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常温机械灌注修复长时间冷保存供肝的大动物实验研究
目的 探索常温机械灌注(NMP)在挽救大动物边缘供肝中的价值.方法 6只雄性、10 ~ 12月龄巴马小型猪分为静态冷保存(SCS)6 h组和SCS 24 h组,每组3只,分别于供肝获取后SCS 6 h、24h后进行2hNMP复苏.基于荷兰Organ Assist公司Liver Assist系统和供体猪自身血液,整合四通道生理仪器及自制灌注管路搭建NMP平台.在NMP过程中分别于灌注0、15、60、90、120 min 5个时间点收集灌注液用于肝功能(ALT、AST)检测及血气分析(pH、氧分压).灌注结束取肝左叶相同位置少许组织,以10%甲醛固定,用于后续HE染色.结果 NMP开始时,SCS 24 h组ALT、AST水平略高于SCS 6 h组,之后AST、ALT水平均缓慢上升.NMP开始时SCS 24 h组pH值中位数为7.28,氧分压中位数为46 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa,下同),均低于SCS 6 h组(7.36,52 mmHg),经过2 h NMP后SCS 24 h组pH值和氧分压逐渐接近甚至优于SCS 6 h组.HE染色发现,灌注前SCS 24 h组肝脏充血严重,炎性细胞浸润明显;NMP2 h后,肝脏充血明显改善、炎性细胞减少,与SCS 6 h组无明显差异.结论 基于Liver Assist系统和供体猪自身血液成功搭建的NMP平台,可有效改善长时间冷保存的边缘供肝质量,提示NMP在修复边缘供肝、扩展供肝来源方面具有重要临床及基础研究价值.