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5株携带blaNDM-5基因大肠埃希菌临床株的分子流行特征分析
目的 探讨耐碳青霉烯类抗菌药物大肠埃希菌的耐药机制并对分离株的分子流行特征进行分析,为医院感染的防控提供依据.方法 选取2015年5月-2016年10月住院患者标本分离的5株耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌,产金属碳青霉烯酶的筛选采用亚胺培南/EDT A复合E-test条,采用PCR方法检测菌株携带的碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶、ampC酶和喹诺酮类耐药相关基因,并测序确认类型及其亚型,脉冲场凝胶电泳技术检测分离株间的同源性,液相质粒接合试验分析质粒的转移特性.结果 除了阿米卡星和氨曲南外,5株大肠埃希菌对目前测试的头孢菌素、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物都耐药,且金属酶表型实验结果都呈现阳性;5株大肠埃希菌携带不同的耐药基因,但都携带blaN DM-5和 blaT EM-1基因;脉冲场凝胶电泳显示5株大肠埃希菌的脉冲带型不一致,没有呈现克隆聚集性;质粒接合试验没有显示5株大肠埃希菌临床株(供体菌)将携带blaN DM-5的质粒转移到大肠埃希菌J53AziR(受体菌).结论 研究结果表明本地区存在携带blaN DM-5基因的大肠埃希菌的流行,但没有呈现克隆聚集暴发性,为预防和控制医院感染的暴发,必须重视和加强对耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌的监测.
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海南地区1株携带blaNDM-5大肠埃希菌的分离及耐药基因分析
目的 分析2014年海南地区临床分离的1株携带blaNDM-5大肠埃希菌的耐药表型及耐药基因.方法 收集临床分离耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌1株,经Vitek 2 Compact和E-test条进行菌株鉴定及药敏复核试验;改良Hodge试验和EDTA协同试验筛选碳青霉烯酶表型;PCR扩增并测序筛查碳青霉烯酶基因(blaNDM、blaKPC、blaGES blaIMP、blaVIM、blaoXA-48)和其他β-内酰胺酶基因(blaTEM、blasHV、blaCTX);多位点序列分型(MLST)进行序列分型;接合转移试验、S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)、Southern印迹杂交方法分析其携带质粒的特征.结果 该菌株对所检测的包括碳青霉烯类的β-内酰胺类药物全部耐药,对阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、替加环素和多粘菌素B敏感;改良Hodge试验和EDTA协同增效试验阳性;基因扩增及序列比对显示与已报道的blaNDM-5同源性100％,同时检出blaTEM-1和blaCTX-M-55基因;MLST测序分型为ST5131;S1-PFGE、Southern印迹杂交显示blaNDM-5位于大小约50 000 bp的质粒上,并且为接合性质粒.结论 海南地区发现携带blaNDM-5的大肠埃希菌,该基因存在于可经接合传递的质粒上;该菌株同时携带blaTEM-1、blaCTX-M-55β-内酰胺酶基因.
