2是一种具有抗肿瘤作用的细胞因子,B7是诱导细胞免疫的共刺激分子,联合在肿瘤细胞中表达IL-2或IL-2/B7,诱导机体抗肿瘤免疫应答,为IL-2基因治疗进入临床提供依据.方法:利用逆转录载体PLXSN构建了插入IL-2基因的重组逆转录病毒载体.将重组逆转录病毒载体引入包装细胞CRIP,测病毒滴毒为6×105CFU/mL,用成熟重组逆转录病毒转染小鼠胰腺癌细胞MPC-35,经G418筛选得抗性克隆MPC-351,PCR检测证实目的基因已整合在MPC-35细胞基因组中;引入携带B7基因的腺病毒载体转染MPC-351,经流式细胞仪证实B7基因已在MPC-351中获得表达,命名为MPC-352.结果:采用ELISA方法检测MPC-351、MPC-352分泌IL-2水平分别为95.5 U/mL及92.5 U/mL,与亲代MPC-35比较,MPC-351体外增长率及形态无明显变化;MPC-352无形态的改变,但增长速度减缓,流式细胞仪测试显示:MPC-35本身不表达MHC-class Ⅰ类分子,MPC-351有ICAM-1的表达增加,MPC-352有class Ⅱ和ICAM-Ⅰ的表达增加;小鼠体内移瘤实验表明:与作为对照的MPC-35细胞相比,MPC-351,MPC-352在小鼠体内的生长明显受抑制,出瘤时间晚(P＜0.05),瘤块小(P＜0.01),生命时间延长(P＜0.01).
