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猪松质骨支架兔体内移植后周围组织Th1和Th2细胞因子的变化
目的 观察猪松质骨支架植入后周围组织Th1和Th2细胞因子的变化,为进一步改进材料和临床应用提供实验依据.方法 采用物理化学方法对猪松质骨进行处理得到猪松质骨支架,将松质骨支架植入兔背部近头侧皮下,分别于移植后1、2、4、8、12周5个时间点作支架周围组织的组织学检查(HE)及支架周围组织内Th1和Th2细胞因子mRNA检测(RT-PCR).结果 移植术后1周,植入物周围组织光学显微镜下可见大量炎性细胞浸润,以淋巴细胞和单核细胞为主,2周以后炎性细胞浸润逐渐减轻,4周时未见明显炎性细胞浸润,术后12周,组织内炎性细胞罕见.RT-PCR检测Th1细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA 1周时就有较高水平表达,2～8周逐渐下降,12周时降至低水平;Th2细胞因子IL-4、IL-10 mRNA 1周时低水平表达,2周、4周时表达水平表达逐渐上升,8～12周时维持较高水平表达.结论 猪松质骨支架异种松质骨支架材料无明显的免疫原性,植入后表现为一过性或暂时性的轻度炎性细胞反应.
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猪松质骨支架/骨髓基质干细胞复合体兔体内成骨
目的:生物衍生骨具有天然骨组织的三维立体孔隙.网架结构,有利于种子细胞的黏附、增殖.观察猪松质骨支架/骨髓基质干细胞复合体在兔体内成骨及支架的降解.方法:实验于2005-03/2006-12在中南大学湘雅医院中心实验室完成.选择健康家兔16只,3月龄左右,其中1只提供骨髓,另15只作组织工程骨植入,分4,8,12周3个时间点,每个时间点5只.采用Ficoll密度梯度离心法得到兔骨髓基质干细胞并诱导培养:采用物理化学方法对猪松质骨进行处理得到猪松质骨支架,与经诱导培养的骨髓基质干细胞体外复合培养后植入机体内,同时植入单纯猪松质骨支架做自身对照.结果:纳入动物15只,均进入结果分析.采用X射线、苏木精-伊红染色、Masson三色染色及图像分析观察猪松质骨支架屑髓基质干细胞复合体在兔体内成骨及支架的降解.①X射线观察:猪松质骨支架/骨髓基质干细胞复合体移植术后4周移植区周围可见少量散在分布的中密度影,8,12周时中高密度影逐渐向中心区增大.单纯猪松质骨支架移植术后各时间点移植区内均呈低密度影.②组织学观察:猪松质骨支架屑髓基质干细胞复合体植入后4周开始有新骨生成,支架开始降解;8周时新骨的形成及支架的降解都明显增加;12周时新骨继续增加,逐渐向成熟骨组织转变,可见少量哈佛系统,但骨小梁尚不典型,毛细血管增生明显,少量支架残留,未见炎症细胞.单纯猪松质骨支架植入后各时间点无新骨形成.③图像分析表明:猪松质骨支架/骨髓基质干细胞复合体植入后新骨组织随时间延长而增加,而材料组织随时间延长而减少,但新生骨组织增加与支架材料组织减少无明显直线相关(P＞0.05).结论:猪松质骨支架与骨髓基质干细胞复合移植后新骨逐渐形成,支架逐渐降解,是一种较理想的骨组织工程支架材料.
