首页 > 文献资料
-
荧光实时PCR法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究
目的 建立检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mecA基因的荧光实时PCR法.方法 对荧光实时PCR法的实验条件进行优化,并用该法检测临床分离的109株金黄色葡萄球菌,其结果与苯唑西林纸片扩散法的结果进行比较.结果 109株金黄色葡萄球菌中,荧光实时PCR法检测出mecA基因阳性37株、阴性72株;苯唑西林纸片扩散法检测出MRSA 27株、MSSA 82株,经配对x2检验,荧光实时PCR法检出率显著高于苯唑西林纸片扩散法(P＜0.01).结论 荧光实时PCR法能敏感、特异检测MRSA并可实时监测反应进程,比普通PCR法更加简便、快速,可以弥补苯唑西林纸片扩散法漏检隐匿型、临界型耐药株的不足.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecA基因 荧光实时PCR -
实时荧光定量PCR技术在食源性细菌检测中的应用效果评价
[目的]探讨应用实时荧光定量PCR技术在食源性细菌检测中应用效果.[方法]分别应用细菌培养法,PCR检测法,实时荧光定量PCR方法对987例群体食源性食物中毒腹泻患者和疑似患者的粪便或呕吐物2084份样品进行食源性病原体检测.[结果]检测2 084个感染性腹泻标本,细菌培养法阳性检出率45.2%,普通PCR检测法阳性检出率63.4%;采用实时荧光PCR技术阳性检出率90.1%.实时荧光定量PCR检测法阳性检出率显著高于细菌培养检测法和普通PCR检测法,相比较均有显著性差异(P＜0.05).[结论]实时定量荧光定量PCR技术准确、快速、简便、特异性强,在食源性细菌检测中,能为突发食源性食物中毒事件提供更早的控制措施并争取时间.
-
空肠弯曲菌hipO基因的Real-time PCR检测研究
目的 建立基于新型Taqman荧光探针的荧光实时(Real-time)PCR方法用于空肠弯曲菌的筛选检测与快速鉴定.空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是近十几年来在世界范围内广泛重视的人畜共患病原菌,可以导致人类的急性肠炎与食物中毒,并能引发格林-巴利综合征等并发症.为更好地利用分子生物学技术对空肠弯曲菌进行快速、准确的基因检测,本研究从样品增菌液与单菌落中提取细菌DNA,建立了针对空肠弯曲菌特异的hipO (hippuricase,马尿酸酶)基因的Real-time PCR方法,用于空肠弯曲菌的快速筛选检测与可疑菌落快速鉴定.试验结果表明,该方法检测细菌的灵敏度为1～10CFU,人工布菌鸡肉的检测灵敏度为1～10CFU.本研究所建立的空肠弯曲菌荧光实时PCR方法具有准确、可靠、快速的特点.
-
荧光实时PCR检测法在突发公共卫生事件的应用
目的:应用实时荧光PCR(real-time fluorescence PCR)方法及国标(GB)方法,对东莞市2006～2007年突发公共卫生事件中可疑食品及生物样品,检测食源性病原体,对两种方法的检出率及效率进行比较.方法:针对2006～2007年东莞市突发公共卫生事件,同时运用实时荧光PCR方法及国标方法对沙门菌(Sa)、副溶血性弧菌(Vp)、金黄色葡萄球菌(Sta)及志贺菌(Sg)等病原菌进行增菌、分离及鉴定,并将两者结果进行比较.结果:实时荧光PCR与GB两种检测方法对突发公卫事件中所涉及样品的目标病原体检出具有较好的一致性,两种检测方法对肛拭及粪便样检出率,实时荧光PCR方法要比GB法高,对Vp、Sg及Sa的检出也比GB法高.结论:实时荧光PCR与国标检测方法组成实验方案,准确、快速、简便、特异性强,为其应用于突发公共卫生事件中可疑食源性病原体检测奠定良好基础.
